实时荧光定量PCR快速检测对虾IHHNV载量方法的建立和应用

目的:建立一种快速、定量、特异、灵敏的PCR方法用于对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的早期诊断和疫情监测。方法:根据GenBank登录的IHHNV毒株序列,使用生物学软件进行序列比对,在IHHNV保守区序列设计特异性引物与Taqm an探针。对实时荧光定量PCR反应条件进行优化以缩短检测时间,提高特异性、灵敏度、重复性,并与普通PCR进行盲样测试的比对。结果:本法线性范围5×102~5×107拷贝/ml,检出限5×101拷贝/ml,灵敏度超过普通PCR100倍,特异性高于普通PCR,重复性极好(S=0.035~0.39,CV=0.13%~1.05%),检测时间为普通PCR的1/5,现场盲样IHHNV检出阳性率高于普通PCR 26.00%。结论:本研究建立Taqm an实时荧光定量PCR用于对虾IH-HNV检测具有特异、灵敏、快速、定量、重复性好等优点。     

舟山群岛各县区新布尼亚病毒基因同源性分析

目的 了解舟山群岛各县区流行的新布尼亚病毒的基因同源性.方法 采集舟山群岛不同县区5例发热伴血小板减少综合征(SFTS)重症或死亡患者的急性期血清,用Vero细胞分离培养毒株,采用RT-PCR扩增所获毒株L、M、S特异性基因节段,使用DNA Star和MEGA5.2软件进行同源性分析并构建系统进化树.结果 5株发热伴血小板综合征病毒(SFTSV)的L、M、S基因序列可分成3个进化分支.第一分支毒株全基因序列与韩国JP系列毒株及日本SPL004A有较高同源性,核苷酸相似度在97.8％;第二分支与临近内陆地区部分毒株和日本的部分毒株序列(SPL057A)均有高度同源性,核苷酸相似度均在98.8％～99.9％;第三分支毒株与来源于江苏(JS2007-1等)、辽宁(LN3/2010)、河南(WCH-97/2011)、安徽(AH15/2010)、河南淮阳山(2010-FQM)、湖北(HB2014-20)有较高同源性,核苷酸相似度在97.8％～98.5％.结论 舟山群岛内流行的SFTSV同源性不一,存在韩国-舟山、中国其他地区-舟山传播路径可能性.     

舟山孕貂流产与乙脑病毒感染关系的探讨

<正> 曾有报告认为,舟山怀孕水貂流产率高,与乙脑病毒感染有密切关系。最近我们通过对舟山母貂的生态学、乙脑流行病学及实验室诊断的调查,对这一问题作了初步探讨,现报告如下。 一、水貂的生态学 水貂是珍贵毛皮动物,属食肉目、鼬科、鼬属。其性凶猛、孤僻,原生活于东北,50年代末施行北貂南养成功后,已在本市普遍饲养。本地水貂的繁殖情况是2月发情,3月配种,4月怀孕,5月产仔,6月育仔,7月断乳,8、9月育成,10、11月毛皮成熟,12月取皮。舟山流产母貂占受孕母貂的11.5％,仔貂群平均成活率仅为1.7只。     

胶体金法在人类免疫缺陷病毒抗体检测中的假阴性现象与解决办法

按人类免疫缺陷病毒 (HIV)抗体检测规范 ,初筛中心实验室对初筛阳性血清的复测需用两种不同原理或不同厂家的试剂。在日常复检工作中我们发现 ,ELISA高吸光度 (A)值的阳性血清用胶体金法复测时经常会发生很难判断的弱阳性和少数阴性 ,该现象应引起有关实验室的重视。以下我们用 5份ELISA检测A值 >2 0的强阳性血清作对照 ,并提出解决办法 ,以供参考。材料与方法 :(1) 5份HIV抗体阳性血清均经浙江省HIV抗体确认实验室确认 ,A值均在 2 0以上 ;(2 )ELISA双抗原夹心法试剂盒由法国梅里埃公司生产 ,批号A4 4HC ;(3)胶体金检测试剂由…     

褥疮膏疗效观察80例

笔者自拟褥疮膏治疗褥疮患者,效果满意。现将资料完整的80例小结如下。临床资料 80例患者中,男61例,女19例;60岁以上55例,50～59岁17例,50岁以下8例。病程最长68天,最短26天。初期病变,局部红肿,皮肤     

白斑综合症病毒对三疣梭子蟹感染的定量研究

目的：三疣梭子蟹体内白斑综合症病毒含量与其发病、死亡的相关性。方法：实时荧光定量PCR测定试验蟹体内各器官中WSSV含量，病理切片观察濒死蟹各器官组织病理改变。结果：濒死或死亡的三疣梭子蟹体内病毒含量均〉10^9拷贝／ml，腮、肝胰腺、心脏均有明显的病理变化。对照组蟹均健康存活，体内未检出WSSV，也未见病理变化。结论：实验结果显示，WSSV可以感染三疣梭子蟹，受染蟹体内病毒含量与其发病或死亡关系密切。     

一起水貂乙型脑炎暴发流行情况调查

<正> 木地某貂场曾发生一次水貂流行性乙型脑炎(乙脑)暴发流行,现将情况报告如下。 一、流行病学调查:1986年7月4日开始出现病貂,至7月9日病貂数达60只,占全场新貂的6.7％。7月中旬病貂数剧增,以后波及全场所有新貂,直至8月上旬才基本终止。这期间共死亡9只新貂,死亡率为全场新貂的1％。