山东省首例人禽流感病例的诊断过程分析

目的对2009年1月15日山东省济南市发生的1例人禽流感病例进行实验室诊断过程分析,探讨实验检测过程中遇到的问题。方法采集病人咽拭子和呼吸道吸取物标本,利用RT-PCR和real-time RT-PCR检测病毒核酸。结果第2次采集的咽拭子标本采用H5HA引物的RT-PCR扩增呈阳性;呼吸道吸取物分别用H5NA等3对引物进行RT-PCR均阳性,real-time RT-PCR阳性。结论该患者为人感染高致病性禽流感病毒（H5N1）实验室确诊病例。呼吸道吸取物是禽流感病毒核酸检测的合适标本。     

2013-2016年山东省食品中单核细胞增生李斯特菌的血清型、耐药性及分子分型分析

  目的   了解分离于2013-2016年山东省食品中单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)的主要血清型、耐药谱和分子分型特点。   方法   采用微量肉汤稀释法测定LM抗生素敏感性, 使用玻片凝集法和PCR方法确定其血清型, 利用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis, PFGE)和多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)进行分子分型。   结果   191株LM对8种抗生素总体基本敏感, 四环素耐药率最高(15/191, 7.85%), 8种抗生素耐药性连续监测4年无差异(P=1.000);血清型1/2a占38.82%(66/170), 1/2b占18.82%(32/170), 1/2c占42.36%(72/170); SDSRZXDZ016、S2014L031和SDSRZX030带型共占33.78%, 呈明显聚集性, 为优势带型; 优势ST型为ST9、ST8和ST121, 占81.18%(69/85), 临床常见ST3, ST7和ST87占8.23%(7/85), 未发现新ST型。   结论   2013-2016年分离于山东省的食源性LM菌株对所测定的大多数抗生素敏感, 但已经发现耐四环素和红霉素菌株; 优势血清型为1/2c和1/2a, 未发现易引起李斯特菌病暴发的4b血清型; SDSRZXDZ016、S2014L031和SDSRZX030为山东省2013-2016年PFGE优势带型; 主要ST型为ST8、ST9和ST121, 临床常见的ST3、ST7和ST87型均从食品中分离到, 应予以重视。     

农村井水中耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌及耐药基因分子流行病学特征

目的 分析农村井水中耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌（PA）及耐药基因的分子流行病学特征。方法 依据《饮用天然矿泉水检验方法》（GB 8538-2016）对山东省巨野县农村井水采集112份水样进行检测,并对检出的PA分别进行PFGE分型和药物敏感性试验。PCR鉴定碳青霉烯类耐药基因后,采用S1-PFGE和Southern杂交确定耐药基因的位置,并用结合实验判断基因的可转移性。结果 农村井水中PA检出率为54.46％（61/112）。61株菌分为56个PFGE型,100.00%一致带型最多的有2株菌,无明显的优势带型。药敏实验结果显示,多重耐药菌占93.44％（57/61）,2株菌携带bla_VIM-2耐药基因,均位于质粒上,且均可随质粒发生水平转移。结论 农村井水中检出耐碳青霉烯类PA及其耐药基因,此类耐药基因存在水平传播的可能性。     

山东省2011-2014年志贺氏菌分子分型及耐药性分析

  目的  通过对山东省2011-2014年分离的志贺氏菌（Shigella）进行血清、毒力基因、分子分型和药敏等分析,了解山东省志贺氏菌的特性及流行趋势。  方法  用玻片凝集法进行血清分型,PCR方法扩增相关毒力基因,用脉冲场凝胶电泳技术进行分子分型,采用微量肉汤稀释法测定菌株抗生素敏感性。  结果  44株志贺氏菌主要为福氏志贺氏菌（Shigella flexneri）（54.55%）和宋内志贺氏菌（Shigella sonnei）（43.18%）。ipaH、set1、sen、ial毒力基因携带率分别为100%、43.18%、56.82%、50.00%。经脉冲场凝胶电泳分型（pulsed field gel electrophoresis,PFGE）,福氏志贺氏菌被分为18种带型,且总体相似度偏低;宋内志贺氏菌被分为14种带型,且89.47%的菌株相似度在90%以上。44株志贺氏菌对15种抗生素中的14种均存在不同程度的耐药。93.18%的菌株为多重耐药菌株。  结论  山东省志贺氏菌以福氏和宋内血清群为主,毒力基因携带率高,有聚类分布出现,耐药严重,应加强对志贺氏菌菌型、溯源和耐药性的监测。     

乳腺癌MDA-231细胞中IL-8与表皮生长因子受体信号通路的关系

目的 探讨IL-8对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响以及IL-8信号通路与表皮生长因子受体(EGFR)信号通路之间的关系.方法 采用ELISA方法检测乳腺癌MDA-231细胞IL-8的分泌及rhEGF、anti-EGFR对IL-8分泌的影响;免疫细胞化学方法检测其膜受体CXCR1和CXCR2的表达;MTT和matrigel invasion(基质凝胶侵袭)方法分析rhIL-8及anti-IL-8对癌细胞增殖和侵袭的影响;Western blot分析rhlL-8及anti-IL-8对EGFR活化的影响.结果 乳腺癌细胞可分泌大量IL-8,其细胞膜表面表达CXCR1和CXCR2两种受体.rhlL-8及其中和抗体对乳腺癌细胞的增殖无明显影响,但可影响其侵袭能力:rhIL-8可提高癌细胞的侵袭活性(P＜0.05),其中和抗体则对癌细胞的侵袭有抑制作用(P＜0.05).rhEGF及anti-EGFR均明显抑制了MDA-231细胞IL-8的分泌(P＜0.05,P＜0.01);未发现rhIL-8对EGFR的酪氨酸磷酸化有任何影响,相反anti-IL-8却诱导了EGFR活化.结论 IL-8不是乳腺癌自分泌的促细胞生长因子,IL-8主要通过促进癌细胞的侵袭而影响肿瘤的发展.乳腺癌中G蛋白耦联受体(GPCR)介导的IL-8信号通路与EGFR信号通路之间并无cross-talk,而是竞争抑制的关系.     

HCMV蛋白酶抑制剂的研究(Ⅱ)杂环类抑制剂的设计与合成

目的 人巨细胞病毒（HCMV）是一种普遍存在的机会病原体。HCMV蛋白酶在装配蛋白产生和病毒壳体成熟中具有重要作用，抑制基作用可产生抗疱疹病毒药物。对杂环类HCMV蛋白酶抑制剂进行研究。方法 根据HCMV蛋白酶和拟肽类抑制剂复合物的晶体结构数据，借助计算机辅助药物设计手段，运用Docking(分子对接）技术，从MDDR库中筛选挑出35个预计可能与HCMV蛋白酶相互较好结合的杂环化合物。首先选择目标物2-（香豆素-3-基）-5-氟-4H-3,1-苯并恶嗪-4-酮（I）和3-（2-羟基-4-甲基-苯甲酰基）-2-（4-甲氧基-苯基）-2，3-二氢-异吲哚-1-酮（Ⅱ）为合成和检验对象。结果 设计并完成了目标物I和Ⅱ的合成路线。结论 所得产物的结构经MS，IR，^1H-NMR及元素分析确证与目标物I和Ⅱ相符。     

成人呼吸窘迫综合征趋化灭活因子机能缺失

成人呼吸窘迫综合征(ARDS)是由于肺内中性白细胞积聚所致的肺功能紊乱。中性白细胞聚集的机制与补体系统相关,当补体系统激活时,补体C_(5a)形成,趋化吸引中性白细胞。但此趋化作用可被趋化灭活因子(CFI)降低.而ARDS 肺内,CFI 机能缺失致使C_(5a)活性增高,中性白细胞增多.这些细胞聚集在肺内,通过释放毒性氧化代谢物和蛋白酶,引发和维持肺水肿,形成以低氧血症为特征的肺功能紊乱.     

CT、MRI及MR脑脊液电影对脑室型囊虫病诊断价值的探讨

目的：探讨ＣＴ、ＭＲＩ与ＭＲ脑脊液电影在脑室型囊虫病诊断中的价值。材料与方法：回顾性研究自１９８５－０８～１９９５－１２经手术、组织病理学证实的２６例脑室型囊虫病例的ＣＴ、ＭＲＩ及ＭＲ脑脊液电影资料。比较三种检查方法在脑室型囊虫病诊断上的可靠程度。结果：ＭＲＩ与ＭＲ电影在组织分辨力、安全性、无创性以及诊断可靠性上明显优于ＣＴ扫描。在无ＭＲ检查设备的地区，脑室造影后ＣＴ扫描是可靠的诊断方法。结论：了解和掌握脑室型囊虫病的ＣＴ、ＭＲＩ及ＭＲ脑脊液电影特征将有助于作出正确、全面的诊断。对高度怀疑脑室内囊虫病的患者，ＭＲ脑脊液电影应作为首选诊断方法。