Tat47-57-HBcAg融合基因表达载体的构建及融合蛋白的表达鉴定

目的：探讨融合蛋白Tat47-57-HBcAg原核表达的可行性,并分析其表达形式,为研究其功能提供理论基础。方法：合成Tat47-57编码序列,PCR技术扩增HBcAg基因,通过重叠延伸PCR片段拼接法,将Tat47-57编码序列和HBcAg基因拼接,将融合基因克隆到pET28原核表达载体中。挑选测序正确的构建质粒转化大肠埃希菌Rosetta-gami^TM2（DE3）,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导融合蛋白表达,表达产物超声破壁,十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析融合蛋白的表达形式,Western印迹鉴定。结果：Tat47-57-HBcAg融合蛋白在大肠埃希菌中主要以可溶性形式过度表达,Western印迹分析表明Tat47-57-HBcAg融合蛋白可与HBcAg单克隆抗体反应。结论：融合蛋白Tat47-57-HBcAg以可溶性形式在原核表达系统中高效表达,并能特异性的被HBcAg单克隆抗体所识别。     

阿德福韦酯联合复方牛胎肝提取物治疗失代偿期肝硬化疗效观察

目的观察阿德福韦酯联合复方牛胎肝提取物治疗慢性乙型肝炎肝硬化失代偿期患者的疗效和安全性。方法选择HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性（10^3copies／ml〈HBV—DNA〈10^6copies／ml）的肝硬化失代偿期患者45例。随机分为两组,一组采用普通保肝对症治疗加用阿德福韦酯抗病毒治疗,另一组在保肝对症治疗的基础上加用阿德福韦酯联合复方牛胎肝提取物抗病毒抗纤维化治疗。结果治疗前两组各项指标差异无统计学意义,而治疗6个月后与治疗前比较,差异均有统计学意义,其中,ALT复常率、HBV—DNA转阴率（〈10^3copies／m1）治疗组分别为75．0％（1S／24）,45．8％（11／24）,对照组分别为76．1％（16／21）,42．8％（9／21）,两组差异均无统计学意义（P〉0．05）。两组血清HA、LN和PC3均下降,两组间差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗组临床症状明显改善的患者比例是87．5％（21／24）,显著高于对照组的52．4％（11／21）（P〈0．05）。未观察到明显不良反应。结论阿德福韦酯联合复方牛胎肝提取物治疗肝硬化失代偿期间患者的疗效肯定,安全性好。     

细胞间粘附分子-1在肝硬化及肝癌组织中的表达

对３０例原发性肝癌及２３例肝炎肝硬化组织细胞间粘附分子一１（ＩＣＡＭ－１）的表达进行原位检测,探讨了ＩＣＡＭ－１在肝癌发生免疫逃逸机制中的意义。１．标本收集：肝炎肝硬化标本２３例,为乙肝患者肝穿组织。原发性肝癌标本３０例,为肝穿组织及手术病理存档标本,病理诊断为肝细胞癌,本组病例ＨＢＳＡｇ均阳性,癌旁肝组织呈慢性炎症并伴有不同程度肝硬化改变。标本均进行连续切片分别用于ＨＥ染色及ＩＣＡＭ－ｌ检测。２．主要试剂及方法：ＩＣＡＭ一１单克隆抗体由美国波斯顿血液研究中心馈赠,ＬＳＡＢ试剂盒为ＤａＫｏ公司产…     

ICAM—1,HLA—ABC,HLA—DR在乙型肝炎肝细胞表达的意义

为进一步探讨ＨＬＡ－ＡＢＣ,ＨＬＡ－ＤＲ,ＩＣＡＭ－１在乙型肝炎肝细胞损伤中的作用,利用标记的链菌素亲生物蛋白（ＬＳＡＢ）法对９８例乙型肝炎肝穿组织进行ＨＬＡ－ＡＢＣ,ＨＬＡ０－ＤＲ,ＩＣＡＭ－１检测。结果显示ＨＬＡ－ＡＢＣ,ＩＣＡＭ－１在乙型肝炎肝细胞存在广泛表达,且与肝脏病变程度有关,ＨＬＡ－ＤＲ也有一定程度表达,其阳性率分别在８５．７％、８３．７％、２６．５％。阳性表达多位于肝细胞炎性病变或