脂肪细胞新蛋白My027原核表达、纯化及生物活性研究

目的通过原核表达获得大量脂肪新蛋白质My027,并在体外初步研究其生物活性。方法RT-PCR法扩增出My027片段,插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建质粒pGEX-My027。转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,经亲和层析法获得融合蛋白,利用SDS-PAGE、Western印迹及质谱进行鉴定。在还原性谷胱甘肽存在的条件下,将纯化得到的融合蛋白作用于乙二醛酶Ⅰ的底物甲基乙二醛,通过分光光度法检测产物乳酸谷胱甘肽的生成。结果融合蛋白以水溶形式分泌于大肠埃希菌BL-21胞浆中,纯化后的目的蛋白SDS-PAGE、Western印迹及质谱证实高效表达,氨基酸序列正确。结论人脂肪细胞新蛋白质My027在pGEX-4T-2原核表达载体中可获高效表达,所纯化蛋白具有类似于乙二醛酶Ⅰ的作用。     

Graves病患者TRAb与抗TSHAb抗体关系的初步研究

根据自身免疫性甲状腺疾病发病机制的独特型－抗独特型免疫免疫学说，用兔抗人ＴＳＨＡｂ检测ＴＳＨ抗独特型抗体（ＴＳＨＡｂ２）。以正常人为对照，以其结合率＾－ｘ＋２ｓ为正常值上限，大于此值为阳性。６０例ＴＲＡｂ阳性病人，６５％病人ＴＳＨＡｂ２阳性，而４０例ＴＲＡｂ阳性病人中，只有５％病人ＴＳＨＡｂ２阳性。两组差异显著（Ｐ〈０．０５）。ＴＲＡｂ和ＴＳＨＡｂ２呈正相关（ｒ＝０．６４５，Ｐ〈０．０１）。同时用     

PPARγ2表达诱导NIH3T3成纤维细胞向脂肪细胞分化

目的应用重组逆转录病毒载体介导小鼠过氧化物酶体增殖体激活的受体γ2(mPPARγ2)基因在NIH3T3成纤维细胞中表达,并进一步研究其功能.方法从经荧光测序证实含正确mPPARγ2 cDNA序列的重组质粒pcDNA3/mPPARγ2中,双酶切下mPPARγ2全长cDNA序列,亚克隆入逆转录病毒载体pGCEN中,构建重组逆转录病毒载体pGCEN/mPPARγ2.用PA317细胞对pGCEN/mPPARγ2及pGCEN进行包装,并用G418进行PA317细胞抗性克隆筛选,收集病毒上清,感染靶细胞NIH3T3成纤维细胞.表达mPPARγ2的NIH3T3成纤维细胞在含PPARγ激活物5,8,11,14-二十碳四烯酸(ETYA)等分化介质中培养,可被诱导向脂肪细胞分化.结果构建了含mPPARγ2全长cDNA重组逆转录病毒载体pGCEN/mPPARγ2,获得了较高pGCEN/mPPARγ2及pGCEN的逆转录病毒上清.重组逆转录病毒载体可介导mPPARγ2在NIHT3T3成纤维细胞胞核中表达.油红O染色证实,表达mPPARγ2的NIHT3T3成纤维细胞在分化介质中培养分化10天后,胞浆中明显积聚了较多的中性脂肪,其细胞形态也与体内成熟脂肪细胞相似,而且这些细胞表达脂肪细胞特异性标志基因如AP2和leptin.结论本研究在体外成功地建立了由PPARγ2诱导NIH3T3成纤维细胞向脂肪细胞分化的模型,为进一步研究PPARγ2诱导脂肪细胞分化的分子机制奠定了基础.     

新信息环境下馆藏生物医学文献信息资源建设

指出了在新信息环境下馆藏生物医学文献信息资源建设的关键在于要转变传统的思维观念,建立现代的网络思维,同时还对网络化条件下馆藏文献信息资源建设的有关问题进行了深入的讨论.     

甲减影响新生期鼠脑梨状皮质Goα及Gsα的基因表达

目的"研究甲状腺功能低下对新生期鼠脑梨状皮质Goα及Gsα mRNA表达的影响. 方法"采用地高辛标记寡核苷酸探针原位杂交技术,对围生期正常及甲减Wistar大鼠动物模型梨状皮质Goα及Gsα mRNA的表达状况进行研究. 结果"14d龄甲减鼠脑梨状皮质Goα mRNA的表达明显升高,但其Gsα mRNA与对照组无显著差异.结论"在鼠脑发育过程中,甲状腺激素对梨状皮质Goα基因的表达具有负调作用,而对该区Gsα基因的表达则不具备调节功能.     

血清肝纤维化指标与总胆汁酸联合检测在肝病诊断中的意义

目的 探讨肝病患者血清透明质酸（ＨＡ）,Ⅲ型交原（ＰＣⅢ）,Ⅳ型胶原（ＣⅣ）及总胆汁酸（ＴＢＡ０检测的地用放射免疫法（ＲＩＡ）和酶法检测３６例慢性肝炎（轻度）,６６例慢性肝炎（中度）,３６例慢性肝炎（重度）,４６例肝硬化,３２例肝癌患者的血清ＨＡ,ＰＣⅢ,ＣⅣ,ＴＢＡ水平,并与正常对照组比较。结果 除慢性肝炎（轻度）组血清ＣⅣ含量升高差异没有显著性外,其余ＨＡ,ＰＣⅢ,ＣⅣ,ＴＢＡ的含量均随病程的     

多次复发声带尖锐湿疣1例报告

尖锐湿疣是一种常见的性病,由性传播引起,多位于阴部,位于声带者极为少见。现将我科发现的１例报告如下。患者男,３４岁,个体户。１９９７年１２月因反复咽癌、声嘶来我院就诊。临床喉镜见声带新生物,以“声带乳头状瘤”活检,送检病理科。镜检：表皮呈乳头状瘤样增生．伴有表皮钉突延长,增宽甚至呈假上皮瘤样增生。表皮角化不全。棘昆明显肥厚,棘层细胞增生活跃,棘层上部有局灶性挖空细胞,胞核变性,深染。真皮乳头层血管扩张充血,有多量淋巴细胞浸润。ＰＣＲ检查ＨＰＶ为阳性。病理诊断为声带尖锐湿疣。１９９８年５月患者又因…     

苦参的药学研究评析

1　成分研究苦参主要成分为苦参碱matrine,氧化苦参碱oxymatrine等多种生物碱类成分 ,苦参醇kurarinol、苦参丁醇kuraridinol等多种黄酮类成分 ,另含氨基酸类成分 ,挥发油类成分 ,糖类成分 ,有机酸类成分 ,内酯类成分等。苦参所含的苦参碱、氧化苦参碱研究表明其能相互转化 ,主要是氧化苦参碱易受人体肠内菌、水、热共存的还原性成分等的影响 ,易被还原为苦参碱。陆蕴如等〔1〕以苦参为对象 ,研究了中药复方中化学成分的变化 ,结果表明 ,含苦参的复方 ,制作成制剂时 ,受水、热等因素及共存的还原性成分 ,如原儿茶醛等作用 ,使氧化苦参碱的含…     

旦暮不同时辰阴阳药对对人体阴阳调节的观察

根据一天中天人阴阳消长变化规律，于平旦气升发之时投以阳药，而在黄昏阴气始盛时给以阴药，观察其对人体阴阳的影响。结果发现这样的阴阳药对确有奇特疗效。     

驱风固表汤治疗等麻疹156例

我们近年自拟驱风固表汤治疗荨麻疹156例,取得满意疗效。现报告如下。1资料与方法1.1一般资料156例中男性84例,女性72例;病程7月至3年。依据高等医药院校试用教材《外科学》(上海科学技术出版社,第3版)及《中医皮肤病诊疗》(广西人民出版社)及《临床皮肤病学》(江苏科学技术出版社)相关诊断标准确诊。1.2治疗方法以桂枝汤与玉屏风散合方为基础方:桂枝10g,白芍10g,生姜10g,黄芪24g,白术9g,防风9g,甘草6g,大枣4枚。瘙痒剧烈,皮疹明显,变化迅速,脉浮大者加浮萍10g,荆芥10g,蝉蜕5g;面色白光白,神疲乏力,气短,皮疹不甚明显,脉弱者加党参15g,五味…