融合蛋白Kininogen D5_（60-148）-TRAIL_（114-281）的表达及其抑制血管新生和诱导细胞凋亡的作用

目的：采用原核表达系统表达人Kininogen D560148TRAIL114281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究。方法：PCR技术扩增Kininogen D560148和TRAIL114281的编码序列,分别构建原核表达载体pMALKininogen D560148（pMALKD5）、pMALTRAIL114281（pMALTRAIL）和pMALKininogen D560148 TRAIL114281（pMALKT）,重组质粒分别转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达融合蛋白MBPKD5、MBPTRAIL和MBPKT,并经亲和层析纯化。MTT法检测细胞的增殖,管状形成实验检测内皮细胞血管形成,流式细胞仪和电镜检测细胞凋亡。结果：成功构建原核表达载体pMALKD5、pMALTRAIL和pMALKT,并获得纯化的融合蛋白MBPKD5、MBPTRAIL和MBPKT。融合蛋白MBPKT与MBPKD5、MBPTRAIL相比可显著抑制内皮细胞ECV304和胰腺癌细胞SW1990的增殖、明显抑制ECV304细胞体外管腔的形成,同时,MBPKT剂量依赖性地诱导SW1990细胞凋亡。结论：融合蛋白Kininogen D560148 TRAIL114281既能诱导肿瘤细胞凋亡又能抑制血管生成,为进一步开发靶向性抗肿瘤药物奠定了基础     

药物毒性病理学研究技术新进展

药物毒性病理学是药物毒性检测的关键环节。传统的形态病理学为临床诊断的金标准,但其主观性突出,只能定性而无法准确定量,故已无法满足人们对药物安全性评价高标准的需求。为更深入地研究分析药物毒性损害和病变,一些能够从不同水平反映毒理学效应终点的新技术、新方法已应用到药物毒性病理学研究中。这些新技术有免疫组织化学、原位杂交、共聚焦激光扫描显微镜技术、激光捕获显微切割技术、流式细胞术、毒理芯片技术、分子影像技术等。它们不仅弥补了传统形态病理学的局限和不足,而且拓宽了毒性病理学的研究思路,必将促使药物毒性病理学飞跃式发展。     

新生小鼠心脏细胞体外共培养体系的建立及其在心肌细胞增殖研究中的应用

目的 建立新生C57乳鼠心肌细胞和成纤维细胞体外原代培养和共培养体系,探讨不同日龄乳鼠心脏细胞的体外增殖特征.方法 分离不同日龄C57新生小鼠的心肌细胞和成纤维细胞,分别进行原代培养和共培养,观察细胞的形态和活力变化,测定CyclinD1、CDK4、GATA4、Nkx2.5以及FGF1的表达.结果 差速贴壁90 min后成纤维细胞先贴壁,培养12h后心肌细胞几乎全部贴壁;共培养心肌细胞多以细胞团的形式贴壁生长.出生5d以内的乳鼠心肌细胞数量明显增加,共培养的心肌细胞活力更大、增殖速度快;出生5d以后乳鼠的心肌细胞数量变化并不明显.出生5d内乳鼠心肌细胞中CyclinD1和CDK4的表达量较高,且共培养的心肌细胞表达量要高于单独培养的心肌细胞表达量.GATA4、Nkx2.5和FGF1的表达随日龄增大而增加.结论 成功建立了新生小鼠心肌细胞和成纤维细胞的体外共培养体系;出生5d内的乳鼠心肌细胞体外培养时具有较强的增殖能力,且成纤维细胞能促进心肌细胞的增殖,GATA4、Nkx2.5和FGF1有阻止心肌细胞增殖作用.出生5d后乳鼠的心肌细胞增殖能力减弱甚至消失.     

得力康注射液安全性药理学和急性毒性研究

目的观察慢速iv得力康注射液对大鼠循环、呼吸系统和小鼠中枢神经系统的影响;观察静滴得力康注射液对Beagle犬的急性毒性.方法大、小鼠实验均分低、中、高剂量及空白对照共4个组,对大鼠血压、ECG、呼吸频率及节律,小鼠自发活动和爬杆能力进行观察.用近似致死剂量法(ALD)观察得力康注射液对6条Beagle犬的急性毒性,观察其一般情况、心电图、血液学、血液生化、尿液检查.结果慢速iv得力康注射液1.00～4.00g/kg对大鼠循环、呼吸系统无明显影响,2.00～8.00g/kg对小鼠中枢神经系统也无明显影响.犬静滴得力康注射液8.00～12.00g/kg时产生中重度中毒症状,主要表现有给药期间中枢先兴奋后抑制,全身皮肤潮红、眼睑肿胀明显,局部肌肉抽搐,恶心、呕吐.剂量为12.00g/kg时,犬第1天的ALT、AST、ALP、Tbill、Ca2 、K 升高,ECG T波电压升高,第7天基本恢复正常.结论得力康注射液静滴Beagle犬,当剂量＞8.00 g/kg时,对中枢神经系统、循环及消化系统有明显毒副作用,毒副作用均是可逆的.得力康注射液静滴Beagle犬安全剂量为3.56 g/kg,ALD＞12.00g/kg.     

神经生长因子对坐骨神经挤压伤后的促再生作用

目的:观察肌注神经生长因子(NGF)对大鼠坐骨神经挤压伤后的促再生作用。方法:40只大鼠随机分成NGF高、中、低剂量组,正常对照和模型对照组。距坐骨切迹远端6mm处钳夹坐骨神经,使产生-4mm宽的挤压伤。NGF高、中、低剂量组分别给予8,4和2μg·kg~(-1)(1.6×10~3,8×10~2和4×10~2IU·kg~(-1)NGF,im,qd,连续56d。手术后不同时间,检测运动神经传导速度(MNCV)、坐骨神经功能指数(SFI)以及进行组织形态学评价。结果:与模型对照组相比,高剂量组在d35和d56,中剂量组在d35的MNCV均显著加快;高、中、低3个剂量组在术后d14后的SFI与模型组相比,均有统计学意义,且高剂量组恢复较明显,至d56各剂量组SFI均无明显差异;组织形态学显示,NGF治疗组神经髓鞘、轴索与正常对照组相比,未见明显差异;而模型组髓鞘出现脱失,细微结构不清晰,许旺氏细胞变性坏死。结论:肌注神经生长因子能明显促进大鼠坐骨神经纤维的再生,促进其神经功能的恢复。     

新一代抗精神分裂症药物奥氮平

通过查阅近５年文献,对新一代抗精神分裂症药物奥氮平的药理,毒理和临床应用进行综述。     

胃萎灵对大鼠的长期毒性观察

本文报道中药复方制剂胃萎灵(主要由山楂、陈皮、芍药、甘草等组成)ig对大鼠的长期毒性,绝大部分观察指标(一般行为活动、血象、血液生化指标和病检器官等)在给药组和对照组间未见明显差别,仅大剂量组在给药期间体重和食量低于其它组且网织红细胞高于其它组,停药后恢复正常。实验表明大鼠ig胃萎灵相当于推存临床用量100倍连续3个月未显示严重的药物性毒性反应。     

吗氯贝胺及氟西汀治疗抑郁症的双盲试验比较

吗氯贝胺(moclobemide)是一特异性单胺氧化酶A可逆性抑制剂,能治疗多种抑郁症,且具有时效关系,也大大降低抗胆碱能的副作用。它还避免了服用非特异性单胺氧化酶抑制剂时需限制的富含酪胺的饮食。氟西汀     

人基因工程γ干扰素临床前毒性评价

<正> 人基因工程γ干扰素(human recombinant interferon-γ,Hu-rIFN-γ)是一种具有多种生物活性的糖蛋白。人体应用后可有多种毒副反应出现。本文应用Hu-rIFN-γ对昆明种小鼠进行急性毒性试验,im或iv的剂量为4.4×10~9IU/m~2,相当于推荐临床用量(1×10~6IU/m~2)的4400倍,未见有任何毒性反应。其最大耐受剂量大于4.4×10~9IU/m~2,在长期毒性试验中,对Wistar大鼠的剂量为1×10~7,5×10~7,1×10~8,IU/m~2;对     

戊二酸铁溶菌酶复合物的合成及动物药理研究

戊二酸铁溶菌酶(ABC1020)是一新型可溶性抗贫血复合物。该复合物含 Fe~(3+)33mg/g;总戊二酸11.3％(w/w);游离戊二酸<0.18％。动物药理研究结果表明,雄性大鼠喂食含300ppm 铁的正常饲料,饿17h 后一次口服分别相当于0.5,1,2,4及8mg Fe/kg 的ABC 1020,1h 后测血清铁浓度均呈很好的量效关系,口服相当于8mg Fe/kg 的 ABC1020后1h,血清铁增加181.4％。正常雄性大鼠分别口服相当于2mgFe/kg的 ABC1020、铁蛋白、琥珀酰铁蛋白和硫酸亚铁后,均可使血清铁增加,给药后1～3h 增加值基本恒定,6h 开始下降,8h 后恢复正常。但与口服铁蛋白及琥珀酰铁蛋白相比,服 ABC1020后血清铁增加量多且快,AUC 明显高,而C_(max),T_(max)无明显差异;与口服硫酸亚铁相比,服 ABC1020后血清铁增加量少。