RNAi在胃癌基因治疗中的研究

RNA干扰(RNAi)又称转录后基因沉默,是由外源或内源性的双链RNA(dsRNA)导入细胞而引起同源的mRNA降解,进而抑制其相应的基因表达。作为一项新技术,目前广泛地应用于生物体基因功能研究和多种肿瘤的研究。在胃癌方面,现针对胃癌相关基因治疗进行了积极的探索,并取得了一些突破性的进展。     

胃癌及癌前病变中P16蛋白表达的研究

目的:研究胃癌及癌前病变中P16蛋白表达的情况,探讨p16基因在胃癌发生、发展中的作用。方法:收集正常胃粘膜组织标本43例,肠上皮化生组织标本35例,异型增生上皮组织标本50例及新鲜胃癌组织标本40例,采用免疫组化SP法检测以上组织的P16蛋白的表达情况。结果:P16蛋白表达的阳性率分别为:正常胃粘膜86%,肠上皮化生69%,轻、中、重度异型增生分别为83%、71%和35%,胃癌为23%(肠型29%、弥漫型19%)。其中正常胃粘膜、肠上皮化生、轻、中度异型增生间差异无显著性(P>0.05);重度异型增生和胃癌间差异无显著性(P>0.05);但两大组间差异有显著性(P<0.05)。结论:P16蛋白表达异常是胃癌发生的早期事件,且随着胃癌的发展而逐步增加。     

层粘蛋白及其受体在肝细胞癌及癌旁组织中的表达

目的探讨层粘蛋白（ＬＮ）、层粘蛋白受体（ＬＮ－Ｒ）与原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）生物学行为的关系。方法采用ＳＡＢＣ法检测４２例肝细胞癌及癌旁组织中层粘蛋白（ＬＮ）、层粘蛋白受体（ＬＮ－Ｒ）的表达情况。结果ＬＮ、ＬＮ．Ｒ在肝细胞癌中的表达均显著高于癌旁组织（Ｐ＜０．０５）,且与肝细胞癌Ｅｄｍｏｎｄｓｏｎ分级呈正相关（Ｐ＜０．０５）;浸润型（ＩＨＣＣ）生长、有转移、肿瘤直径＞３ｃｍ者ＬＮ、ＬＮ－Ｒ表达高,而膨胀型（ＥＨＣＣ）生长、无转移、肿瘤直径≤３ｃｍ者多表达较低（Ｐ＜０．０１）。结论细胞内ＬＮ、ＬＮ－Ｒ水平可作为评价肝细胞癌恶性程度及转移潜能的良好指标。     

γ-氨基丁酸及其A型受体在胃癌SGC-7901细胞的表达及对细胞增殖的影响

目的 观察GABA、GAD65、GABRP在胃癌SGC-7901细胞中的表达及对细胞增殖、细胞周期分布的影响.方法RT-PCR、IF及Western Blot检测胃癌细胞SGC-7901中GABA、GAD65及GABRP mRNA及蛋白表达;1、10、100μmol/L GABA,0.5、5、50 μmol/L Muscimol,0.5、5、50 μmol/L Bicucullin分别作用于胃癌细胞SGC-7901 48 h后,新型四唑氮盐(MTS)比色法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期分布情况.结果 GAD65、GABRPmRNA及蛋白均表达于SGC-7901细胞中;GABA、GABRP及GAD65蛋白定位于SGC-7901细胞细胞膜和细胞质;与空白组比较,1 μmol/LGABA,5、50μmol/L Muscimol作用SGC-7901细胞48 h后,细胞生长的增殖率上升,5、50 μmol/L Bicucullin作用SGC-7901细胞48 h后,细胞生长抑制率上升;1μmol/L GABA可导致细胞Go/G1数量的减少,G2/M期数量的增加;3个浓度的Muscimol可导致G0/G1期数量的减少,5、50μmol/L Muscimol可导致细胞G2/M期数量增加;5、50 μmol/L Bicucullin可导致G2/M期数量的减少(P＜0.05).结论 GABA及其A受体在SGC-7901细胞中的表达可能促进细胞增殖,扰乱细胞周期进程,促使细胞分裂.     

病区教学干事在外科实习带教中的作用

目的：探讨病区教学干事在外科实习教学中的作用。方法：2005-2008年间皖南医学院弋矾山医院外科由病区教学干事负责172名医学本科生实习带教管理,并行问卷调查,统计毕业后在外科系统工作人数,获取用人单位评价。结果：医院和科室对外科病区教学干事工作表示肯定,97．67％（168／172）的学生乐意接受;毕业后有56名学员到外科系统工作,用人单位正面评价率为92．86％（52／56）。结论：病区教学干事负责制密切了师生关系,提高了外科临床实习带教质量和学生综合素质。     

腹腔镜手术与开腹手术治疗直肠癌短期临床疗效的meta分析

目的:通过meta分析评估比较腹腔镜手术(laparoscopic surgery,LS)与开腹手术(open surgery,OS)治疗直肠癌的短期临床疗效。方法:在Pub Med、Cochrane library等数据库中检索2004年1月至2014年1月发表的有关LS与OS治疗直肠癌短期疗效的随机对照试验(randomized controlled trials,RCTs)文献,使用Rev Man 5.2对数据进行meta分析。结果:共有8篇RCT文献、1 518例病例纳入此次研究,其中腹腔镜组663例,开腹组855例。Meta分析结果显示,与开腹组相比,腹腔镜组手术时间较长[MD=26.41,95%CI=(15.26,37.56),P<0.00001],淋巴结清扫数量稍少,但差异无统计学意义[MD=-0.92,95%CI=(-2.39,0.55),P=0.22],出血量更少[MD=-54.22,95%CI=(-73.71,-34.74),P<0.00001],肠道恢复时间[MD=-1.19,95%CI=(-1.70,-0.68),P<0.00001]、第一次进食时间[MD=-0.95,95%CI=(-1.56,-0.33),P=0.002]、住院时间[MD=-3.62,95%CI=(-4.96,-2.28),P<0.00001]均较短,并发症发生率也较低[RR=0.76,95%CI=(0.63,0.91),P=0.003],其余指标均较好。结论:LS治疗直肠肿瘤短期疗效优于OS,手术安全、可行。     

层粘蛋白与肿瘤的侵袭和转移

肿瘤细胞与细胞外基质（Extracellularmatrix，ECM）间的关系是近年来恶性肿瘤侵袭及转移机制的研究热点。层粘蛋白（laminin，LN）是细胞外基质中的重要成分。自Timpl等首次从鼠EHS肉瘤中发现并命名以来，人们对LN已进行了深入的探索和研究，发现LN具有很强的生物活性，在许多细胞的粘附、移动、生长和分化等生理过程中具有不可忽视的重要性，甚至起调控作用。本文仅就LN与肿瘤的侵袭和转移的研究现状作一综述。ILN的结构、合成与分布LN是一种大分子的非胶原性粘蛋白，分子量约为900kU。由3个非同源的多肽链组成，即A、B和C链。…     

RNA干扰沉默IGFBP2基因表达抑制裸鼠移植瘤的生长

目的：应用RNAi技术沉默胰岛素生长因子结合蛋白2基因（IGFBP2）,探讨其对人胃癌移植瘤生长的影响。方法：合成靶向IGFBP siRNA的表达质粒,于雌裸鼠皮下种植SGC7901胃癌细胞,肿瘤长至一定大小时,随机分为重组质粒实验组（A）,阴性质粒对照组（B）及盐水对照组（C）,于肿瘤局部分别注射重组质粒、阴性重组质粒、生理盐水。每3d给药一次,共8次,3d测量一次肿瘤体积,22d后处死全部动物,取肿瘤,测其大小和瘤重,RT-PCR检测各组IGFBP-2的表达。结果：A组肿瘤瘤块的体积和重量明显小于B、C组（P〈0.05）,RT-PCR显示,A组IGFBP-2的表达明显低于B、C组（P〈0.05）,B、C组IGFBP-2的表达差异无显著性（P〉0.05）。结论：靶向IGFBP-2siRNA瘤内注射能显著地延缓胃癌细胞裸鼠皮下移植瘤的生长,可能通过抑制IGFBP-2基因表达的机制抑制细胞增殖。