四种重要生物恐怖毒素液相芯片多重检测方法的建立

目的建立包括蓖麻毒素B(Ricin toxion B,RTB)、肉毒梭菌毒素A(Clostri botulinum toxin A,CBTA)、金黄色葡萄球菌肠毒素B(Staphylococcal enterotoxin B,SEB)及产气荚膜毒素ε(Clostridium perfringens toxinε,CPTε)在内的4种重要生物恐怖因子的多重液相芯片检测方法。方法采用双抗夹心法原理和液相芯片技术平台,通过优化偶联抗体浓度和检测抗体浓度以及抗原抗体最佳孵育时间,建立4种生物恐怖因子液相芯片多重检测方法。结果反应条件优化实验结果表明,RTB、CBTA、SEA和CPTε偶联抗体的最佳用量分别为20μg、40μg、80μg、80μg;RTB、CBTA、SEA和CPTε检测抗体的最佳稀释比分别为1∶5000、1∶1000、1∶2000、1∶4000;4种毒素抗原抗体最佳孵育时间为60min。多重检测结果表明,本研究建立的毒素液相芯片多重检测方法可有效检测上述任意1种毒素、任意2种毒素组合、任意3种毒素组合并能同时检测4种毒素。灵敏度检测结果表明,RTB、CBTA、SEA、CPTε检测灵敏度分别为1 ng/ml、10 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml。结论本研究建立的4种常见生物恐怖毒素液相芯片多重检测方法通过1次检测能同时检测RTB、CBTA、SEA、CPTε,是一种准确、灵敏、快速和高通量的检测方法。     

细胞色素P450w-羟化酶抑制剂HET0016通过ERK1／2途径减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的：细胞色素P450w-羟化酶在心肌缺血再灌注（MI／R）损伤中的作用尚不十分清楚。本课题研究HET0016[N-hydroxy-N＇-（4-butyl-2 methylphenyl）formamidine]，一种新的特异性细胞色素P450w-羟化酶抑制剂对MI／R损伤的保护作用，并探讨与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的关系。方法：采用大鼠MI／R模型，缺血30min，再灌注2h。将大鼠随机分为以下各组，每组6-8只：①假手术组；②模型对照组；③HET0016高低剂量给药组：在缺血前15min分别给0．1和1mg·kg-I HET0016静脉注射；⑤MAPK抑制剂组：在缺血前10min分别给予ERKl／2抑制剂PD98059（1 mg·kg-l，iv）、p38MAPK抑制剂SB203580（1mg·kg-1，iv）或JNK抑制剂SP600125（6mg·kg-1，ip）；⑥lmg·kg-1 HET0016＋MAPK抑制剂（PD98059，SB203580或SP600125）组。再灌结束后计算心肌梗死面积，测定LDH、CK和TnT水平。Westernblot检测心肌组织磷酸化ERKl／2、p38 MAPK及JNK蛋白表达水平。结果：①模型组较正常组大鼠血清LDH、CK和TnT分别升高6．43、4．13和9．7倍。HET0016剂量依赖性降低以上血清心肌酶谱水平；②HET0016高、低剂量组心肌梗死面积分别为（6．3±0．16）％和（10．3±0．2）％，与模型对照组（19.8±0．15）％比均有显著性差别；③PD98059可完全阻断HET00l6的作用，但SB20358和SP600125对其没有明显影响。④HET0016增加心肌组织磷酸化ERKl／2蛋白表达，但不影响磷酸化p38 MAPK及JNK蛋白表达。结论：HET0016通过抑制细胞色素P450w-羟化酶对大鼠MI／R损伤有保护作用，其机制与ERK1／2途径有关。     

反应停对人癌裸鼠肿瘤及新血管形成的影响

目的:观察反应停对人卵巢癌细胞(OVCAR-3)及人结肠癌细胞(HCT-8)生长及肿瘤组织内新血管形成的影响。方法:建立人癌裸鼠异种移植的模型,将接种肿瘤后的裸鼠分别灌胃给予不同剂量的反应停,并与正常对照组进行比较,观察肿瘤生长的情况;采用免疫组化检验方法检测肿瘤组织中微血管密度(MVD)。结果:对人癌裸鼠OVCAR-3肿瘤,反应停中、高剂量组均可显著抑制肿瘤生长(P<0.05、P<0.01),对HCT-8的生长却无明显影响,但反应停均呈剂量依赖性降低上述肿瘤组织MVD。结论:反应停的抗肿瘤作用可能与抗新血管形成作用无关。     

利福平硫酸钙植入剂的研制与相关性能检测

目的:制备一种新型人工骨缓释材料-利福平硫酸钙植入剂.方法:以硫酸钙、PLGA为载体,用有机溶剂注模法制造多孔缓释材料并检测其药物稳定性、孔隙率、孔径等相关性能.结果:缓释材料的制备过程中利福平稳定,材料的平均孔隙率为(47.43 0.34)%,平均孔径为(250.86 25.27)μm.结论:材料的孔隙率、孔径都符合骨生长的要求,有利于新骨的长入及体液的流通.     

毛细管色谱法测定车间空气中1,3-二氯丙烯

[目的]建立作业场所空气中1,3-二氯丙烯的溶剂解吸气相色谱分析方法.[方法]空气中的1,3-二氯丙烯用活性碳管采集,用二硫化碳解吸液解吸后进样,经WAX毛细管色谱柱分离,氢火焰离子化检测器检测,以保留时间定性,峰面积定量.按照<工作场所空气中毒物检验方法的研究规范>的要求进行试验及现场模拟试验.[结果]1,3-二氯丙烯在0～1500μg/ml浓度范围内具有线性相关性;回归方程y=-228.8 106.4x,相关系数为0.9999,方法的检出限1μg/ml(进样1μl),相对标准偏差在1.8%～3.5%之间,总平均解吸效率为96.7%,样品在活性碳管中可稳定5d,生产作业场所空气中可能共存的氯乙烯、二氯乙烯在本方法条件下不干扰1,3-二氯丙烯的分析测定.[结论]此方法各项指标均达到<工作场所空气中毒物检验方法的研究规范>的要求,适用于作业场所空气中1,3-二氰丙烯的检测.     

桡骨远端骨折保守治疗前后影像学测量及临床意义

目的：分析桡骨远端骨折保守治疗前后的影像学参数、分型和疗效、预后之间的关系。方法：选取桡骨远端骨折患者62例为研究对象，利用我院Starpacs系统在每张X线片上精确测量掌倾角、尺偏角和桡骨高。分析掌倾角、尺偏角、桡骨高和腕关节功能之间的关系。结果：62例中有50例（80．65％）经保守治疗后效果优良。其中AO分型A型保守治疗效果满意，B型经保守治疗效果较满意，优良率达75％，C型骨折中仍有约50％经保守治疗后达到可以接受的标准。在影像学上掌倾角5°以上，尺偏角18°以上，桡骨高6．5mm以上，临床上可以获得优良的预后。结论：桡骨远端骨折的影像学测量可以为患者腕关节功能预后的判断提供依据，为手术适应证的选择提供临床标准。     

关节镜下抽吸式半月板缝合术后的康复护理

半月板缝合术是目前修复半月板损伤最主要的手术方式，我科研究设计一种特制缝合针，应用抽吸法缝合损伤半月板，手术后使用膝关节活动支具，指导患者正确应用康复支具，配合理疗师进行严格的康复训练，取得了较好的效果。     

后路矫正特发性脊柱侧凸相关问题的探讨

目的探讨后路矫正特发性脊柱侧凸的相关问题。方法回顾2001年1月～2006年10月42例特发性脊柱侧凸患者，冠状面Cobb角45°～145°，平均76．75°；矢状面Cobb角22°～105°，平均47．08°；Bending相主胸弯侧凸平均矫正率20．51％～39．19％。侧凸Cobb角80°～145°8例，采用一期后路松解，颅盆环牵引二期后路选择性节段椎弓根螺钉固定及胸廓成形术；侧凸Cobb角60°～79°16例，行同期后路松解选择性节段椎弓根螺钉固定术；侧凸Cobb角小于60。18例，勿需松解，即行选择性节段椎弓根螺钉固定。结果Cobb角80°～145。、60°～79。和小于60。的术后矫正Cobb角分别为10°～40°（34．50°）、6°～25°（18．66。）、4°～18°（10．11°）；术后侧凸平均矫正率分别达66．88％、73．31％和80．34％。术后后凸Cobb角平均矫正角度为29．50°、27．74°和22．65°，平均矫正率分别为57．35％、40．77％和10．30％。随访12～78个月（平均36个月），16例失访，随访26例中23例内固定无松脱断裂，畸形丢失率为1．53％～5．10％，平均3．01％。2例术后1年半复查发现断棒，再次矫形术。结论重度AIS应采用后路广泛松解，凹侧松解是关键。颅盆环牵引安全可靠。选择性节段椎弓根螺钉固定同样达到全节段椎弓根螺钉固定的矫形效果。融合范围应密切结合AIS的分型。胸廓成形术后早期对肺功能有影响，通过术后肺功能训练可恢复至术前水平。