目的研究淫羊藿对光感受器细胞的保护作用,为淫羊藿配伍应用治疗相关视网膜退行性疾病提供药效学依据。方法将雌性BALB/c小鼠随机分为未光照组(No light)、光照组(light vehicle)、淫羊藿干预组(Epimedium),每组6只。采用强光照射的方法制备小鼠光感受器细胞退行性病变模型,以临床常用剂量淫羊藿水煎液腹腔注射小鼠2次。采用光学相干断层扫描技术分析视网膜结构,采用视网膜电图分析视网膜功能,采用免疫组织化学的方法分别分析光感受器细胞视紫红质(rhodopsin)和视蛋白M(opsin-M)、双极细胞蛋白激酶Cα(PKC-α)、水平细胞钙结合蛋白D(calbindin-D)和神经胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;采用TUNEL法分析视网膜细胞凋亡情况。结果光照后,小鼠视网膜外核层缺失,视网膜功能受损;视网膜Rhodopsin、Opsin-M、PKC-α、Calbindin-D和GFAP等蛋白表达缺失或异常;外核层出现大量TUNEL阳性细胞。淫羊藿干预的小鼠视网膜结构完整、功能正常;上述蛋白与未光照小鼠相比,未见异常表达;视网膜外核层未见细胞凋亡。结论淫羊藿对光损伤引起的光感受器细胞退行性改变具有显著的治疗作用。 相似文献
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目的 探讨在细胞内质网应激状态下，淫羊藿苷保护光感受器细胞的作用机制。方法 以毒胡萝卜素(0.2μmol/L)诱导小鼠视锥细胞(661W细胞)内质网应激模型，采用阿尔玛蓝染色法检测细胞活性，蛋白免疫印迹法检测未折叠蛋白效应相关蛋白——磷酸化蛋白激酶样内质网激酶(p-PERK)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)表达水平，荧光成像和钙比例法检测Ca2+含量，荧光染色法评价线粒体功能(线粒体通透性转换孔和膜电位)。以体外分子对接技术分析淫羊藿苷与内质网钙-ATP酶的结合及相互作用。结果 毒胡萝卜素可诱导661W细胞死亡；淫羊藿苷(2.22～20.00 nmol/L)能够抑制毒胡萝卜素引起的661W细胞死亡(P<0.01)。毒胡萝卜素促进661W细胞PERK磷酸化(P<0.01)、上调转录因子CHOP的蛋白表达(P<0.01);淫羊藿苷(2.0μmol/L)能够抑制模型组细胞CHOP蛋白表达(P<0.01),有抑制PERK(Thr980)磷酸化的趋势。毒胡萝卜素作用于661W细胞的10 min内，引起胞... 相似文献