细菌内同源重组高效制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl-XL的重组腺病毒载体

目的:制备含绿色荧光蛋白和抗凋亡基因bcl-X_L的重组腺病毒载体。方法:采用PCR方法从质粒pEGFP-C3-bcl-X_L中扩增出bcl-X_L基因,再亚克隆至腺病毒穿梭质粒中,形成转移质粒pAdTrack-CMV-bcl-X_L;然后与pAdEasy-1共转化BJ5183菌,采用细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒pAdEasy-1-gfp-bcl-X_L,筛选同源重组的阳性克隆;抽提的pAdEasy-1-gfp-bcl-X_L经PacI线性化后,再用LIPOFECTAMINE^TM2000介导转染至人胚肾293细胞内包装扩增出重组腺病毒颗粒;采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定;用氯化铯超高速梯度离心纯化获取高滴度的重组腺病毒rAd-gfp-bcl-X_L。结果:由pAdTrack-CMV-bcl-X_L和pAdEasy-1共转化BJ5183菌16-20h后,可获得35%的阳性重组体细菌克隆。由重组质粒DNA经293细胞包装后产生的重组腺病毒,经PCR检测表明含有目的基因bcl-X_L。氯化铯纯化所得重组腺病毒滴度约为65×10¹²PFU/L。结论:用细菌内同源重组法可以高效、简便、快捷地制备出重组腺病毒质粒载体,重组体病毒质粒经293细胞包装、扩增和氯化铯纯化后可制备出高滴度的重组腺病毒颗粒rAd-gfp-bcl-X_L,为人类相关疾病的基因治疗提供良好的基因转染载体。     

加味复方血脂清对糖尿病大鼠的降糖及抗氧化作用

目的探讨加味复方血脂清的降糖作用及对糖尿病大鼠脂质过氧化损伤的保护作用。方法:采用四氧嘧啶复制化学性糖尿病大鼠模型,实验分为对照组、模型组、治疗组,观察加味复方血脂清对糖尿病大鼠血糖的影响,检测血清、肝脏、胰腺组织MDA水平及血清总抗氧化能力。结果:糖尿病模型组血清总抗氧化能力较对照组明显下降(P相似文献   

益气温阳法中成药丸剂治疗变应性鼻炎临床研究

目的:临床观察益气温阳法中药丸剂治疗变应性鼻炎疗效。方法:将符合条件120例患者随机分治疗组(60例)和对照组(60例),治疗前及治疗后分别记录临床症状、体征及测血清IgE含量,用药5周结束时比较组间疗效及血清IgE含量;随访1年后记录临床症状、体征及测血清IgE含量,比较组间疗效及血清IgE含量。结果:组间近期疗效及血清IgE含量变化都无明显统计差异。组间近期疗效治疗组有效率为91.67%,对照组有效率为90%,血清IgE含量变化治疗前后无统计学差异(治疗前后均P>0.05);但组间血清IgE含量变化1年后随访(P<0.05)有统计学差异。组间远期疗效治疗组有效率为84.5%,对照组有效率为71.93%,无统计学差异。结论:辨证选用中成药丸剂治疗变应性鼻炎能远期降低血清IgE含量,疗效明显,临床上值得推广。     

老年充血性心衰并发继发性糖尿病30例临床分析

充血性心衰(心衰)临床上是以组织血液灌注不足以及肺循环和(或)体循环淤血为主要特征的一种综合征。心衰是老年人的常见病，也是老年人多种心血管病发展的终末阶段。心衰并发继发性糖尿病国内报道少见。我院2000年至2002年3月共诊治30例，现报道如下。     

运动结合淫羊藿喂养影响大鼠骨密度效果研究

淫羊藿是一种补肾壮阳药物,实践证明对提高运动员的运动能力确实很有效。虽然在竞技运动中被禁,但在医学、运动健康领域的药用价值仍值得探讨。本研究旨在通过动物实验证明淫羊藿在运动防治骨质疏松中的辅助疗效。1材料和方法1.1实验对象选用30只健康成熟的两月龄雌性大鼠,体重200.0g±8.5g左右,由中山大学医学院提供。以国家标准啮齿类动物饲料饲养,自由饮食,室温23~25℃,相对湿度55%~65%,光照时间12h/d。1.2实验方法随机分成3组:对照组10只;8周运动组10只;8周运动结合淫羊藿喂养组10只。运动组和运动结合淫羊藿喂养组训练采用段氏PT98型…     

Tris-NH4Cl法与明胶法检测外周血淋巴细胞微核率的比较研究

[目的]研究Tris-NH4Cl法与明胶法检测人外周血淋巴细胞微核率之间的关系。[方法]用161名来自某大学的健康人静脉血,分别用Tris-NH4Cl法和明胶法测其淋巴细胞微核率。[结果]两种检测方法间有相关关系(r=0.814,P﹤0.001),所测淋巴细胞微核率(‰)Tris-NH4Cl法(1.61±1.34)低于明胶法(2.17±1.43),两者间差异有统计学意义(t=8.242,P﹤0.01)。两种方法均发现微核率随年龄的增长逐渐升高。取95%的百分位数上限确定其正常参考值范围,Tris-NH4Cl法微核率≤4‰,明胶法微核率≤5‰。[结论]从对正常人的检测结果来看,两种检测方法均适用于临床检测。     

类似颈静脉球体瘤临床表现的面神经纤维瘤一例

患者女,36岁,因左侧突发性面神经麻痹10年,左耳搏动性耳鸣、听力下降4年余于2006年11月20日入院.10年前无明显诱因突然出现嘴角向右侧歪斜,当地医院以Bell面神经麻痹治疗,效果一般,但未进行性加剧.     

声带疾病纤维鼻咽喉镜手术356例疗效分析

声带息肉及小结是耳鼻喉科常见多发病之一。自 1996年 3月～ 2 0 0 1年 1月间 ,我们采用纤维鼻咽喉镜行声带息肉、小结及囊肿摘除术共 35 6例 ,经近期随访效果均获满意。现报告如下。1　临床资料1 1　一般资料 :本组病例男性 16 7例 ,女性 189例 ,年龄 18～ 70岁 ,以 30～ 4 0岁居多 ,占总数 4 0 % ;病程 2月至 10年。声带小结 2 35例 ,声带息肉 12 0例 ,声带囊肿 1例。1 2　手术方法 :术前禁食 ,术前半小时肌注鲁米那0 1ｇ ,阿托品 0 5ｍｇ。用 1%丁卡因作鼻腔、口咽、咽喉粘膜表面麻醉。鼻腔 3次 ,口咽部 2次 ,喉咽部 3次。术中再以 2 %…     

咖啡酰奎尼酸类化合物研究进展

综述了近年来咖啡酰奎尼酸类化合物在植物化学和药理活性方面的研究进展。对较为全面的双咖啡酰、三咖啡酰和多咖啡酰基奎尼酸的来源、分布及化学结构做了总结。对该类化合物的药理试验证明其具有抗氧化活性、治疗炎症、抑制微生物和病毒活性、酶抑制作用、保肝活性、抗凝血活性等多种生物活性。在植物中的广泛存在以及显著的治疗效果将会使咖啡酰奎尼酸类化合物成为新药开发的一个热点。     

六棱菊总黄酮的抗炎作用研究

 目的研究六棱菊总黄酮(LAF)的抗炎活性。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀、甲醛致大鼠足跖肿胀、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)致大鼠皮下气囊白细胞游走和角叉菜胶致大鼠皮下气囊肿4个模型分别考察LAF对炎症反应3个不同时相的抑制作用,并通过检测肾上腺中胆固醇和维生素C的含量,了解药物对肾上腺皮质系统的影响。结果LAF在50,100和200 mg·kg^-1剂量下能显著抑制小鼠耳肿胀,抑制率分别为41.0%,52.6%和68.4%。在200 mg·kg^-1给药剂量下,能显著抑制甲醛致炎后3,6,12和24 h的足肿胀,抑制率分别为21.4%,33.3%,56.5%和76.2%;能显著抑制CMC-Na致炎后3和6 h的大鼠皮下气囊白细胞游走,抑制率分别为42.5%和54.4%;能显著抑制角叉菜胶所致大鼠皮下气囊肉芽组织增生和炎性渗出,抑制率分别为51.5%和54.0%。此外,LAF对大鼠肾上腺中胆固醇和维生素C含量以及肾上腺指数均无显著性影响。结论LAF对以上3种炎症反应均具有显著的抑制作用,并与2.5 mg·kg^-1剂量地塞米松接近;对二甲苯致小鼠耳肿胀模型的抗炎活性在50mg·kg^-1剂量下强于穿心莲内酯(200 mg·kg^-1)和齐墩果酸(200 mg·kg^-1);其抗炎机制可能并不依赖于下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的存在。