应用cDNA表达谱芯片研究子宫内膜癌基因的表达谱

目的:应用cDNA表达谱芯片研究不同分化程度人子宫内膜癌组织的基因表达谱,分析子宫内膜癌发生、发展过程中基因表达的变化。方法:用一步法抽提5例高分化和4例低分化人子宫内膜癌组织和36例正常子宫内膜组织的总RNA,在反转录合成cDNA探针的同时以Cy3和Cy5标记肿瘤组和正常对照组,将Cy3和Cy5标记探针混合后与含有13 824个基因的人表达谱芯片杂交。经洗片、扫描、软件处理后,分析子宫内膜癌和正常子宫内膜对照之间基因表达谱的差异。对高分化和低分化子宫内膜癌基因表达谱进行聚类分析。结果:子宫内膜癌组织和正常对照基因表达谱比较,差异2倍以上基因共有26条,表达上调和下调的基因分别为2条和24条。聚类分析显示,通过基因表达谱基本可将高分化和低分化子宫内膜癌分开。结论:通过基因表达谱差异研究可以发现与子宫内膜癌发生、发展相关的基因;癌基因表达谱聚类分析可能会帮助判断高危和低危子宫内膜癌,有利于子宫内膜癌患者个体化治疗方案的制定。     

持续性静脉输注高渗葡萄糖建立妊娠期高血糖动物模型

目的建立理想稳定的妊娠期高血糖动物模型。方法将雌性SD大鼠随机分为两组,实验组自孕晚期持续静脉输注高渗葡萄糖,对照组同期、同速输注无菌蒸馏水。结果实验组大鼠孕期血糖及血清胰岛素浓度均明显高于对照组(P<0．01),两组血清氨基酸浓度及血酮体定性检查的差异无显著性(P>0．05)。输液期间实验组大鼠摄食量明显减少,但两组摄入总热卡的差异无显著性(P>0．05)。结论给孕鼠输注高渗葡萄糖,大鼠血糖升高且稳定,同时不伴明显的脂肪及氨基酸代谢紊乱。采用该方法可以建立理想的妊娠期高血糖动物模型。     

酪氨酸激酶受体B介导的卵巢上皮性癌OVCAR3细胞失巢凋亡抑制与其侵袭的关系

目的 探讨失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)介导的卵巢上皮性癌(卵巢癌)OVCAR3细胞的失巢凋亡抑制与其侵袭的关系.方法 采用RT-PCR和实时定量PCR技术检测4种细胞包括3种不同病理类型的卵巢癌细胞系OVCAR3、SKOV3(两者均为卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系)和ES2(卵巢透明细胞癌细胞系)细胞及神经母细胞瘤细胞系sK-N-DZ细胞中,以及经不同方式[贴壁培养和立体培养(培养后形成团簇细胞)]培养的OVCAR3细胞中TrkB mRNA的表达.转染TrkB小分子干扰RNA(siRNA)后,流式细胞仪检测OVCAR3细胞的凋亡率,以转染无意义的(scrambled)siRNA者为阴性对照;体内、体外侵袭实验检测不同方式培养的OVCAR3细胞的侵袭能力.结果 (1)OVCAR3细胞中TrkB mRNA表达水平为0.0240±0.0017,明显高于SKOV3细胞的0.0030±0.0006、ES2细胞的0.0027±0.0009及SK-N-DZ细胞的0.0087±0.0003(P＜0.01);OVCAR3团簇细胞中TrkB mRNA表达水平为0.0437±0.0021,明显高于贴壁细胞的0.0240±0.0017(P＜0.01).(2)转染TrkB siRNA后,OVCAR3细胞的凋亡率为(46.3±5.9)%,明显高于阴性对照的(9.0±0.8)%(P＜0.01).(3)体外侵袭实验显示,OVCAR3团簇细胞的穿膜细胞数为(71.8±0.8)个,明显多于贴壁细胞的(47.7±0.8)个(P＜0.01);体内侵袭实验显示,转染TrkB siRNA后,OVCAR3细胞在裸鼠体内形成的肿瘤体积为(6.0±1.4)mm3,明显小于阴性对照的(16.3±4.7)mm3(P＜0.01).结论 TrkB可能通过诱导卵巢癌OVCAR3细胞的失巢凋亡抑制而赋予其高侵袭能力.     

HE4在子宫内膜癌诊断中的应用价值探讨

目的:探讨血清人附睾蛋白4(HE4)检测在子宫内膜癌诊断中的价值。方法:用ELISA法对30例子宫内膜癌(子宫内膜癌组)和403例同期体检的健康妇女(正常对照组)血清HE4浓度进行检测。结果:子宫内膜癌组血清HE4为97.12±51.12pmol/L,正常对照组为40.04±9.59pmol/L,子宫内膜癌组显著高于正常对照组(P<0.01)。子宫内膜癌组中,血清HE4水平在不同患者年龄、病灶范围大小、肌层浸润深度等方面比较,差异有统计学意义(P<0.05),而在肿瘤的分化程度、组织学类型及临床分期方面比较,差异无统计学意义(P>0.05)。正常对照组中,380例60岁以下组血清HE4水平为39.45±8.90pmol/L,23例60岁以上组血清HE4水平为49.79±14.49pmol/L,两者比较差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论:HE4检测对子宫内膜癌的诊断及预后判断有一定的价值。     

GDF-9、Ghrelin的表达与控制性排卵多囊卵巢综合征患者IVF-ET治疗结局的关系

目的 探讨卵巢颗粒细胞生长分化因子-9(GDF-9)、血清生长激素释放肽(Ghrelin)表达与控制性排卵多囊卵巢综合征(PCOS)患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的关系.方法 回顾性选取2018年1月至2019年3月在上海交通大学附属第一人民医院接受IVF-ET助孕的PCOS患者72例(观察组),同时选...     

卵巢和卵巢肿瘤中Hedgehog 信号通路的表达

目的 探讨正常卵巢和卵巢肿瘤中Hedgehog信号通路的表达.方法 采用RT-PCR和免疫组织、细胞化学染色检测26例卵巢肿瘤组织、3例卵巢癌细胞株(SKOV3、A2780和COC1)和7例正常卵巢组织中Hedgehog信号通路的信号分子SHH、IHH、PTCH、SMO和GLI1的mRNA和蛋白表达情况;通过实时定量RT-PCR对随机抽取的11例卵巢肿瘤组织和5例正常卵巢组织进行PTCH和GLI1 mRNA水平的比较.结果 SHH、IHH、PTCH、SMO和GLI1的mRNA在卵巢肿瘤组织中均有表达;SHH mRNA在正常卵巢组织中不表达,而IHH、PTCH、SMO和GLI1的mRNA在正常卵巢组织中有表达;在卵巢肿瘤组织中,PTCH和GLI1的mRNA表达水平高于正常组织(P＜0.05).SHH、IHH、PTCH、SMO和GLI1蛋白在卵巢肿瘤组织中均呈阳性表达,在正常卵巢组织中不表达.卵巢癌细胞株SKOV3、A2780和COC1均有IHH、PTCH、SMO和GLI1的mRNA和蛋白的表达;SHH仅在SKOV3和A2780中表达. 结论 卵巢肿瘤中存在Hedgehog信号通路,在部分卵巢肿瘤中有Hedgehog信号通路过度激活的现象.     

卵巢组织超速冷冻的初步探讨

随着低温生物学技术的发展和在生殖医学中的应用，卵巢组织库的建立将为那些可能发生卵巢功能早衰的妇女提供保存生育力的可能。本研究应用超速冷冻的方法，对小鼠卵巢组织进行超速冷冻并快速复温，观察始基卵泡的形态学变化，以及始基卵泡的凋亡，探讨应用超速冷冻的方法及冻存小鼠卵巢组织的可行性。     

妊娠期糖尿病519例临床分析

目的 评价饮食疗法及在饱含疗法基础上加用运动锻炼或胰岛素治疗对妊娠糖尿病的治疗效果。方法 对妊娠期血糖异常５１９例分为Ａ、Ｂ、Ｃ三组，观察每组治疗与未治疗者之间母儿并发症的发生情况。治疗方法为单项饮食管理或加用运动锻炼及胰岛素治疗。结果 饮食疗法总有效率为９２．９７％，Ａ组为９８．２６％；Ｂ组为８５．６０％；Ｃ组为６８．２３％。在饮食疗法基础上运动锻炼有效率为８２．３５％，胰岛素治疗有效率为８７．５０％；治疗者母儿并发症较未治疗者明显较少（Ｐ〈０．０５）。结论 饮食疗法是治疗妊娠期糖尿病的主要方法，治疗效果不理想者可加用运动锻炼和（或）胰岛素治疗，治疗有效者其母儿并发症发生率明显下降。     

雌激素膜受体GPR30在子宫内膜癌的表达及意义

目的:探讨雌激素膜受体GPR30在子宫内膜癌的表达及意义。方法:RT-PCR和免疫组织化学法检测子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中GPR30mRNA和蛋白的表达,分析GPR30表达与临床病理的联系;免疫细胞化学分析GPR30蛋白在子宫内膜癌细胞系RL95-2(ER+)和KLE(ER-)的表达。结果:子宫内膜癌组织GPR30mRNA的表达水平显著高于正常子宫内膜组织(P<0.05);子宫内膜癌组织GPR30蛋白表达阳性率(21/30,70%)显著高于正常子宫内膜组织(5/17,29.41%)(χ2=7.232,P=0.007);肿瘤组织学分级越高,GPR30表达阳性率越高(P=0.003),GPR30表达与内膜癌分期、肌层浸润深度和腹水转移无关(P>0.05);ERα阳性的子宫内膜癌细胞系RL95-2和ERα阴性的细胞系KLE均表达GPR30。结论:雌激素膜受体GPR30于子宫内膜癌组织和子宫内膜癌细胞系均有表达,与肿瘤组织学高分级相关,提示GPR30可能在子宫内膜癌中发挥重要的作用。     

32例子宫内膜癌基因表达谱的层次聚类分析

目的：通过对子宫内膜癌组织基因表达谱的层次聚类分析，寻找子宫内膜癌“高危”患者。方法：以32例内膜样子宫内膜腺癌为实验组，36倒正常子宫内膜组织混合作为对照组。分别用Cy3和Cy5标记实验组和对照组。用含有13824个基因的人全基因表达谱cDNA芯片分析32例内膜癌的基因表达谱，筛选差异表达基因，并对基因表达谱进行层次聚类分析。结果：按肿瘤的分化程度、分期以及分化分期相结合进行分组，分别筛选出差异表达基因46、12和138个（P〈0．001）。对32例内膜癌进行层次聚类分析的结果与肿瘤的分化、FIGO分期分类基本相符，并且能够发现一些子宫内膜癌“高危”患者。结论：对子宫内膜癌基因表达谱的研究可以发现与子宫内膜癌浸润、转移相关的基因；基因表达谱的聚类分析可以在术前帮助判断子宫内膜癌的“高危”病患。