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目的:构建并表达胎盘生长因子串联scFv,提升对胎盘生长因子的亲和力。方法:设计不同长度的柔性连接子连接的串联scFv,构建串联scFv质粒,并分别将串联scFv与亲本scFv于原核表达系统进行表达。通过间接ELISA分别测定串联scFv及对应亲本scFv亲和力,分别对数据进行单因素ANOVA方差分析,并使用Dunnett-t检验进行组间比较。结果:柔性连接子长度的不同,会对串联scFv亲和力造成差别。单因素ANOVA方差分析结果表明,各组亲和常数间存在明显的统计学差异,Dunnett-t检验组间比较结果可知,当串联scFv间柔性连接子(GGGGS)n长度n=4和n=5时,亲和力较亲本提升不明显(P>0.05);但亲和力在n=6(t335=33.90,t7A10=32.00,均P<0.000 1)及n=7(t335=91.68,t7A10=90.71,均P<0.000 1)时较两亲本均有明显提升。结论:串联scFv可以明显提高单体scFv亲和力。 相似文献
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目的 探讨银离子(Ag+)、铜离子(Cu2+)、锌离子(Zn2+)对5种常见念珠菌(白色念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌和光滑念珠菌)的抗菌作用。方法 使用去离子水分别将硝酸银、氯化铜和氯化锌配制为0.1 mol·L-1的水溶液。取保存的白色念珠菌标准菌株ATCC-60193、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌,加入溶菌肉汤培养液,使用比浊仪调配菌液浊度为0.5麦氏单位,然后使用无菌去离子水将菌液稀释至106 CFU·L-1。取配制好的0.1 mol·L-1的硝酸银、氯化铜和氯化锌溶液,分别倍比稀释为6个浓度(10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7 mol·L-1),分别取各浓度的金属离子溶液100μL与预制好的5种念珠菌悬液100μL进... 相似文献
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目的 构建肝硬化患者首次食管胃底静脉曲张出血的非侵入性预测模型及模型的验证。方法 回顾性分析2016年1月至2021年11月我院收治的358例既往未发生消化道出血的肝硬化患者的临床资料,按7∶3比例分为训练集(n=254)和验证集(n=104),随访至少1年根据患者是否发生首次出血训练集分为出血组(n=97),非出血组(n=157),验证集分为出血组(n=51),非出血组(n=53);使用单因素及多因素Logistic回归分析在训练集中研究肝硬化患者首次食管胃底静脉曲张出血的危险因素,并构建列线图模型。分别在训练集及验证集中使用的ROC曲线下面积、灵敏度、特异度、校标曲线等指标评价风险预测模型的预测精度,临床决策曲线(DCA)评价预测模型的临床效用。结果 Child-Turcotte-Pugh评分(CTP)、中性粒细胞-淋巴细胞比(NLR)、血红蛋白、血小板计数与肝硬化患者首次食管胃底静脉曲张出血有良好的相关性。基于CTP、HGB、PLT、NLR构建的预测模型在训练集上ROC曲线下面积(AUC)为0.823(95%CI 0.771~0.876),灵敏度为0.75、特异度为0.77;在验... 相似文献
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QIU YAN LIU TAO YONG CHEN HUA BIAO CHEN NAN LI MING HUI ZHANG PENG CHENG MA XUE TAO CAO Institute of Immunology Zhejiang University Hangzhou P.R.China Institute of Immunology Second Military Medical University Shanghai P.R.China Institute of Dermatology Chinese Academy of Medical Sciences Nanjing P.R.China 《中华微生物学和免疫学杂志(英文版)》2005,3(1):66-72
Extracts of Tripterygium wilfordii Hook F.(TWHF ) are effective in traditional Chinesemedicine for treatment of autoimmune diseasessuch as rheumatoid arthritis, systemic lupus ery thematosus, nephritis and asthma [1, 2]. Trip tolide, a diterpenoid triepoxide, is derived fromTWHF and is responsible for most of the immuno suppressive and anti inflammatory effects ofTWHF. Triptolide has been shown to be effectivein the treatment of autoimmune diseases, … 相似文献
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Synaptotagmin(Syt)constitutes a family of membrane-trafficking proteins,so far nearly 20 Syts have beendiscovered.Extensive work showed that synatotagmins were a potential Ca~(2+) sensor for regulated exocytosis.Thisstudy was to investigate the expression and location of synaptotagmin Ⅱ(Syt2)in RBL-2H3(RBL)and its role inregulating exocytosis of RBL.The expression of Syt2 in RBL was confirmed by Western blot.The recombinantexpression vector pEGFP-N1-Syt2 was constructed and transfected into RBL by electroporation,the stabletransfectant RBL-Syt2-S expressing fusion protein Syt2-EGFP were obtained and Syt2 was highly concentrated atplasma membrane with little detected in cytoplasm.To analyze the role of Syt2 during exocytosis of RBL,therelease of cathepsin D was assayed by immunoblotting.Compared with control,the release of cathepsin D byRBL-Syt2-S was markedly decreased.The results indicated that Syt2 played a negative regulation in exocytosis oflysosomes in RBL.Cellular & Molecular Immunology.2005;2(3):205-209. 相似文献
78.
目的:克隆人胆固醇酯转运蛋白(CETP)eDNA序列,利用大肠杆菌表达人CETP,制备兔抗人CETP的多克隆抗血清.方法:采用RT-PCR方法,将人CETP基因克隆到pET-30b( )上,构建CETP原核表达载体并转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,切胶纯化蛋白后免疫家兔,制备CETP抗血清,以ELISA、Western blot、细胞免疫荧光方法对抗血清效价及特异性进行鉴定.结果:SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CETP基因在大肠杆菌BL21(DE3)的包涵体中高效表达,最佳诱导表达时间为4 h.将切胶纯化的蛋白免疫家兔,ELISA法测定的抗血清效价为1∶5.12×105.Western blot及细胞免疫荧光检测结果显示,抗血清可以与CETP原核及真核表达蛋白特异结合.结论:成功地将CETP进行了原核表达并制备了高效价、高特异性的兔抗人CETP抗血清,为进一步研究CETP的结构与功能奠定了基础. 相似文献
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80.
YU Li~ LI Fa-tao ~ TANG Ming-qiao~ YAN Wei-qun~ .Department of Biochemistry of Medical College Jinan University Guangzhou China. Institute of Applied Mechanics of Jinan University Guangzhou China. Jilin University Changchun China 《中国生物医学工程学报(英文版)》2006,15(2)
In the study of bone and cartilage diseases in our laboratory, chondrocyte stereo-differentiation mod-el was cultured into cartilage tissue. The cultured cartilage tissue was closely similar to natural tissue inboth histological condition and biochemical metabolism. The model mimicked the chondrocyte differenti-ation and metabolism in vivo completely〔1〕. We studied some essential extracellular matrices, includingcollagen, proteoglycan(PG) and hyaluronic acid(HA) on the construction of grow… 相似文献