三七总皂苷对大鼠血管平滑肌细胞增殖及JNK磷酸化的影响

【目的】研究发现,三总皂苷（TPNS）具有抑制和促进细胞增殖的双向调节作用,但是具体的作用机制尚不明确。本研究旨在观察TPNS对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及经由何种信号通路介导。【方法】采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）和蛋白印迹（Western blot）法观察了体外培养的大鼠VSMC在不同浓度及一定浓度不同作用时间TPNS作用下,VSMC增殖活性的变化及c—Jun氨基末端激酶（JNK）磷酸化的变化：并用DAPI染细胞核,观察TPNS作用后核形态的变化。【结果】MTT法观察到：TPNS的浓度为0．5g／L,1．0g/L,1．5g／L时,无论是处于静息状态或50mL／L血清刺激下,VSMC的代谢于活性均增高;TPNS的浓度为3．0g／L时,静息培养的VSMC的代谢活性没有明显的变化,而50mL／L血清刺激的VSMC的代谢活性仍增高;TPNS的浓度为6．0g／L,12．0g／L时,静息培养或50mL／L血清刺激下的VSMC的代谢活性均降低,并随着浓度的增大．代谢活性降低越明显。同时．Western blot结果显示：TPNS能快速的激活JNK1／2,并呈时间和浓度依赖性。当TPNS的浓度为0．5g／L时,即可引起JNK的磷酸化,并随着浓度的增大,磷酸化作用增强：当TPNS的浓度为1．5g／L时．作用5min,JNK呈现最大程度的激活,随后逐渐减弱。DAPI染核观察到,6．0g／L TPNS作用48h后,VSMC出现了核固缩、核碎片等细胞凋亡的特征。【结论】较低浓度的TPNS可促进血管平滑肌细胞的增殖,而较高浓度的TPNS可抑制其增殖,JNK1／2磷酸化可能是引起细胞增殖受到抑制的机制之一。     

颈总动脉压诱导的小鼠移植静脉血管重构

【目的】 研究血压升高引起血管重构的机制。【方法】 手术取出麻醉后的11 ~ 12周供体C57BL/6J小鼠的下腔静脉,连接到同窝出生的受体小鼠颈总动脉,构建“静脉桥”。继而,收获受颈总动脉压作用不同时间(0,2,4,8周)后的移植静脉,经石蜡包埋HE染色。丽春红-维多利亚蓝染色以及平滑肌特异性抗体免疫组化染色后观察其血管构筑。【结果】术后各时间点均可见移植静脉血管壁增厚及新生内膜的形成,呈时间依赖性。与正常静脉[(11.10 ± 0.9)μm)]相比,术后8周血管壁[(88.97 ± 16)μm)]增厚了8倍(P < 0.01)。术后2周移植静脉新生内膜中即可见血管平滑肌细胞大量增生,4周最多,8周后数量减少,但细胞外基质明显增多。移植静脉在动脉压作用下,其弹性膜历经了断裂、合成和重建过程。【结论】 血压升高产生的机械力可直接导诱导移植的小鼠静脉粥样硬化以及弹力膜的重构。本研究可望为深一步探索高血压引起血管重构的机制及防治新策略提供有用的动物模型及实验依据。     

盐酸小檗碱通过抑制PKCα磷酸化抑制机械牵张力诱导的血管平滑肌细胞增殖和凋亡

[目的]观察机械牵张力(SS)是否通过激活PKCα诱导小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡,并探讨盐酸小檗碱(BBR)对它的作用及机制。[方法]实验共分6组：正常对照组、BBR组、PKCα抑制剂(Go6976)组、SS组、SS+BBR组、SS+Go6976组。静息培养的细胞给予BBR或Go6976预处理1 h,继而予10%强度的SS刺激15 min后收集细胞,Western blot检测PKCα和MAPK(ERK、JNK、p38)磷酸化水平。BBR或Go6976预处理1 h,牵拉时间为1 h,继续培养23 h,免疫荧光法检测细胞增殖(Ki67)和凋亡(TUNEL)。[结果] Western blot与免疫荧光结果显示,与正常对照组相比较,SS可升高PKCα和MAPK(ERK、JNK和p38)磷酸化水平(P<0.05),并增加VSMC的增殖和凋亡水平(P<0.05)。BBR可抑制PKCα和ERK、JNK、p38磷酸化水平(P<0.05),同时抑制VSMC增殖和凋亡(P<0.05);Go6976可抑制PKCα和ERK、JNK磷酸化水平(P<0.05),但对...     

注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠联合痰热清注射液治疗痰热壅肺型慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床研究

目的探讨注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠(舒普深)联合痰热清注射液治疗痰热壅肺型慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床效果。方法将痰热壅肺型慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者125例根据治疗方案分为2组,对照组62例患者采用左氧氟沙星注射液治疗,观察组63例患者采用舒普深联合痰热清注射液治疗,疗程均10 d,比较2组临床病症改善情况、临床指标改变情况、临床治疗效果及药物不良反应情况。结果治疗后,2组肺功能指标肺活量(VC)、第1秒用力呼气量(FEV1)均显著升高(P均<0.05),血白细胞计数、CRP均显著降低(P均<0.05)。观察组VC、FEV1及临床治疗总有效率均明显高于对照组(P均<0.05),白细胞计数、CRP均明显低于对照组(P均<0.05),患者咳嗽咳痰症状消失时间、胸闷气短症状消失时间、发热症状消失时间、住院时间均明显短于对照组(P均<0.05)。2组药物不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论舒普深联合痰热清注射液是治疗痰热壅肺型慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的有效药物,可明显改善临床病症和相关临床指标,提高疾病治疗效果,药物不良反应少,安全性高,值得临床推广使用。     

76例脂肪肝临床分析

随着国内经济的发展，人们生活水平的提高，饮食结构的变化以及体力劳动的减少，近十多年来我国的肥胖和代谢综合症等发病率逐渐增高，对人们健康的威胁日渐严重。高血脂、脂肪肝、高血压、高血糖、肥胖等及其相关疾病严重威胁人类健康和生命，使生活质量下降，预期寿命缩短。脂肪肝是指脂肪在肝内蓄积     

阴道毛滴虫的扫描电镜观察

材料与方法 阴道毛滴虫采自衡阳市妇幼保健院门诊的滴虫性阴道炎患者,经简易培养基(1％葡萄糖生理盐水4ml 人血清1ml)37℃培养2～3天,取下层培养液按1:1加入2.5％戊二醛作表面固定1小时后,在铜片上滴膜,2.5％戊二醛固定30分钟,磷酸缓冲液清洗,装入样品栏,逐级酒精脱水,醋酸异戊酯置挽,然后在临界点干燥仪中干燥,置高真空镀膜台喷金,TSM—1型扫描电镜观察。共观察标本25个。     

静脉移植体病变的病理过程及其影响机制

冠状动脉旁路移植术广泛用于临床治疗冠心病,自体静脉是移植血管的主要来源,但移植术后再狭窄大大降低了手术成功率.临床跟踪研究发现大约半数的病人术后10到15年后静脉移植体会有不同程度的增生再狭窄甚至阻塞,引发严重的后果.因此,深入了解静脉体进入动脉循环环境后的病变过程及其机制具有重要意义.文章介绍了正常血管的发育与调控,比较动、静脉血管生理差异,讲述静脉移植后动脉化及再狭窄的病理过程,分析各种病变的影响因素及作用机制并展望未来各种治疗前景.     

机械牵张力和氧化型低密度脂蛋白协同激活大鼠血管平滑肌细胞LOX-1受体-ERK1/2信号通路

目的为证实α1-肾上腺素能受体(α1-AR)是否介导了机械牵张力和/或去甲肾上腺素(NE)对小鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的协同激活并加速血管重构。方法静息培养的小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)经有或无Prazosin(α1-AR抑制剂)预处理后,给予机械牵张力和/或NE刺激,Western Blotting检测ERK1/2的磷酸化水平,免疫荧光检测ki-67的表达(细胞增殖),RT-PCR检测细胞α1-AR亚型(α1A-,α1B-和α1D-AR)mRNA的表达。分别用三种亚型的α1-AR-siRNA预处理细胞,观察α1-AR各亚型基因沉默对机械牵张力诱导的VSMC ERK1/2磷酸化的影响。结果机械牵张力可分别上调α1B-和α1D-AR mRNA表达,但α1A-AR mRNA未检测到。机械牵张力和/或NE均可激活ERK1/2,引起ERK1/2磷酸化增加,而两种因素共同存在时ERK1/2激活更加明显;ki-67的表达呈现类似效应;这种由机械牵张力和/或NE激活的作用均可被Prazosin部分抑制。α1B-和α1D-AR-siRNA预处理可分别减少α1B-和α1D-AR ...     

机械牵张力和氧化型低密度脂蛋白协同激活大鼠血管平滑肌细胞LOX-1受体-ERK1/2信号通路

目的高血压和高血脂均可导致动脉粥样硬化(As)的发生,罹患两种疾病的患者,病情进展更快且预后更差。弄清高血压和高血脂共同的致病机制,对于As的防治有重要的指导意义。方法应用机械牵张力和/或氧化型低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein,ox-LDL)刺激静息培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),Western Blotting检测ERK1/2的磷酸化水平;RT-PCR检测细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋受体1(LOX-1)的表达;LOX-1-siRNA预处理细胞,观察LOX-1基因沉默对机械牵张力和/或ox-LDL处理的VSMC ERK1/2磷酸化的影响。结果机械牵张力和/或ox-LDL均可激活ERK1/2,引起明显的ERK1/2磷酸化增加,而两种因素共同存在时ERK1/2激活更加明显。ox-LDL和机械牵张力均可分别上调LOX-1 mRNA表达水平,前者在第3 h达到峰值,随后维持在一较高的水平;后者在第6 h达到峰值,随后逐渐下降,24 h恢复到基础水平。此外,LOX-1-siRNA预处理可以减少LOX-1 mRNA量,进而导致机械牵张力和/或ox-LDL诱导的ERK1/2...     

三针法动脉端端吻合实验研究

血管吻合口漏血是由于血管本身的收缩和血流压力的作用,因此缝接血管时要有足够的针数以尽量减小缝针之间的裂隙。然而若能将缝针数减少至最低限度,既可节省时间,又能减少手术失误率。为此,设计了动脉三针缝合法的实验研究,现初步报道如下。