抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定

目的:制备小鼠抗沙眼衣原体MIP蛋白单克隆抗体并鉴定其生物学特性。方法:重组MIP蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行常规融合,间接ELISA法筛选阳性克隆并进行有限稀释克隆化,建立分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步采用ELISA法鉴定单克隆抗体的效价、类别及抗MIP蛋白特异性,IFA法鉴定单克隆抗体的衣原体种属特异性及中和能力。结果:建立了2株能稳定分泌抗MIP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1R6H6、2L9D2),ELISA法测得培养上清效价均为1:1 600,免疫球蛋白类型分别为IgG2a和IgG1;2株单克隆抗体不仅能特异性的识别MIP重组蛋白,而且能特异性识别沙眼衣原体血清型A、D、L2所编码的内源性MIP蛋白,但不识别其他衣原体优势蛋白及MoPn、AR39和6BC;体外中和试验表明,2株单克隆抗体均能有效中和衣原体的感染性。结论:获得了有活性的能特异性识别MIP蛋白的单克隆抗体,为深入研究MIP蛋白的结构和功能奠定了基础。     

蛋白质组学筛选沙眼衣原体感染依赖性免疫优势抗原

目的：采用蛋白质组学方法筛选沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,Ct）感染依赖性免疫优势抗原。方法：将纯化的Ct D型标准株EB经紫外线照射制备UV-EB,然后将未经处理的活EB和紫外线处理的UV-EB分别感染体外培养的HeLa细胞,间接免疫荧光法检测紫外线对EB的灭活效果;分别将低剂量活EB滴鼻感染小鼠或将较高剂量UV-EB经肌肉接种免疫小鼠,首先检测两种接种方式下Ct在体内的增殖情况,然后收集两组小鼠的血清,分别与Ct D型全基因组908个开放读码框编码的GST-Ct融合蛋白进行ELISA反应,蛋白质组学筛选仅与活EB感染组小鼠血清反应且反应频率高的Ct感染依赖性免疫优势抗原;最后用筛选到的抗原体外刺激Ct生殖道感染小鼠的脾细胞,ELISA法检测细胞因子IFN-γ的产生情况。结果：经紫外线灭活的UV-EB体外不能感染HeLa细胞,肌肉接种免疫小鼠后也不能在小鼠肌肉组织内增殖,而活EB滴鼻感染组小鼠的肺组织中可检出大量的Ct;活EB滴鼻感染组小鼠与UV-EB肌肉接种免疫组小鼠的血清抗Ct抗体滴度差异无显著统计学意义;将两组小鼠血清分别与Ct全基因组编码的蛋白反应,通过蛋白质组学方法共鉴定出60个抗原能被至少1份小鼠血清识别;22个抗原能同时被两组或任一组血清以≥50%的频率识别,为Ct免疫优势抗原,其中5个抗原仅被活EB滴鼻免疫组血清优势识别,即为Ct感染依赖性免疫优势抗原;该类抗原体外刺激小鼠脾细胞,能诱导良好的Th1型细胞免疫回忆应答。结论：筛选获得了Ct D型感染依赖性免疫优势抗原,为Ct亚单位疫苗研究提供了新的研究靶标。     

农村社区空巢老人的生活状况分析及其对策

空巢老人即与子女分开居住的老人.随着社会老龄化程度的加深,空巢老人越来越多,已经成为一个不容忽视的社会问题.目前我国空巢老人家庭约占老年人家庭的25%,而且随着独生子女的父母步入老年,空巢家庭将成为我国老年人家庭的主要形式.     

大枣的几种贮藏方法初探

中药发生霉变虫蛀的现象比较普遍，特别是基层医院，仓库条件差，如何利用有限的条件和设备贮藏好中药，防止中药发霉生虫，以保证药品质量，使临床用药安全有效，本文对大枣的几种不同贮藏方法进行了初步探索。     

吻合器痔上黏膜环形切除术单双荷包缝合治疗重度脱垂性痔的近期疗效比较

目的比较吻合器痔上黏膜环形切除术(PPH)中采用不同缝合方法治疗重度脱垂性痔的近期临床疗效。方法将重度脱垂性痔患者120例根椐术中不同的缝合方法分为单荷包组和双荷包组,每组60例。单荷包组采取单荷包缝合方法,双荷包组采取双荷包缝合方法。比较2组患者的手术时间、术中出血、术后镇痛、术后出血、住院时间、术后肛门坠胀不适、痔核回缩、肛缘水肿情况及治疗2月后复发情况。结果双荷包手术时间为(27.6±8.3)min长于单荷包组的(19.2±5.1)min,差异有统计学意义(P<0.05);2组术后出血率、术后痔核回缩率、肛缘水肿率及治疗2个月后复发率比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论采取PPH术治疗重度脱垂性痔患者时,术中缝合方式应选择双荷包缝合。     

微柱凝胶检测在新生儿溶血性疾病中的临床应用

目的探讨微柱凝胶试验（MGT）技术在新生儿溶血病（HDN）中的应用。方法采用微柱凝胶试验技术对189例疑为HDN的高胆红素患儿做＂溶血三项试验＂,即：（1）红细胞抗球蛋白试验;（2）抗体放散试验;（3）血清游离抗体试验。结果 A型与B型2组患儿（母亲O型）HDN检验结果比较,2组HDN阳性率比较差异无统计学意义。结论 MGT具有敏感度高,特异度显著,操作简便,耗时40min左右,标本用量少,结果易判定等优点,值得临床推广应用。     

Th17细胞及其相关细胞因子在幽门螺杆菌感染中的作用研究

目的 探讨Th17细胞及其相关细胞因子在幽门螺杆菌(H.pylri)感染中的作用.方法 建立幽门螺杆菌感染的小鼠模型,同时设立治疗组与对照组.HE染色评价小鼠胃组织学改变;RT-PCR法检测胃组织IL-17 mRNA、IL-23 mRNA表达水平;ELISA法检测胃组织匀浆上清IL-17、IL-23含量;FCM检测脾脏单细胞悬液中Th17细胞应答情况.结果 与对照组相比,H.pylori感染组小鼠胃组织IL-17、IL-23在mRNA及蛋白水平表达均升高,脾淋巴细胞中Th17细胞比例显著升高;而且H.pylori感染组小鼠IL-17、IL-23 mRNA和蛋白含量以及脾淋巴细胞中Th17细胞比例随感染时间延长而增加;治疗组小鼠IL-17、IL-23表达量及脾淋巴细胞中Th17细胞比率,与治疗前即感染后4周的小鼠相比较均有所下降;感染后不同时期小鼠胃黏膜的炎症程度与IL-17、IL-23的表达量存在正相关.结论 H.pylori感染后可以诱导Th17细胞应答且IL-17、IL-23表达均上调;H.pylori感染后胃炎程度与胃组织1L-17、IL-23含量存在正相关.     

湘鄂川部分植物性食品中稀土元素含量研究

对湖南、湖北、四川省部分植物性样品（共245个）中稀土元素含量研究表明:部分植物性样品中稀土元素含量顺序为：小麦＞大米＞柑桔＞韭菜＞菠菜；水稻、柑桔在连续6年使用稀土后，其增加的绝对量无明显变化，以煤灰为主要肥料的韭菜样品中稀土元素含量明显高于以农家肥为主要肥料的韭菜样品。     

放射性药物的定量放射自显影——影像密度测定的数字胶片分析系统简介

自从Ulberg建立起整体放射自显影的方法以来,它就被广泛地应用于生物医学,特别是药理学和毒理学。近来,许多新的γ射线和电子发射的放射性药物被引用到核医学领域,我们必须评价这些药物在机体正常和病变状态下的分布和代射,而放射自显影的应用为检测放射性药物在小动物体内的分布提供了高度的空间分辨率。当定量指标确定后,其作用更加显著,能使我们对不同疾病情况的功能和代谢有进一步的了解。     

血培养病原菌菌群分布及耐药分析

目的了解南华大学附属第一医院1997年1月～2004年6月年血培养病原菌菌群分布及近2年常见致病菌的耐药情况。方法4686份血标本经BACTEC9050全自动血培养仪培养检测，分离出的致病菌用Sceptor半自动微生物鉴定系统进行鉴定及药敏试验。结果共分离出799株病原菌，血培养阳性率17．1％，检出病原菌分布于20个属，47个种。革兰阳性菌构成比明显高于革兰阴性菌，最常见的血培养菌属是葡萄球菌，占61．7％，其次是沙门菌、肠球菌、链球菌、埃希菌、假单胞菌及不动杆菌。各主要致病革兰阳性菌对万古霉素、呋喃妥因敏感，对环丙沙星较敏感，各主要致病革兰阴性菌对亚胺培南、头孢吡肟及阿米卡星敏感或较敏感。葡萄球菌的耐药情况严重，对青霉素耐药率高达90％以上，凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)对多种抗生素耐药情况较金葡菌更严重。肠球菌对多数常用抗生素耐药，对红霉素耐药率高达85．9％。链球菌对青霉素和氨苄西林明显耐药。大肠埃希菌对亚胺培南、头孢替坦、阿米卡星敏感．对头孢吡肟、替卡西林／克拉维酸、阿莫西林／克拉维酸较敏感，对其他多种抗生素耐药。假单胞菌对亚胺培南、环丙沙星、阿米卡星及头孢他啶较敏感，对其他多种抗生素均耐药。不动杆菌对亚胺培南、环丙沙星、头孢吡肟、头孢噻肟、磺胺甲噁唑／甲氧苄啶及头孢他啶较敏感，对其他多种抗生素均耐药。沙门菌则对多种抗生素敏感。结论血培养病原菌以条件致病菌为主。检出菌中除沙门菌外，均存在严重耐药问题，及时监测病原菌变化及耐药趋势以指导临床用药至关重要。