中药复方系统研究中药理研究的思路与实践

作者结合相关实践与体会，以经典方剂生脉散及当归芍药散为例，从整方多环节、多途径的活性，以及结合物质基础的有效组分研究、基于配伍理论的作用特点的发现与新药创制，新方法的探索应用等方面，重点论述中药复方系统研究中药理研究的思路和方法，以期为中药复方现代药理研究提供一定参考。     

中药复方系统研究中药理研究的心思路与实践

作者结合相关实践与体会,以经典方剂生脉散及当归芍药散为例,从整方多环节、多途径的活性,以及结合物质基础的有效组分研究、基于配伍理论的作用特点的发现与新药创制,新方法 的探索应用等方面,重点论述中药复方系统研究中药理研究的思路和方法 ,以期为中药复方现代药理研究提供一定参考.     

当归芍药散对卵巢摘除小鼠行为学变化的影响

目的初步考察当归芍药散(DSS)对卵巢摘除(OVX)小鼠的行为学指标的影响,为探讨其异病同治原理提供一定药效学基础.方法手术摘除小鼠双侧卵巢,术后第11天开始给药,于给药后第1、14、28天分别进行开野试验、热板试验及阈上剂量戊巴比妥钠睡眠试验,考察DSS对卵巢摘除小鼠自发活动、疼痛反应及睡眠情况的影响;于给药后第42天取小鼠下丘脑,采用放射免疫分析法测定其中促性腺激素释放激素(GnRH)的含量,同时测量小鼠的子宫指数.结果DSS 500 mg·kg-1能显著减少模型小鼠的直立次数和行走格数,抑制其增加的自发活动;提高模型小鼠热板痛阈,减轻其疼痛反应;并延长模型小鼠睡眠时间,缩短其潜伏期,从而改善其睡眠障碍;但与阳性对照药0.2 mg·kg-1戊酸雌二醇(E2)不同,DSS对模型小鼠下丘脑GnRH含量及子宫指数降低无明显改善作用.结论当归芍药散可以显著改善卵巢摘除引起的小鼠行为学的变化,这些作用可能是其发挥对更年期综合症和老年性痴呆异病同治作用的基础之一.     

皂苷类成分抗神经细胞凋亡机制的研究进展

神经系统疾病已成为继心血管疾病和肿瘤之后的又一类致死疾病,其发生、发展与神经细胞凋亡密切相关。大量研究表明,皂苷类成分具有显著的神经保护作用,抑制神经细胞凋亡是其发挥作用的重要途径之一。综述了近年来皂苷类成分抑制神经细胞凋亡机制的研究进展。     

注射用益气复脉(冻干)改善脂多糖诱导小鼠急性肺损伤作用研究

目的 观察注射用益气复脉（冻干,YQFM）对脂多糖（LPS）诱导小鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用。方法 C57雄性小鼠随机分为对照组、模型组、注射用地塞米松磷酸钠（DEX,5 mg/kg）组和YQFM低、中、高剂量（0.33、0.67、1.34 g/kg）组。YQFM和DEX均在气管滴注LPS（5 mg/kg）前10 min经尾iv给药,24 h后,检测肺湿干质量比;制作肺组织切片进行HE染色,观察肺组织损伤及炎症;收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,分析BALF中的一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、总蛋白含量、中性粒细胞占比;制备肺组织匀浆,检测髓过氧化物酶（MPO）活力,并用Western Blotting法检测TLR4和MyD88蛋白表达水平。结果 与对照组比较,模型组肺组织损伤及炎症反应严重;小鼠肺湿干质量比,BALF中的NO、MDA、TNF-α、IL-1β、总蛋白含量及中性粒细胞占比,肺组织中MPO活力、TLR4和MyD88蛋白表达均明显升高,BALF中SOD含量明显降低,差异均有统计学意义（P<0.05、0.01）。与模型组比较,YQFM组小鼠肺组织损伤及炎症反应缓解,BALF中NO、MDA、TNF-α、IL1-β、总蛋白含量及中性粒细胞占比,肺组织中MPO活力、TLR4和MyD88蛋白表达均明显降低,SOD含量明显升高,差异均有统计学意义（P<0.05、0.01）。结论 YQFM对气管滴注LPS诱导小鼠ALI具有一定的防治作用。     

小檗碱抑制组织因子活性和静脉血栓形成的实验研究

目的 研究小檗碱体内外对抑制组织因子（tissue factor,TF）活性和静脉血栓形成的影响。方法 采用肿瘤坏死因子-α（TNF-α）活化人单核细胞株THP-1细胞模型,应用发色底物法测定TF的促凝活性,Western blotting检测TF蛋白表达,考察小檗碱体外对TF的作用;采用下腔静脉结扎致小鼠血栓模型,考察小檗碱体内给药对血浆TF活性及血栓形成的影响。结果 TNF-α（25 ng/mL）作用5 h能明显诱导THP-1细胞TF表达和活性增强,小檗碱（10～1 000 nmol/L）明显抑制TNF-α诱导的TF蛋白表达和促凝活性的增强,其IC₅₀约25.71 nmol/L;阳性药姜黄素1 000 nmol/L也具有明显抑制作用。小檗碱（1、10、100 mg/kg）单次ig给药,显著或非常显著降低下腔静脉结扎6 h致血栓模型小鼠升高的血浆TF促凝活性,并可明显减少血栓干、湿质量,阳性药华法林钠片1 mg/kg也有明显抑制作用。结论 小檗碱体内外给药均显著降低TF促凝活性及其蛋白表达,并可抑制TF相关的静脉血栓形成。     

以人参皂苷Rg1为配基的亲和色谱介质的制备与初步应用

通过偶联人参皂苷Rg1（Rg1）与环氧活化琼脂糖凝胶6B(epoxy-activated Sepharose^TM 6B,EAS6B),制备以Rg1为配基的亲和介质,以红外色谱法验证其偶联,并采用正交设计方法优化偶联条件为40 ℃,pH 13,每毫升EAS6B添加Rg1 100 μmol;以此条件放大工艺制备的亲和介质偶联率为31.47%,偶联量为31.56 μmol/mL;利用Rg1-EAS6B亲和介质,以系列亲和色谱法,从PC12细胞蛋白裂解液中筛选得到1个Rg1特异性结合蛋白的条带,为制备含有类似活性基团的中药有效成分的亲和色谱介质提供参考依据,也为进一步探讨人参皂苷Rg1的作用机制奠定基础。     

影响厚朴三物汤厚朴酚含量因素的初步研究

目的：研究影响厚朴三物汤中主要有效成分之一-厚朴酚煎出率的诸因素。方法：采用HPLC法测定厚朴三物汤不同配伍及合煎、分煎组浸膏及药材残渣中厚朴酚含量,并用正交设计法考察大黄、枳实用量及煎煮时间、提取次数等因素对厚朴酚含量的影响。结果：厚朴三物汤合煎组厚朴酚溶出率高于分煎组1倍以上,随着枳实用量及提取次数的增加,厚朴三物汤中厚朴酚的溶出率升高。结论：枳实及提取次数为影响厚朴三物汤中厚朴酚含量的主要因素。     

2种当归芍药散提取物的镇痛活性与化学成分差异分析

目的:比较当归芍药散水提取物和50%乙醇提取物的镇痛活性与化学成分差异,为其临床合理应用和进一步探讨其物质基础提供依据。方法:采用水回流提取和50%乙醇超声提取方法,制备2种当归芍药散提取物,以醋酸致痛小鼠模型和缩宫素诱导的拟痛经小鼠模型评价二者的镇痛活性;并采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)和硫酸-苯酚法分别对2种当归芍药散提取物中的化学成分进行分析归属和总糖含量测定。结果:当归芍药散水提物2.5,10 g·kg-1及醇提物10 g·kg-1可显著或非常显著减少醋酸和缩宫素诱导的小鼠扭体次数,水提物2.5 g·kg-1抑制率高于醇提物2.5 g·kg-1;HPLC-DAD法可检测到当归芍药散提取物的20个主要指纹峰,水提物中来自于芍药的4个成分的色谱峰面积和总多糖含量高于相应的醇提物。结论:当归芍药散水回流提取物的镇痛活性强于50%乙醇超声提取物,与其所含大极性成分和多糖含量有关。