TaqMan-实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌

[目的]建立TaqMan-实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌(Vibrio parahemolyticus,VP)的方法,用于食物中毒快速诊断和食品中VP的污染状况调查。[方法]根据GenBank公布的VP tdh基因序列,设计引物和探针,建立TaqMan-实时荧光PCR快速检测体系,应用于食品中VP检测。[结果]TaqMan-实时荧光PCR快速检测体系灵敏度为1.3×104cfu/ml(33 cfu/PCR反应体系),特异性好,无交叉反应。[结论]TaqMan-实时荧光PCR检测体系灵敏度高,特异性强,能提高VP的检出率和准确性,可应用于VP食品污染状况调查和食物中毒的快速诊断。     

沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR快速检测体系的初步探讨

目的建立能在12小时内同时快速检测沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系。方法碱性蛋白胨水(BPW)非选择性增菌6h;100℃10min制备DNA模板;根据大肠杆菌O157∶H7的uidA基因、志贺菌的ipaH基因及沙门菌的invA基因序列设计各菌引物,进行PCR扩增及电泳检测。同时优化反应体系,测定体系灵敏度和特异性。结果该多重PCR体系能在12h内同时检测3种目的菌;灵敏度为10～30cfuml;通过对23株目的菌和15株非目的菌检测,提示该体系特异性高。结论初步探讨出能在12h内快速、灵敏、特异地同时测定沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157∶H7的多重PCR体系。     

成都地区376例尘肺住院患者呼吸道感染病原谱研究

  目的  了解尘肺患者呼吸道病原体感染情况,季节、年龄和不同尘肺分期的病原体感染规律,探究尘肺患者呼吸道感染病原谱。  方法  采集2017年1月?2019年10月成都市某职业病医院376例尘肺住院患者痰液并收集患者临床信息,检测痰液中23种常见病毒、细菌及真菌,分析季节、年龄和不同尘肺分期与病原体检出率间的关系。  结果  376份痰液标本中病原体检出率为42.29%（159/376）,病毒检出率为32.98%（124/376）,细菌检出率为9.57%（36/376）,真菌检出率为6.12%（23/376）。检出率最高的6种病原体依次为副流感病毒、鼻病毒、流感病毒、白色念珠菌、肺炎克雷伯菌和克柔念珠菌。不同季节、年龄和尘肺分期与呼吸道感染严重程度的差异无统计学意义。  结论  成都地区尘肺患者呼吸道感染病原谱复杂,病毒感染占比高,但感染严重程度与年龄、季节、尘肺分期无关。