RGDyC与PEG共修饰的PAMAM树状大分子载三氧化二砷脑胶质瘤靶向递药系统的制备及体外评价

三氧化二砷(ATO)是中药砒霜的有效成分,已有研究表明其对多种肿瘤具有良好的生长抑制及促凋亡作用,但由于毒性大和透血脑屏障(BBB)难等问题严重限制了其在脑胶质瘤治疗方面的应用。聚酰胺-胺树状大分子(PAMAM)作为一种人工合成的高分子化合物,具有渗透性及稳定性强且生物相容性好等优点,且第5代PAMAM的空间结构更立体,是药物载体的理想选择。该课题采用RGDyC和PEG共同修饰第5代PAMAM,并通过核磁共振氢谱图证明了该纳米载体的成功合成;纳米粒度-电位分析仪和透射电镜图分析显示其平均粒径大约集中在20 nm左右;体外释放实验表明,该递药系统不仅具有缓释效果,同时还有一定的p H敏感特性;细胞结果显示,经RGDyC和PEG共修饰后的PAMAM与未经修饰组相比,细胞毒性显著降低,且该递药系统具有更好的体外跨血脑屏障(BBB)抗肿瘤效果,同时也进一步证明了RGDyC的肿瘤靶向作用。     

冰片 薄荷脑低共熔物对神经毒素纳米粒鼻腔给药 载药入脑的影响

目的:考察中药冰片-薄荷脑低共熔物对神经毒素纳米粒鼻腔给药吸收入脑的影响.方法:采用125Ⅰ同位素标记法,以清醒自由活动大鼠为实验模型,运用脑微透析取样技术,测定脑内神经毒素浓度的变化,并应用药动学软件计算药动学参数.结果:添加冰片-薄荷脑低共熔物的神经毒素纳米粒脑药动学符合二室模型,t_(max),C_(max),AUC,t1/2(β)分别为0.68 h、27.32μg·L~(-1),132.68μg·h·L~(-1),3.107 6 h,其入脑的速度与程度均优于单用薄荷脑或者冰片.结论:神经毒素纳米粒在冰片-薄荷脑低共熔物作用下,可显著增加其鼻腔吸收人脑的药量,且能较快达到峰浓度,消除缓慢.     

肿瘤组织中BRCA1和RAP80的表达与非小细胞肺癌铂类化疗预后的相关性研究

目的 探讨DNA损伤修复蛋白BRCA1和RAP80表达与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)铂类化疗预后的相关性。方法 回顾性研究2010年6月—2012年6月在浙江大学医学院附属第一医院使用含铂方案化疗的NSCLC患者相关信息，以免疫组织化学染色法检测患者病理组织标本BRCA1和RAP80的表达，评价BRCA1和RAP80表达与NSCLC临床特征的相关性，并以Kaplan-Meier生存曲线和COX回归风险比例模型评价与NSCLC铂类化疗预后的相关性。结果 共95例NSCLC患者纳入研究，肿瘤组织中BRCA1和RAP80表达存在显著相关性(r=0.229，P=0.026)。BRCA1和RAP80蛋白表达与年龄(<60岁和≥60岁)、性别、PS评分、临床分期等临床特征无统计学差异；而RAP80蛋白表达水平与组织学分型、吸烟状态具有显著相关性(P<0.05)。BRCA1或RAP80蛋白表达阳性患者的中位总生存期(overall survival，OS)显著低于阴性患者(P<0.05)。此外，BRCA1与RAP80二者表达都阴性的患者，中位OS显著长于两者至少其中之一为阳性的患者(P<0.05)。然而，BRCA1和RAP80表达与疾病进展时间无显著相关性。多因素分析结果表明，组织学分型及RAP80表达是NSCLC铂类化疗的独立预后因子(P=0.008和P=0.017)。结论 BRCA1和RAP80表达阴性的NSCLC患者含铂方案化疗可带来明显的生存获益，RAP80是潜在的疗效预测生物标志物。     

丹参酮IIA对阿霉素耐药人乳腺癌细胞的多药耐药逆转作用及机制研究

目的 研究丹参酮II_A对阿霉素耐药人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的多药耐药逆转作用及相关机制。方法 分别用丹参酮II_A、阿霉素、阿霉素联合丹参酮II_A处理人乳腺癌MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞,采用MTT法检测细胞增殖率;流式细胞术检测丹参酮II_A干预后MCF-7/ADR细胞内阿霉素蓄积量的变化;检测丹参酮II_A干预后MCF-7/ADR细胞三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）消耗量的变化;采用qRT-PCR、Western blotting法检测丹参酮II_A干预后MCF-7/ADR细胞ATP结合转运蛋白B1（ATP-binding cassette transporter B1,ABCB1）、ABCG2和ABCC1基因和蛋白表达的变化。结果 丹参酮II_A显著抑制MCF-7及MCF-7/ADR细胞增殖（P<0.05）,呈剂量相关性;丹参酮II_A能够逆转MCF-7/ADR细胞的多药耐药性（P<0.05）,增加MCF-7/ADR细胞内阿霉素的蓄积（P<0.05）,减少MCF-7/ADR细胞的ATP消耗（P<0.05）,显著下调ABCC1和ABCG2基因和蛋白表达（P<0.05）。结论 丹参酮II_A能够通过调控ABCG2、ABCC1介导的转运,逆转MCF-7/ADR细胞的多药耐药性。     

HPCE与HPLC测定科博肽注射液含量的方法比较

目的 系统地比较高效毛细管电泳法(HPCE)和高效液相色谱法(HPLC)在测定科博肽注射液含量方面的差异。方法HPCE分离条件为：未涂层毛细管柱(50 μm×40 cm,有效长度30 cm),运行缓冲液为0.1 mol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH 2.5),分离电压20 kV,柱温25 ℃,检测波长200 nm;HPLC分离条件为：Aeris PEPTIDE XB-C₁₈柱(4.6 mm×150 mm,3.6 μm),柱温30 ℃,流速0.9 mL·min^-1,检测波长200 nm,流动相A：0.1%三氟乙酸-水、流动相B：0.1%三氟乙酸-乙腈,梯度洗脱。结果 科博肽在HPLC和HPCE各自的分离条件下进样浓度分别在17.33~138.60 μg·mL^-11、1.08~138.60 μg·mL^-1内表现出良好的线性关系(r均为0.999 7),平均加样加收率分别为100.3%和99.3%,RSD 分别为0.7%和1.2%。结论 HPCE与HPLC均可用于科博肽注射液的含量测定,但HPCE在使用成本、分离时间、检出限等方面更具有优势。     

载艾塞那肽介孔二氧化硅纳米粒的研制及其药动学

制备了孔径（6.0±0.2）nm、孔容（0.94±0.03）cm3/g、比表面积（701.4±0.70）m2/g的SBA-15型介孔二氧化硅纳米粒,平均粒径为（920±120）nm,以其为载体负载艾塞那肽。所得SBA-15型介孔二氧化硅纳米粒因具有较大比表面积和比孔容,可提高载药量至（15.2±2.0）%。体外释放试验表明,该纳米粒在p H 7.4磷酸盐缓冲液中d1释出近35%,d14时缓慢释出40%。将艾塞那肽的水溶液和SBA-15型介孔二氧化硅纳米粒分别皮下注射给予SD大鼠。结果两组的t1/2为0.60和14.53 h,AUC0→t为1.71和8.60 ng·ml^-1·h,MRT为1.14和21.30 h,可见该载体可显著增加药物的半衰期和MRT,有望成为艾塞那肽皮下注射给药的理想载体。     

蛋白多肽类药物微球鼻腔给药的研究进展

<正>鼻腔给药是指在鼻腔内使用,发挥局部和全身作用的给药系统。鼻腔给药可避开"首过效应",药物吸收迅速,可提高生物利用度,部分药物生物利用度可接近于静脉给药,是一种非侵入性给药方式,使用     

神经毒素纳米粒的制备及在大鼠体内的组织分布

目的:制备含冰片/薄荷脑低共熔物(BMEM)的神经毒素纳米粒(NT-NPs),并考察其体外性质和组织分布。方法:采用复乳-溶剂挥发法制备NT-NPs,通过光子相关光谱法和透析袋法分别考察其理化性质和体外释药特性;采用125I放射性同位素示踪法测定经大鼠鼻腔给药后在脑、心、肝、脾、肺及肾组织的放射性计数,并以每毫克组织的放射性计数表示组织分布情况。结果:纳米粒外观圆整,平均粒径为(76.1±30.8)nm,Zeta电位为(-29.2±3.1)mV,包封率为(70.6±4.3)%;体外释药呈现缓释和突释双相。与不含任何吸收促进剂组相比,BMEM组脑中的药量显著提高,增加了约19.11倍;其他各组织(除肺外)的药量亦有显著提高(P<0.01)。与冰片(BO)组相比,BMEM组脑和脾中的药量显著提高(P<0.05)。结论:含BMEM的NT-NPs包封率高,理化性质稳定,体外释药具有缓释特征。BMEM可有效增加NT-NPs经鼻腔吸收入脑及其他各组织的药量,是一种优良的新型吸收促进剂,具有良好的开发应用前景。