抗病毒剂研究──Ⅳ．6－氨基－9－（N~4′－芳香基取代乙醛缩氨基硫脲）嘌呤衍生物的合成

合成了６个６－氨基－９－（Ｎ~４′－芳香基取代乙醛缩氨基硫脲）嘌呤衍生物，并进行了抗核型多角体病毒（ＮＰＶ）活性实验。结果显示该类化合物对ＮＰＶ的抑制活性可达６７％。     

四甲基联苯胺在ELISA和免疫斑点试验中的应用

本文以间接法ELISA检测轮状病毒特异性IgG为模型,对新底物四甲基联苯胺(TMB)与邻苯二胺(OPD)进行了比较研究,结果发现,TMB具有下列优点:①稳定性好;②敏感性高;③酶结合物和H_2O_2用量少。而且TMB又无致癌性,故是辣根过氧化酶较理想的底物。此外,还首次将TMB应用于免疫斑点试验,获得成功。     

Directed differentiation of Balb/C mouse embryonic stem cells into pancreatic islet-like cell clusters in vitro: observation by atomic force microscope]

OBJECTIVE: To observe the morphological changes of Balb/C mouse embryonic stem cells following directed differentiation into pancreatic islet-like cell clusters (PICC) in vitro using atomic force microscope (AFM). METHODS: Balb/C mouse embryonic stem cells were first cultured into embryonic bodies (EBs) and allowed to differentiate spontaneously for 4 days. The cells were then transferred to gelatin-coated dishes for the EBs to attach and spread on the tissue culture plates, in the course of which a series of cell growth factors such as basic fibroblast growth factor (bFGF), insulin-like growth factor 1 (IGF-1) and nicotinamide were added into the culture medium at specific time points to induce directed differentiation of the stem cells into PICC. Immunocytochemistry was employed to detect the cells positive for insulin and glucagon, which were observed with AFM. RESULTS: The embryonic stem cells developed into cell clusters of different sizes, in which the cells were tightly arranged. Islet B cells were numerous in the center of clusters and darkly stained, but fewer in the peripherals with lighter stains. Islet A cells expressing glucagon were relatively fewer in the cell clusters, found mainly in the peripherals. Scanning of the insulin-positive clusters by AFM revealed large quantity of tissue fibers resembling nerve fibers that formed a reticular structure in disorderly arrangement. Numerous round granules were observed in the cytoplasm of almost identical sizes ranging from 0.5 to 1.0 mum in diameter. CONCLUSION: The cell clusters obtained by directed differentiation are mature in both morphology and function with also well organized structures.     

腹腔室隔综合征的早期手术处理

目的 总结腹腔室隔综合征（abdominal compartment syndrome，ACS）的诊断和早期手术治疗经验。方法 13例ASC患者原发病为：重症急性胰隙炎（severe acute panereatitis，SAP）6例，腹部剜合性损伤内出血3例，腹部率中、肠扭转、急性胃穿孔伴腹腔严重感染及结肠癌晚期肠梗阻各1例，均以膀胱压力（urinary bladder pressure，UBP）俭测和临床特征得以确诊。其中UBP轻度升高3例，中度升高6例，重度升高4例。13例行早期剖腹、腹腔减压术、胃肠腔内减压引流术和其他综合处理措施。结果 确诊后12h内手术者7例，1例结肠癌患者术后伤口全层裂开，腹腔感染、感染性休克而残废；12～24h内手术者3例，1例SAP患者伴发席汉氏综合征术后死于成人呼吸窘迫综合征；超过24h手术者3例，2例SAP患行死于多器官功能障碍UBP中、高度升高者各死亡2例。病死率为30．8％（4／13）、结论 ACS一旦确诊，尤其是中、重度患者应早期开腹，充分减压引流，才可望改善预后。     

褪黑素对胰岛素抵抗大鼠肾皮质内皮素、内皮型一氧化氮合酶平衡的影响

目的 研究褪黑素对胰岛素抵抗(IR)大鼠肾皮质内皮素1(ET-1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响.方法 高糖饲料喂养SD大鼠6周复制IR大鼠模型.成模后用药组(MEL组)予褪黑素10mg·kg-1·d-1灌胃,用药6周.未用药IR大鼠模型为对照(IR组).免疫组化、RT-PCR方法 检测肾皮质ET-1、eNOS蛋白和mRNA表达的改变.结果 与IR组相比,褪黑素组大鼠动脉血压(ABP)、血清TG、游离脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、胰岛素(Ins)和HOMA-IR降低(P＜0.01),血清HDL-c、超氧化物歧化酶(SOD)升高(P＜0.01).HE染色MEL组大鼠肾皮质病变明显减轻.MEL组ET-1蛋白及mRNA明显低于IR组、eNOS蛋白及mRNA明显高于IR组,差别均有显著意义(P＜0.05).结论 在IR早期应用褪黑素(10mg·kg-1·d-1)治疗可以减轻IR大鼠肾皮质ET-1与eNOS平衡的异常,对肾皮质血管内皮功能具有一定保护作用.     

应用RNAi技术沉默survivin基因对肺腺癌A549细胞的影响

目的 探讨RNA干扰(RNAi)沉默survivin基因对肺腺癌A549细胞的影响.方法 应用RNAi技术,以化学合成的survivin小干扰RNA(siRNA)体外转染A549细胞,采用MTT法及流式细胞仪检测转染前后A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的变化,通过RT-PCR及Western blot分析survivin mRNA和蛋白的表达情况.结果 survivin siRNA对A549的生长抑制作用呈浓度依赖性(P＜0.05),并能引起G1期细胞比率的增加和S期细胞相应的减少,诱导一定数量的细胞凋亡,转染后36、60、84、108、132h的IC50值分别为152.4、151.2、136.0、144.0、150.4nmol/L.100～200nmol/L siRNA转染组细胞的survivin表达在蛋白及RNA水平都显著低于对照组(P＜0.01),但空白对照组与空质粒组间无明显差异(P＞0.05).结论 应用siRNA沉默survivin基因可以下调肺腺癌A549细胞survivin的表达,进而抑制细胞生长、增殖并诱导细胞凋亡.RNAi的抑制效果具有特异、高效和持久的特点.     

荧光定量PCR对伊马替尼治疗后慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因变化的检测效果研究

目的 应用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)技术检测慢性粒细胞白血病(CML)患者应用伊马替尼治疗后bcr/abl融合基因的水平,并比较RQ-PCR与荧光原位杂交(FISH)在检测CML微小残留病方面的敏感度.方法 采用RQ-PCR技术检测初诊CML患者30例,以及应用伊马替尼治疗1年、2年的CML患者各8例,观察骨髓细胞中bcr/abl融合基因转录本的表达情况,并与荧光原位杂交(FISH)结果进行比较.结果 RQ-PCR检测bcr/abl融合基因的敏感性可达到10个拷贝.初诊CML患者bcr/abl融合基因水平为68.18%±26.67%,而经伊马替尼治疗1年、2年后的水平分别为0.16%±0.15%、0.04%±0.02%,与治疗前相比,分别下降了2.82和3.36个对数级.当FISH结果为阴性时,RQ-PCR的检测结果仍为阳性.结论 RQ-PCR检测bcr/abl融合基因的敏感性比FISH更高,对于监测伊马替尼治疗过程中分子水平的变化、提示病情发展具有重要的应用价值.     

腹腔镜手术治疗子宫恶性肿瘤的应用价值

目的 研究腹腔镜下广泛全子宫切除术、盆腔淋巴结切除术治疗早期子宫恶性肿瘤的应用价值.方法 回顾性分析34例经腹腔镜和30例开腹手术治疗的临床Ⅰ～Ⅱ期子宫恶性肿瘤患者的临床资料,比较两组的手术时间、术中出血量、并发症、术后恢复情况及淋巴结切除数目等.结果 两组的手术时间、并发症发生率无显著性差异.腹腔镜组的术中出血量为247.13±127.62ml,明显少于同期开腹手术者(904.51±428.37ml,P＜0.01).腹腔镜组淋巴结切除数为23.2±5.8个,多于开腹组淋巴结切除数(16.5±3.8,P＜0.01).术后胃肠功能恢复时间,腹腔镜组为26.4±8.3h,开腹组为54.6±13.5h,两组间有显著性差异(P＜0.01).术后随访11个月两组均未见复发病例.结论 腹腔镜下广泛全子宫切除术、盆腔淋巴结切除术获得满意的效果,近期疗效肯定,远期疗效尚需进一步随访分析.     

后腹腔镜手术CO2气腹对脑氧供需平衡的影响

目的探讨后腹腔镜CO2气腹对脑氧供需平衡的影响. 方法选择后腹腔镜下肾及肾上腺肿瘤切除术20例,ASAⅠ～Ⅱ级,分别于气腹前,气腹后10、30、60 min和关气腹后30 min,抽取颈静脉球血和桡动脉血进行血气分析,比较不同时点动脉血PH(aPH )、颈静脉球PH(jvPH)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、动脉血糖(aGS)、动脉血乳酸(aLac)、颈内静脉血氧分压(PjvO2)、颈内静脉血氧饱和度(SjvO2)、颅内动静脉氧含量差(AjvDO2)、颈内静脉血二氧化碳分压(PjvCO2)、血糖(jvGS)和乳酸(jvLac)的变化. 结果与气腹前比较,气腹后各时间点aPH、jvPH显著降低(P＜0.05);PaCO2、PjvCO2气腹后各时间点与气腹前相比显著升高(P＜0.05);AjvDO2气腹后各时点与气腹前相比显著下降(P＜0.05);jvLac气腹后各时间点与气腹前相比有降低趋势,但无统计学差异(P＞0.05);aGS、 jvGS气腹前后无显著变化(P＞0.05). 结论后腹腔镜手术期间,脑血流量显著增加,未发现脑无氧代谢增加的证据.