运动神经元生存蛋白多克隆抗体的制备及该蛋白在脊髓性肌萎缩症患者骨骼肌中的表达

目的制备运动神经元生存（SMN）蛋白多克隆抗体，探讨SMN蛋白在细胞内的定位及在脊髓性肌萎缩症（SMA）患者骨骼肌中的表达情况。方法构建pET-28a（＋）／SMN原核表达质粒，诱导表达SMN-His融合蛋白，免疫新西兰大白兔制备SMN多克隆抗体。构建pcDNA3．1／myc-HisB-SMN真核表达质粒并转染中国仓鼠卵母（CHO）细胞。收集骨折患者以及I、Ⅱ、Ⅲ型SMA患者的骨骼肌组织各3份。分别采用免疫印迹及免疫荧光染色技术进行CHO细胞及骨骼肌组织的SMN蛋白表达研究。结果成功制备了兔抗人全长SMN多克隆抗体，经鉴定其特异性及敏感性均较高。免疫荧光染色显示SMN蛋白在细胞质及细胞核中呈斑片状或颗粒状分布，以核周较为明显。免疫印迹结果显示骨折患者骨骼肌组织SMN与内参照磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）条带密度比值（SMN／GAPDH）平均为0．619，Ⅲ、Ⅱ型SMA患者SMN／GAPDH比值较低，均值分别为0．347和0．340，而Ⅰ型SMA患者骨骼肌中SMN／GAPDH比值显著降低，均值仅为0．079。结论高质量的兔抗人全长SMN多克隆抗体的制备为SMA的蛋白功能及发病机制研究奠定了基础，SMA患者骨骼肌中SMN蛋白表达量可能与疾病的严重程度相关。     

Kennedy病患者的临床特点分析（附7例报道）

目的：对Kennedy病（KD）的临床特点进行分析。方法：收集7例KD患者的临床资料，分析其临床与实验室辅助检查结果的特点及雄激素受体（AR）基因外显子1编码的CAG三核苷酸重复序列的检测结果。结果：KD患者均于中青年发病，进展缓慢。临床主要表现为肢体和球部的下运动神经元性瘫痪。面肌颤搐及上肢震颤常见，不对称的肢体无力及远端损害并不罕见，患者性激素水平正常，但部分患者可出现男性乳腺发育等轻度雄激素不敏感症状。患者的血清肌酸激酶水平普遍增高，部分患者三酰甘油水平轻度增高，肌电图呈广泛的慢性神经源性损害，有感觉神经元及脑神经运动核的受累。AR基因外显子1中CAG重复序列个数〉40次。结论：KD的临床表现与以往文献报道基本一致，但也有诸如不对称的肢体无力及肢体远端起病等不典型表现。     

肌营养不良分子遗传学研究现状和对策

肌营养不良是一组临床表型多样、基因分型复杂的遗传病,是神经分子遗传学研究的热点与难点.不同类型的肌营养不良不仅基因定位迥异,研究及认识水平差别更大,如Duchenne型肌营养不良及Becker型肌营养不良(DMD/BMD),国外研究重点已深入到基因治疗水平,而有些新发现的类型[如肢带型肌营养不良(limb-girdle muscular dystrophy,LGMD)1D～H]的基因尚未克隆,更多类型肌营养不良的分子机制仍在探索之中.国内相关研究的水平整体上与国外仍有较大差距,不同研究单位间亦很不平衡.     

诊断有误的Gerstmann综合征(附7例报告)

Gerstmann综合征是一个有大脑定位损害的症候群,亦有称之为角回综合征者,除外伤及肿瘤外,血管病变是其主要原因之一。由于血管病变本身的特殊性,所以易造成临床误诊误治,本文就诊断有     

变应性皮肤血管炎合并雷诺氏现象一例

我院收治变应性皮肤血管炎合并雷诺氏现象一例并经病理组织检查证实报告如下: 男,42岁,因四肢出疹半年、双下肢结节一     

急性脑血管病性精神障碍78例临床分析

脑血管病患者发生精神障碍,临床并非少见,国外陆续有报道[1],国内尚少见报道。近年来,我院共收治急性脑血管病221例(出血性脑血管病65例、缺血性脑血管病156例),其中出现精神障碍者78例,占35.5％,对其临床资料分析如下。     

肝豆状核变性诊治中的若干问题及其建议

肝豆状核变性(hepatolenticuler degeneration,HLD)是一种常染色体隐性遗传病,由Wilson于1912年首次描述,故又称为Wilson病(Wilson's disease,WD),致病基因为ATP7B基因,编码ATP7B蛋白.ATP7B基因突变可导致ATP7B蛋白失去功能,引起机体排铜障碍,造成铜过度沉积于肝、脑、肾等重要脏器而引起相应组织变性,临床上主要表现为肝损害、锥体外系症状、精神异常、肾损害和骨骼畸形等.     

散发性肌萎缩侧索硬化患者Senataxin基因的突变检测和分析

目的 探讨散发性肌萎缩侧索硬化(SAIS)患者Senataxin(SETX)基因突变特点.方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增60例SALS患者SETX基因的26个外显子,应用直接基因测序法筛查其突变和多态,同时与200名健康对照进行比较.结果 我们检出2个新的同义突变,分别为Asp844Asp(GAC→CAT)和Phe998Phe(TTC→TTT).尽管在200名健康对照中未检出这2个同义突变,但经过不同物种间的同源序列比对,发现这2个序列不是保守序列,提示它们不是致病性突变.除此之外,我们还检出了19个多态.结论 我们发现了SETX基因的2个同义突变和19个多态,进一步扩大了SETX基因的突变谱和多态谱.     

短串联重复序列位点的优选及其在脊髓性肌萎缩症产前诊断中的应用

目的 优选出与运动神经元生存（survival motor neuron，SMN）基因紧密连锁且多态信息含量丰富的短串联重复序列（STR）位点，并将其应用于脊髓性肌萎缩症（spinal muscular atrophy，SMA）产前基因诊断中。方法 用PCR扩增与SMN基因紧密连锁的11个STR位点，聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检测，银染法显色分析结果。通过多态信息含量（PIC）大小优选STR位点，并利用优选出的STR位点分别采用PCR-PAGE及基因扫描技术对6个SMA家系（包括父母、先证者和胎儿）进行连锁分析。结果我们从11个STR位点中优选出了3个位点（D5S435、D5F149、D5S351），这3个位点在100名健康人中分别检测出8、19、18种多态性片段，其PIC值分别为0．84、0．91、0．92。应用上述3个位点对6个SMA家系进行产前诊断连锁分析，在6名胎儿中发现4名携带者和2名健康者。结论 通过优选出的3个STR位点可快速进行SMA产前基因诊断，准确地排除母血污染，而且可在胎儿中甄别出健康个体与基因携带者，进一步完善了SMA产前基因诊断体系。     

肺结核耐药监测与短程化疗效果观察

桐乡市实施结核病控制项目以来,结防工作进展很快.肺结核病的发现率和治愈率都有大幅度提高.为进一步全面掌握桐乡市结核菌耐药真实情况,为有效控制传染源和提高肺结核冶愈率提供切实可行的科学资料,为桐乡市制订2001～2010年结核病控制规划提供科学依据,我们开展了本项研究.