胆固醇诱导人血管平滑肌细胞表型转化

目的观察胆固醇对人血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化的影响。方法体外培养人血管平滑肌细胞株,分别用(12.5、25.0、50.0)mg/L浓度的胆固醇作用细胞48 h;50.0 mg/L的胆固醇分别作用细胞24、48、72 h。采用实时定量PCR检测VSMC中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及平滑肌22α(SM22α)mRNA的表达;采用Western blot法检测胆固醇对VSMC中α-SMA、SM22α及单核细胞趋化蛋白-1诱导蛋白(MCPIP)表达的影响;CCK-8法检测VSMC增殖。结果 (12.5、25.0、50.0)mg/L胆固醇作用VSMC 48 h较对照组相比,α-SMA及SM22αmRNA水平及蛋白水平表达均降低(P0.05),50.0 mg/L胆固醇作用后表达水平最低,存在剂量依赖效应;用50.0 mg/L胆固醇分别作用VSMC 48、72 h后,α-SMA及SM22αmRNA及蛋白表达与对照组相比均降低(P0.05)。与对照组相比,胆固醇作用均明显促进VSMC增殖(P0.05)。50.0 mg/L胆固醇作用VSMC48 h可诱导MCPIP蛋白表达增加。结论胆固醇作用VSMC后可降低收缩型标志蛋白α-SMA及SM22α的表达、促进VSMC增殖,提示胆固醇可诱导VSMC表型转化。     

同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞MCPIP表达

目的 探讨同型半胱氨酸是否可以诱导人脐静脉内皮细胞中MCPIP的表达.方法 体外培养并鉴定人脐静脉内皮细胞;分别用10、50、100、200、500 μmol/L Hcy与HUVECs孵育24 h;用100 μmol/L Hcy与HUVECs分别孵育1、2、4、8、12、24 h;Real-time PCR检测MCPIP mRNA的表达,Western blot检测MCPIP蛋白质的表达.结果 Real-time PCR和Western blot分析结果表明,在所设置浓度下,Hcy均可诱导HUVECs中MCPIP的表达（P＜0.05）,其中以100 μmol/L Hcy作用24 h时MCPIP表达量最多;100 μmol/l Hcy与细胞作用2h时后MCPIP表达与对照组相比即有明显增高（P＜0.05）,并存在时间依赖效应.结论 Hcy可诱导HUVECs中MCPIP的表达,这可能与它致As的机理有关.     

重组人r-型干扰素包涵体的制备

本工作研究了人重组r－型干扰素包涵体的制备条件。用多次超声，差速离心等方法使包涵体与破碎的细胞结构和可溶性蛋白分离，使IFN－r占包涵体总蛋白的90％。通过用变性剂和透析等手段，使包涵体溶解，以利于IFN－r的进一步纯化。     

金属硫蛋白与镉中毒

1957年Margoshes和Valee首次报道从马肾皮质中发现并分离到一种Cd、Zn结合蛋白。以后的作者确定该蛋白分子量很低(6,000～10,000Dt),具水溶性,能结合Cd、Zn、Cu等金属并有特别高的半胱氨酸含量。根据这些特征,Kagi和Vallee把该蛋白命名为金属硫蛋白(Metailothionein,MT)。许多学者相继从猴、兔、羊、鼠等动物以及植物和微生物中分离出MT。Palido等发现人体中也有MT存在,从人肾分离的该蛋白中含有Cd和Hg等金属。     

贵州果柚汁对辛伐他汀调脂作用的影响及机理初探

目的：研究贵州产果柚汁对辛伐他汀调脂作用的影响及其机理。方法：将Wistar大鼠随机分为五组。除对照组外，其余各组均饲喂高脂饮食，各实验组按5ms／kg辛伐他汀灌胃，并加用不同剂量的果柚汁。实验8周后，检测各组大鼠血脂水平，采用RT—PCR的方法测定肝脏及小肠药物代谢酶CYP3A基因的表达水平。结果：果柚汁能增强辛伐他汀降低血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)，升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)，抑制小肠CYP3A基因表达的作用。结论：贵州遵义产果柚汁对辛伐他汀的调脂作用具有协同效应，其机理可能与果柚汁抑制了CYP3A基因表达有关。     

医学生物化学教学的几点体会

生物化学是高等医学院校一门重要的医学基础课,其发展速度快,知识信息广,授课难度较大,也是学生普遍反应,难学好的一门课程[1].它主要研究生物体分子结构与功能,物质代谢与调节,以及遗传信息传递的分子基础与调控规律,从分子水平探讨生命现象的本质[2].同时,它又是生命科学中进展迅速的基础学科,其理论和技术渗透至基础医学与临床医学的各个领域[2].校园中就流传着"生化生化,深而难化"的俗语.如何在有限的学时里让学生掌握足够深度和广度的生化知识,提高学生对这门课程的兴趣及认知水平,是需要我们生化教师仔细总结和探讨的.为此,笔者就教学中的一些体会进行了讨论,恳请同行指正.     

正安野木瓜丙酮粗提物水溶液治疗烧伤感染创面实验研究

目的：观察野木瓜丙酮粗提物水溶液对大鼠浅Ⅱ度烧伤感染创面的治疗作用。方法：取24只大鼠,在其背部建立浅Ⅱ度烧伤创面感染模型,随机分成生理盐水组、野木瓜组、美宝组。对大鼠进行皮肤刺激实验和治疗实验,通过检测创面面积变化、愈合率、脱痂率、完全脱痂时间,观察野木瓜丙酮粗提物水溶液（100 mg/mL）对烧伤感染创面的影响。结果：三组连续给药后,野木瓜组与生理盐水组、美宝组比较,创面红肿消退快、结痂快、渗出液少、完全脱痂时间短。结论：野木瓜丙酮粗提物水溶液（100 mg/mL）对大鼠烧伤感染有治疗作用。     

一种改进的人脐静脉平滑肌细胞培养方法

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle,VSMC)在心血管疾病的发生中占有重要的地位.采用培养的VSMC进行相关机制研究是一种普遍应用的实验方法.由于人体组织取材限制,很难获取大量原代培养的人VSMC.本室以健康胎儿脐静脉血管为材料,建立起一套完整的人脐静脉平滑肌细胞(human umbilical vein smooth muscle cells,hUVSMC)培养方法,具有周期短,细胞长出率高,可大规模培养等特点.