CD133与胃癌细胞化疗耐药的关系及其机制

目的探讨CDl33阳性胃癌起始细胞对常规化疗药物氟尿嘧啶（5．FU）的敏感性及其耐药机制。方法免疫磁珠法分选KATO—III、SGC7901和MKN-45胃癌细胞株并分为未分选组、CDl33＋组及CDl33一组。Westernblot法和RT—PCR法分别检测分选后胃癌细胞CDl33、P—gP、Bax和Bcl-2蛋白及mRNA表达水平。免疫荧光法检测各组细胞P-gP及Bcl-2蛋白的表达。CCK-8法和Hoechest染色检测各组细胞对5．FU的敏感性。siRNA干扰MKN45细胞CDl33表达后，检测CDl33、P-gP、Bcl-2、Akt及p-Akt蛋白及mRNA表达。结果CDl33＋组胃癌细胞中CDl33、P—gP及Bcl-2蛋白和mRNA表达水平均显著高于未分选组及CDl33-组（均P〈0．05），而促凋亡因子Bax的表达水平则明显降低（P〈0．05）。在相同药物浓度下，5-Fu对CDl33＋组的抑制率显著低于CDl33一组（P〈0．05）。5-FU处理胃癌细胞后，CDl33＋组胃癌细胞中凋亡细胞比率明显低于CDl33-组及未分选组（P〈0．05）。CDl33特异siRNA干扰胃癌细胞后，干扰组P—gP、Bcl-2和p-Akt蛋白及mRNA表达显著降低（均P〈0．05），而Bax表达水平则显著增加（P〈0．05）。结论CDl33可能通过调节P-gp和Bcl-2的表达来促进胃癌的化疗耐药；在胃癌化疗耐药产生中，CDl33＋细胞可通过P13K／Akt通路起作用。     

胃癌KATO-Ⅲ细胞CD133基因的siRNA干扰及其效果比较

目的 比较3段化学合成的siRNA对KATO-Ⅲ胃癌细胞中CD133基因的抑制效果,并初步探讨CD133基因表达被抑制后对胃癌细胞增生的影响.方法 实验分为空白对照组、阴性对照组、CD133siRNA-1组,CD133siRNA-2组和CD133siRNA-3组.针对CD133mRNA序列设计并合成3段siRNA,利用荧光标记的siRNA转染KATO-Ⅲ胃癌细胞后,通过共聚焦显微镜荧光计数检测其转染率,用RT-PCR法和Western blot法检测并比较3段siRNA对CD133基因表达的沉默效果,采用CCK-8法检测CD133表达被抑制后对胃癌细胞增生的影响.结果 siRNA在KATO-Ⅲ细胞中的转染效率可达到(85±8)％,所设计的3段siRNA均可显著抑制胃癌KATO-Ⅲ细胞CD133基因的表达,抑制率分别为(11±2)％、(19±2)％和(24±3)％.与空白组比较,CD133siRNA-3转染组细胞的增生活性降低了(42±4)％(P＜0.05).结论 成功转染并抑制了KATO-Ⅲ胃癌细胞中CD133基因的表达,并从中筛选出了干扰效果最佳的CD133siRNA片段,为后续CD133+胃癌细胞的干扰提供初步的实验研究.     

支气管肺发育不良相关性肺动脉高压研究进展

支气管肺发育不良（BPD）是早产儿常见的慢性呼吸系统疾病,严重影响早产儿的存活率及生存质量。肺动脉高压是包括BPD在内的早产儿慢性呼吸系统疾病的常见并发症。研究显示,并发肺动脉高压的BPD患儿的死亡率为14%～38%。尽管BPD相关性肺动脉高压的检查方法众多,但超声心动图检查仍然是主要评估手段。BPD相关性肺动脉高压的发病机制与预防措施仍未完全阐明,深入研究BPD相关性肺动脉高压有利于降低BPD死亡率和改善患儿预后。本文综述了BPD相关性肺动脉高压的高危因素、发病机制、诊断标准、筛查方法及防治措施。     

实在是无话可说

买房子了,在澳洲。位置是悉尼的卫星城,差20多平米就直达600平米了,价钱是30多万澳币,合人民币200多万元。人逢好事精神爽,还未入住新居我就一连几日都爽得睡不了一个踏实觉。不是因得意,而是因     

肺透明膜病早产儿尸检肺组织肺表面活性蛋白-C及Ki67的表达

Objective To determine the expression of surfactant protein-c (SP-C) and Ki67 in autopsy lung tissues of premature infants died of hyaline membrane disease (HMD) who were exposed to mechanical ventilation and high oxygen concentrations/pulmonary surfactant (PS). The possible influence of surfactant on the expression of SP-C and Ki67 was also investigated. Methods Thirty preterm infants diagnosed as HMD by clinical data and pathology were selected. Mechanical ventilation and supplemental oxygen (FiO2 0.6-1.0) were given to these infants within 6 hours after birth. According to the duration of ventilation at high oxygen concentrations, all subjects were diveded into four groups: ventilation for 1-3 days, 4-8 days, 9-16 days and >16 days. Five premature infants died within 1 day after delivery for none pulmonary reasons served as controls. The expression of SP-C and Ki67 in lungs were detected by immunobistochemistry. Results The pulmonary pathology in these HMD infants at different phases was consisitent with the main features of different stages during the progress from HMD towards bronchopulmonary dysplasia. The positive staining of SP-C was restricted to type Ⅱ alveolar epithelial cells, and Ki67 positive were preferentially localized in nuclei of alveolar and bronchiolar epithelial cells and fihroblasts. Compared with the control group, the expression of SP-C and Ki67 in HMD infants decreased significantly after 1-3 days of ventialation, but increased after 4 days and reached the peak value after 9-16 days. The expression of SP-C and Ki67 in control group, 1-3 days and 9-16 days of ventialation were 0. 1891±0. 0253, 0. 1576±0. 0327 and 0. 2271±0. 0238 for SP-C and 0. 2297±0. 0380, 0.1929±0. 0403 and 0. 2849±0. 0368 for Ki67, respectively. No significant difference in the expression of SP-C and Ki67 was found between infants treated with PS and those without (P>0.05). Conclusions SP-C and Ki67 may have participated in the pulmonary pathological process in ventilated/oxygen treated preterm infants with HMD, and exogenous surfactant had no effect on the expression of SP-C and Ki67.     

高氧对胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Notch受体的影响

目的 检测Notch 1在肺泡Ⅱ型上皮细胞(ACEⅡ)与肺成纤维细胞共培养的高氧损伤模型中表达的变化,初步探讨Notch信号在高氧肺损伤中的作用,为临床防治新生儿急、慢性肺损伤提供理论的依据.方法 Spragne Dawkey雌鼠12只,体质量200～220 g,雄鼠3只,220～250 g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供.将共培养的AEC Ⅱ随机分为高氧组和对照组.高氧组按3L/nlin通入950 ml/L O2和250 ml/L CO2,10 min后,立即用封口胶密封培养板,置于37℃、50 ml/L CO2培养箱.于给氧后24、48、72、96 h,收获各组细胞,测氧仪检测培养瓶中的O2体积分数,将低于900mi/L O2的标本弃去.免疫组织化学法鉴定细胞,台盼蓝拒染实验计算细胞纯度,确认共培养造模成功.每24 h更换培养基并给氧.每一时间点同时设对照组,置于37℃、50 ml/L CO2培养箱中培养.NTT法检测AECⅡ增殖活力,绘制生长曲线;免疫组织化学法定位Notch1蛋白;荧光定量PCR检测noteh1 mRNA;流式细胞术双标记法检测AEC Ⅱ、AEC I细胞百分率.结果 免疫组织化学法显示高氧组Notch1活化人核受抑;高氧组各时间点Notch1 mRNA分别下降为对照组的0.43、0.29、0.11、0.03倍(置信限95%),通氧后AECⅡ百分率显著降低[24 h高氧组vs.对照组:(68.92±6.88)%vs.(90.35±4.01)%,P=0.006;48 h高氧组vs.对照组:(38.03±3.27)%、vs.(61.47±4.81)%,P=0.000;72 h高氧组vs.对照组:(20.13±4.45)%vs.(52.05±3.35)%,P=0.000;96 h高氧组vs.对照组:(8.17±1.99)%vs.(52.59±2.93)%,P:0.000].AEC I百分率除96 h外均增高[24 h高氧组vs.对照组:(0.1l±0.03)%vs.(0.01±0.01)%,P=0.006;48 h高氧组vs.对照组:(49.73±3.45)%vs.(16.13±2.13)%,P=0.000;72 h高氧组vs.对照组:(52.43±3.14)%vs.(5.98±0.95)%,P=0.000;96 h高氧组vs.对照组:(19.85±3.26)%vs.(29.03±3.16)%,P=0.0007].结论 高氧可抑制AECⅡNotch1受体的活化,引起AECⅡ增殖减弱,转分化异常.研究如何调控Notch信号通路将为修复肺泡上皮,恢复其正常生理功能打开新思路.     

红霉素对高氧暴露早产鼠肺组织谷胱甘肽与γ-GCS表达的影响

目的观察红霉素对高氧暴露下早产新生大鼠肺组织中的谷胱甘肽(GSH)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)表达的影响,探讨红霉素对高氧肺损伤的干预作用。方法将孕第21天剖宫产生后1 d的新生SD大鼠随机分为4组:对照组、红霉素组、高氧组、红霉素高氧组。高氧组和红霉素高氧组持续暴露于常压氧舱中,对照组和红霉素组置于同一室常压空气中;红霉素组和红霉素高氧组每天尾静脉注射红霉素,高氧组和对照组注射生理盐水。四组分别于高氧暴露后第1、7、14天取肺组织标本,石蜡包埋切片行苏木精-伊红染色观察肺组织病理学变化,双抗体夹心酶联免疫吸附法分析GSH和γ-GCS的蛋白水平,半定量逆转录聚合酶链反应测定γ-GCS mRNA表达。结果高氧暴露后第1和7天,对照组、红霉素组、高氧组、红霉素高氧组四组间大鼠肺组织GSH、γ-GCS及γ-GCS mRNA表达的差异均有统计学意义(P0.05)。其中,高氧组和红霉素高氧组的GSH、γ-GCS表达以及红霉素高氧组的γ-GCS mRNA表达均高于对照组和红霉素组,差异有统计学意义(P均0.05)。第14天,四组间大鼠肺组织GSH、γ-GCS表达的差异无统计学意义(P均0.05),而红霉素高氧组γ-GCS mRNA表达高于其余三组,差异有统计学意义(P0.05)。结论氧化爆发能导致GSH与γ-GCS的表达异常。红霉素可能通过上调γ-GCS活性,提高GSH抗氧化,在减轻高氧肺损伤过程中发挥一定抗氧化作用。     

高氧下调早产大鼠肺组织AQP5的表达

目的探讨水通道蛋白5(AQP5)在早产大鼠及吸高氧过程中的肺动态表达。方法剖宫术取出孕21d SD早产鼠,于12～24h内随机分为对照组和高氧组。分别在1、4、7、10和14d时提取肺组织,RT-PCR测定AQP5 mRNA表达,免疫组化和Western blot检测AQP5蛋白的表达。结果早产大鼠生后肺组织AQP5表达不断增强,其阳性染色主要定位于Ⅰ型肺泡上皮细胞。高氧暴露1d时,仅肺组织AQP5 mRNA表达显著高于对照组(P<0·05),而高氧暴露4、7、10及14d时,其mRNA及蛋白表达均明显减少(P<0·05或P<0·01)。结论AQP5通过调节肺水平衡,在早产大鼠肺泡化形成的关键时期发挥重要作用;高氧暴露导致AQP5表达下调是促使肺损伤发生、发展的重要因素。     

民办与普通高校大学生罗夏墨迹测验自我概念变量研究

目的：探讨普通高校和民办高校大学生的自我概念.方法：采用罗夏测验和田纳西自我概念量表对61名普通高校和民办高校的大学生的自我概念进行测试.结果：（1） 罗夏测验自我概念变量具有较好的信度,11个与自我概念有关的变量总的α系数为0.723;（2）普通高校纯粹人类内容反应与其他人类内容反应的比值低于民办高校（1.1±1.1/1.4±1.2,Z ＝-0.919,P＝0.358）,其他变量的得分均高于民办高校,如映像反应（1.1±1.1/0.5±1.2, Z ＝-2.849,P＝0.004）、形状-维度反应（1.9±1.6/1.0±1.1, Z ＝-2.459,P＝0.014;1.1±1.1/0.6±0.9, Z ＝-2.204,P＝0.028）、病理内容（4.2±2.9/2.4±2.4, Z ＝-2.888,P＝0.004）、人类内容反应（5.1±3.3/2.7±2.5, Z ＝-3.037,P＝0.002）、人类体验（1.8±2.2/0.7±1.1, Z ＝-2.776,P＝0.006）等;（3）对罗夏测验自我概念变量进行因素分析,得到内省、积极关注、现实感和消极关注四个因子,方差累积贡献率为67.82%.结论：罗夏测验自我概念变量比较敏感,能够避开参与者的认知审查,可以对自我概念进行较好的测量.     

生命中的三种人

我曾向一位从事哲学研究的中山大学老教授提了个很俗气的问题:"何为幸福之道?"老人没直接回答我,却说了这样的话:"每个人的生命过程中,都将遇到三种人:一种是无怨无悔不求回报地关心你,爱护你,帮助你的人;一种是伤害你,欺骗你,利用你的人;一种是既不曾伤害你,欺骗你,但也不曾予你以关怀与无私帮助的人."