基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对藏药宽筋藤中生物碱类成分的快速辨识

目的 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography tandem quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS)对藏药宽筋藤Tinospora sinensis藤茎中生物碱类成分进行分析和鉴定。方法 采用色谱柱Waters ACQUITY UPLC C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)，以流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液进行梯度洗脱。使用电喷雾离子源(ESI)，正离子模式下采集数据；通过测定宽筋藤生物碱对脂多糖诱导小鼠巨噬RAW264.7细胞释放一氧化氮的抑制能力，评价其抗炎活性。结果 通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献，共鉴定出73个生物碱，包括12个原小檗碱型生物碱、23个四氢原小檗碱型生物碱、20个苄基异喹啉类生物碱、9个阿朴啡类生物碱、9个其他类生物碱。抗炎活性检测表明，宽筋藤生物碱对脂多糖刺激的RAW264.7细胞的一氧化氮具有较强的抑制作用。结论对藏药宽筋藤生物碱类成分进行较...     

UHPLC-MS/MS法同时测定杏香兔耳风中13种成分的含量

目的建立一种快速同时测定杏香兔耳风药材中13种成分含量的UHPLC-MS/MS方法。方法采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱技术检测,色谱柱为UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm),柱温为40℃,流动相为5 mmol甲酸铵和0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,体积流量0.25 mL/min,ESI负离子采集,雾化器和辅助气均为344.5 kPa,气帘气为206.7 kPa,喷雾电压为-4 500 V,离子化温度为500℃,13种成分均采用多级反应监测模式(MRM)。结果在优化的液相-质谱条件下,原儿茶酸、咖啡酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、1,5-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素、木犀草苷、芹菜素的检测质量浓度线性范围分别为1.099～274.800、1.006～100.600、1.080～1 080.000、83.12～8 312.00、19.92～996.00、1.076～269.000、5.555～555.500、4.420～4 420.000、44.76～17 904.00、48.00～9 600.00、2.108～210.800、4.136～413.600、1.070～107.000 ng/mL,且线性关系良好(r≥0.995 8),平均加样回收率(n=6)为96.54%～99.75%,RSD为0.48%～0.96%,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3.90%。结论该方法重复性和专属性好,稳定可控,可用于杏香兔耳风药材及其制剂的质量控制。     

救必应中2个新的咖啡酸半萜酯

目的 研究铁冬青Ilex rotunda干燥树皮（救必应）的化学成分及其体外抗炎活性。方法 采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、D101大孔吸附树脂柱色谱和半制备高效液相色谱进行分离纯化，并运用HR-ESI-MS、NMR进行化合物结构鉴定。通过测定化合物对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞释放炎症介质一氧化氮（NO）的抑制能力，评价化合物的抗炎作用；MTT法测定化合物的细胞毒性。结果 从救必应中分离得到14个化合物，分别鉴定为咖啡酸[(E)-4-羟基-2-甲基丁-2-烯-1-基]酯（1）、咖啡酸[(E)-4-羟基异戊烯基]酯（2）、咖啡酸(4-羟基异戊烯基)酯β-D-吡喃葡萄糖苷（3）、rotundarpenoside B(4)、3,5-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（5）、3,4-二咖啡酰基奎宁酸甲酯（6）、紫丁香苷（7）、芥子醛葡萄糖苷（8）、di-O-methylcrenatin(9)、咖啡酸（10）、芥子醛（11）、紫丁香醛（12）、原儿茶醛（13）、丁香酸（14）。结论 化合物1和2为2个新的咖啡酸半萜酯，分别命名为咖啡酸半萜酯A和咖啡酸半...     

藏药“叶格兴”的基原及化学成分、药理活性研究进展

目的 澄清常用藏药“叶格兴”的基原,考察其化学成分与药理活性,为规范临床用药、质量控制及资源的合理利用等提供依据。方法 采用文献考证、植物分类学鉴定、化学成分考察、药理活性鉴定,结合资源分布及临床使用现状调查分析。结果 藏药“叶格兴”涉及2科4属7种,即忍冬科接骨木属,菊科千里光属、合耳菊属、风毛菊属,文献记载的基原植物中最早使用的“叶格兴嘎保”即“白”者应是双花千里光、川西千里光;“叶格兴那保”即“黑”应为柳叶菜风毛菊及血满草;莱菔叶千里光（异叶千里光）、菊叶千里光（菊状千里光）、接骨草为云南、甘肃、川西习用、市场流通的主要代用品。叶格兴主要含萜类、黄酮类、生物碱类、酚酸等化学成分;叶格兴黑者主要用于“愈创”,白者主要用于“消炎”与现代药理研究抗炎、抗氧化、抗菌等活性相对应。结论 鉴于“叶格兴”的基原涉及到多种不同科属的植物,“叶格兴”已成为这些植物类药材的统称;据考证结果及化学成分、药理活性研究进展,从有利于规范临床用药、保证疗效和药材质量的角度,其名称和基原宜规范为：“■/叶格兴嘎保”（即白者）,来源为双花千里光（红缨合耳菊）、川西千里光（川西合耳菊）;“■/叶格兴那保”（即黑者...     

白头翁皂苷B4调控结肠癌小鼠脂肪酸代谢重编程作用研究

为探究白头翁皂苷B4(anemoside B4)对结肠炎相关结肠癌(colities-associated cancer, CAC)小鼠肿瘤组织中脂肪酸代谢的影响，该研究采用氧化偶氮甲烷(azoxymethane, AOM)/葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)建立CAC小鼠模型，将实验小鼠随机分为5组(正常组，模型组以及白头翁皂苷B4低、中、高剂量组),实验结束后测量小鼠结肠长度、肿瘤大小，苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色法观察结肠的病理变化，取结肠肿瘤切片进行空间代谢组学分析，分析肿瘤中脂肪酸代谢相关物质的分布变化情况；实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR, RT-qPCR)检测结肠肿瘤组织中SREBP-1、FASN、ACCα、SCD-1、PPARα、ACOX、UCP-2、CPT-1 mRNA的表达。结果显示，模型组小鼠体质量显著降低(P<0.05),结肠长度显著缩短(P<0.001),肿瘤数量增加，病理学评分显著升高(P<0.01);空间代谢组学分析发现结...     

基于超高效液相色谱-串联质谱法研究宽缨酮在大鼠体内的生物利用度及代谢产物

目的建立快速、灵敏的UHPLC-MS/MS方法用于宽缨酮的生物利用度研究,并初步鉴定其在大鼠体内的代谢产物。方法将SD大鼠分为静脉注射组和灌胃组,给予相应剂量宽缨酮。以槲皮苷为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)法测定不同时间点血浆中宽缨酮的浓度,并采用DAS 3.0软件计算主要药动学参数。采用UHPLC-Triple-TOF/MS鉴定大鼠灌胃给药宽缨酮后血浆、尿液及粪便样品中的代谢产物,并使用Peakview软件分析其中的代谢产物。结果方法学验证表明,宽缨酮在血浆中的定量下限为1 ng·mL^-1,在1~150 ng·mL^-1范围内有良好线性关系;日内和日间的精密度及稳定性考察的RSD值均小于10%;提取回收率在89.81%~99.95%之间,基质效应为91.15%~105.29%,满足生物样品定量分析的要求;尾静脉注射及灌胃给药宽缨酮后主要药动学参数:药时曲线下面积(AUC0-24 h)分别为(331.95±40.35)、(93.69±17.83)μg·h·L^-1;消除半衰期(t1/2)分别为(15.76±7.24)、(13.06±11.08)h;达峰浓度(Cmax)分别为(691.99±197.46)、(31.00±10.29)μg·L^-1;生物利用度为2.8%。在大鼠体内发现了包括宽缨酮原型在内的12种代谢产物,代谢途径主要涉及水解、甲基化、磷酸化和牛磺酸结合等。结论宽缨酮经灌胃给药后在大鼠体内生物利用度低,体内半衰期较长,结合代谢产物研究推测可能其原型在体内经转化后主要通过尿液排泄。