高效液相色谱法测定复方六月雪颗粒中齐墩果酸的含量

目的:建立高效液相色谱法测定复方六月雪颗粒中齐墩果酸含量的方法.方法:色谱柱为symmetry C18柱,流动相为甲醇-乙腈-水-冰醋酸(72:13:15:0.4),检测波长为210 nm.结果:线性范围0.21～6.39 μg,r=0.999 8.平均加样回收率101.5%,RSD=3.2%(n=6).结论:方法简便,灵敏、准确,建立的方法可用于复方六月雪颗粒的质量控制.     

龙眼参对小鼠化学性肝损伤的保护作用及其机制研究

目的 :研究龙眼参对小鼠化学性肝损伤的保护作用及其机制。方法 :分别对四氯化碳、硫代乙酰胺和对乙酰氨基酚所致小鼠化学性肝损伤模型进行分组对照实验 ,并对各项相关指标进行测定和比较。结果 :与模型组比较 ,龙眼参治疗组ALT活性明显降低 ;肝脏细胞色素P450 及细胞色素b5 含量升高 ;肝组织丙二醛的含量显著降低 ;苯胺羟化酶及氨基比林 -N -去甲基酶活性增强 ;肝微粒体Ca2 + -ATP酶的活性明显降低 ;谷胱甘肽及谷胱甘肽过氧化物酶的水平明显提高。结论 :龙眼参对小鼠化学性肝损伤具有保护作用 ,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化、诱导肝药酶活性和阻滞Ca2 +通道的作用有关。     

六月青皂苷对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:研究六月青皂苷(Liuyueqing Saponins,LYQS)对免疫抑制小鼠免疫功能的影响.方法:实验动物随机分为5组:空白对照组、环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)模型组和LYQS高、中、低剂量组.除空白对照组外,其它各组小鼠于给药的第2、4、6、8、10天腹腔注射CTX(0.02 g·kg-1·d-1)造模.空白对照组和CTX模型组均用生理盐水(20ml·kg-1·d-1)灌胃;LYQS高、中、低剂量+CTX组用LYQS[(1、0.5、0.25)g·kg-1·d-1)]灌胃,给药10天后,检测小鼠血中红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)数量、血红蛋白(Hb)含量和TNF-α、IFN-γ、TGF-β1、IL-2含量;检测胸腺指数、脾脏指数、脾淋巴细胞转化功能、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NK细胞杀伤活性和血清50％溶血值(HC50);观察二硝基氟苯诱导的迟发型超敏反应.结果:与CTX模型组比较,LYQS各剂量组的胸腺指数明显提高;高剂量组的WBC数量、耳肿胀度明显提高;高、中剂量组的RBC、Hb、IL-2、脾脏指数、HC50、脾淋巴细胞转化功能、巨噬细胞廓清指数和吞噬指数明显提高;高、中剂量组的TGF-β1明显降低.结论:LYQS能增强CTX免疫抑制模型小鼠的特异性及非特异性免疫反应,提高其免疫功能.     

玉郎伞多糖对双氯芬酸致小鼠肝损伤的保护作用及相关机制研究

目的：探讨玉郎伞多糖（Yulangsan polysaccharide,YLSPS）对双氯芬酸（Diclofenac,DICF）致小鼠肝损伤的保护作用及相关机制研究。方法：把昆明种小鼠随机分为正常对照组（normal control,NC）,DICF损伤模型组,YLSPS高（YLSPSH,600 mg/kg）、YLSPS中（YLSPSM,300 mg/kg）、YLSPS低（YLSPSL,150 mg/kg）剂量组和联苯双酯阳性对照组（dimethyl diphenyl bicarboxylate,200 mg/kg DDB）,每组10只。YLSPS 高、中、低剂量组和联苯双酯组灌胃给予相应药物,正常对照组和模型组同法给予相等容积的生理盐水,每日1次,连续 14 d。末次给药后1 h,除正常组给予相等容量生理盐水腹腔注射外,其余各组小鼠同法给予DICF 50 mg/kg。造模后动物禁食20 h,取血及脏器检测肝功能指标碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、谷丙转氨酶（ala－nine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）及总胆红素（total bilirubin,TBIL）,检测肝匀浆超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione per－oxidase,GSH-Px）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）和过氧化氢酶（catalase,CAT）的水平及血清中白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）水平,HE（Hematoxylin eosin）染色法观察各组小鼠肝细胞损伤程度。结果：与模型对照组比较,YLSPS能降低血清ALT、AST、ALP活性和TBIL含量以及肝组织MDA含量（P<0.05）,能降低血清TNF-α、IL-1β水平（P<0.05）,提高肝组织SOD、GSH-Px以及CAT活性 （P<0.05）。结论：YLSPS能够有效减轻肝细胞损伤程度,对DICF所致的小鼠肝损伤具有保护作用,机制可能与抗氧自由基及抑制脂质过氧化等作用有关。     

YLSC对心肌缺血再灌注损伤细胞ASK1、Cyt-C、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察从壮族特色药材玉郎伞中分离的新化合物17-甲氧基-7-羟基—苯并呋喃查尔酮(YLSC)对大鼠缺血再灌注诱导的细胞凋亡的影响及机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、溶媒组、YLSC低剂量组、YLSC高剂量组、地尔硫艹卓组,每组10只。各组均于造模前10 min通过尾静脉注射药物2 mL/kg,所用药物前两组为生理盐水;溶媒组为含0.5%二甲基亚砜的生理盐水;YLSC低、高剂量组为2.5、5.0 mg/kg的YLSC;地尔硫艹卓组为盐酸地尔硫艹卓注射液2.0 mL/kg。各组均按照文献制备心肌缺血再灌注模型(缺血30 min再灌注1h),假手术组仅穿线不结扎。实验结束后立即处死动物取心肌组织,用TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Westernblot法检测凋亡信号调节蛋白1(ASK1)、细胞色素c(Cyt-C)、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果假手术组仅见个别散在的凋亡细胞,余五组凋亡细胞均明显多于假手术组,YLSC低、高剂量组及地尔硫艹卓组凋亡细胞数均显著少于模型组,其中YLSC高剂量组显著少于低剂量组(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,YLSC低、高剂量组ASK1、Cyt-C、Bax蛋白表达均明显降低,Bcl-2蛋白表达明显升高,且呈YLSC剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)。结论 YLSC能明显减轻缺血再灌注损伤诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与上调Bcl-2蛋白表达、下调ASK1、Cyt-C、Bax蛋白表达有关。     

玉郎伞提取物平喘镇咳作用的研究

目的研究玉郎伞水提物及从玉郎伞中提取的3种活性成份-黄酮、皂苷、多糖的平喘镇咳作用。方法采用豚鼠喷雾致喘法、小鼠氨水引咳法,观察玉郎伞水提物及3种成份对豚鼠引喘潜伏期、小鼠咳嗽潜伏期的影响。结果玉郎伞水提物及3种成份能显著延长乙酰胆碱组胺混合刺激所致豚鼠哮喘的引喘潜伏期,减少氨水致小鼠的咳嗽次数并延长咳嗽潜伏期。结论玉郎伞水提物及3种活性成份具有较强的平喘镇咳作用。     

玉郎伞多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制初探

目的:研究玉郎伞(YLS)多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法:Wistar雄性大鼠灌胃YLS多糖高、中、低剂量(0.6,0.3,0.15 g·kg-1·d-1),连续7 d,末次给药60 min后采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血2 h再灌注24 h后对大鼠神经功能进行评分,并测定脑梗死体积、脑含水量、脑组织中白细胞介素-β(IL-β)和肿瘤坏死因子-α[(TNF-α)的含量.实验同时设尼莫地平(0.02 g·kg-1·d-1)阳性对照组和假手术组,每组10只.结果:与脑缺血再灌注模型组相比,YLS多糖能够改善大鼠的神经功能障碍,降低脑梗死体积和脑含水量,降低脑组织中的IL-1β和TNF-α含量.结论:玉郎伞多糖对大鼠急性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与降低脑组织中的IL-1β和TNF-α含量有关.     

玉郎伞提取物抗炎作用及机制研究

目的:研究玉郎伞(YLS)的抗炎作用及其可能的机制.方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀和角叉菜胶致小鼠足肿胀模型,考察YLS水提取物(TYLS,以生药计剂量分别为80,40 g·kg-1)及其总黄酮(FYLS,0.14,0.07 g·kg-1)的抗炎作用,连续灌胃给药7 d后测定小鼠耳肿胀度和炎症足前列腺素E2(PGE2)及一氧化氮(NO)的含量.采用去除双侧肾上腺小鼠足肿胀模型,观察TYLS(以生药计剂量分别为80,40 g·kg-1)及FYLS(0.14,0.07 g·kg-1)灌胃给药对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响.正常大鼠灌胃TYLS(以生药计剂量分别为60,30 g·kg-1)及FYLS(0.1,0.05 g·kg-1)7 d后,测定大鼠肾上腺中维生素C和胆固醇含量及肾上腺重量.结果:TYLS及FYLS对二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致正常小鼠足肿胀均有显著的抑制作用,但对去肾上腺小鼠二甲苯所致耳肿胀无抑制作用(P0.05);可降低炎症渗出物中PGE2含量,但对NO含量无显著影响(P0.05);可降低正常大鼠肾上腺中维生素C和胆固醇的含量,对肾上腺指数无明显影响.结论:YLS具有明显抗炎作用,其作用可能与抑制PGE:产生,激动下丘脑-垂体一肾上腺轴有关,但对NO无显著抑制作用.     

龙眼参多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的：研究龙眼参（LYS）多糖对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响。方法：180只Wistar♂性大鼠随机分为脑缺血再灌注组，LYS多糖高、中、低剂量组，阳性对照组，假手术组。给药组术前连续灌胃7d，于末次给药60min后行手术，采用大脑中动脉局灶性缺血再灌注模型，观察缺血2h再灌注24h后，LYS多糖对各组大鼠脑梗死体积、脑含水量及脑组织中Bcb2、Bax蛋白表达的影响，并在光镜下观察各组大鼠皮层区细胞损伤程度。结果：与脑缺血再灌注模型组相比，LYS多糖能够降低大鼠脑梗死体积和脑含水量，增加脑组织中Bcl-2蛋白表达，减少Bax蛋白表达（P〈0．01或P〈0．05），并减轻皮层神经细胞水肿。结论：龙眼参多糖对大鼠急性脑缺血再灌注损伤具有保护作用，其机制可能与其上调Bcl-2蛋白表达，下调Bax蛋白表达，通过调节凋亡相关基因表达抑制凋亡有关。     

牛磺酸对原代培养大鼠肝细胞的促凋亡作用研究

目的探索分离培养原代正常大鼠肝细胞的条件和方法,研究牛磺酸对原代培养的正常大鼠肝细胞的促凋亡作用。方法使用经典的两步灌注法分离原代肝实质细胞后贴壁培养,记录细胞生长状况,台盼蓝拒染法测定细胞活率、绘制生长曲线。经用不同浓度的牛磺酸培养24 h后,用TUNEL法测定牛磺酸对原代培养大鼠肝细胞致凋亡作用,测定细胞凋亡率(AI)。结果两步灌注分离取得的肝细胞活率>70%,贴壁生长良好,从生长曲线可看出培养第3天进入对数生长期;TUNEL实验3个给药组AI分别为:3.71%,29.72%,42.56%。结论两步灌注法是一种细胞产量高,损伤小,纯度高的分离原代正常大鼠肝细胞的方法;高浓度的牛磺酸对体外培养肝细胞有一定致凋亡作用。