树突状细胞-肝癌细胞株HepG2融合细胞来源的exosome抗肝癌效应的实验研究

目的:以肝癌(HCC)患者树突状细胞(DC)与肝癌细胞HepG2之融合细胞为来源制备exosome,检测其体外诱导同源T细胞产生特异性抗HepG2的免疫效应。方法:以HCC患者外周血单个核细胞(PBMC)为来源,应用重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、白细胞介素-4(rhlL-4)体外诱导培养DC;聚乙二醇融合DC与肝癌细胞HepG2,免疫磁珠分选DC-HepG2融合细胞,以纯化的融合细胞上清为来源,超滤及超高速密度梯度离心法制备exosome;透射电镜观察exosome形态,流式细胞术、ELISA等方法检测exo-some蛋白分子表达;以融合细胞来源的exosome直接刺激效应淋巴细胞,MTT法检测效应淋巴细胞对靶细胞HepG2的杀伤活性;ELISA法检测该效应淋巴细胞分泌IFN-γ水平。结果:DC-HepG2融合细胞可分泌ex-osome,该exosome同时含有DC的特征分子CD86(94.6%)和肝癌细胞HepG2的AFP抗原(40.7%),ELISA法亦证实exosome提取物中含有AFP蛋白;DC-HepG2来源的exosome活化的淋巴细胞(Exo-L)对靶细胞HepG2的杀伤率明显高于单纯淋巴细胞组(L)(P<0.05),Exo-L组对HepG2的杀伤率亦显著高于对其他两种靶细胞(肝癌细胞SMMC7721、白血病细胞K562)的杀伤率(P<0.05)。靶细胞为HepG2时,Exo-L组IFN-γ分泌量明显高于L组(P<0.05)。结论:以肝癌患者DC与肝癌细胞HepG2之融合细胞为来源可制备获得exosome瘤苗,该瘤苗无须DC存在,可直接激活自体淋巴细胞,产生HepG2抗原特异CTL,显示了比传统制备的exosome更强的功能,有望成为HCC免疫治疗的有效途径。     

直肠癌放射治疗不良反应的防治与护理

直肠癌是常见的恶性肿瘤之一 ,放射治疗是治疗直肠癌的主要方法之一。在放射治疗中不可避免出现一些不良反应 ,积极的防治和护理是保证放疗顺利进行和提高治疗效果的重要环节。我院 1998年 5月～ 2 0 0 1年 12月共收治直肠癌放疗患者 5 9例 ,总结报告如下。1　临床资料1.1　一般资料1998年 5月～ 2 0 0 1年 12月共收治直肠癌 5 9例 ,男 3 8例 ,女 2 1例 ;年龄 41～ 69岁。常规放射治疗 ,对穿野ＤＴ45Ｇｙ ,5个周后缩野补量 3 0～ 40Ｇｙ ,有 2 2例出现并发症 ,其中放射性肠炎 11例 ,放射性膀胱炎 9例 ,外阴炎 2例。1.2　并发症的预防直肠癌…     

对疾病控制机构实验室生物安全管理工作的认识

疾病控制机构的实验室检验内容广泛，涉及的病原微生物种类多，管理上涉及的科室多、管理内容复杂，有一定的难度。加强实验室生物安全管理工作是确保实验室工作人员的安全、环境安全和社会安全的重要措施，不断提高对实验室生物安全管理工作重要性的认识，提高实验室生物安全管理水平，对落实以人为本的理念，促进疾病预防控制事业的发展有十分重要的意义。     

应用自体免疫法治疗顽固性扁平疣

目的：以便利快捷的治疗手段激活患者自身特定的免疫系统。方法：采用手术切取患者自身1～2粒新鲜疣体埋植于上臂内侧皮下。结果：临床应用46例，少则1～2周，多则2～3个月，扁平疣全部消失，不留痕迹。疗效明显而持久，术后6个月至3年随访，无1例复发。结论：特定的抗原激活自体免疫系统产生了相应的抗体从而达到治疗效果。此法安全可靠，操作简便，疗效肯定，不失为一种值得推广的实用型治疗手段。     

体育教学过程中的心理控制浅析

体育教学过程中的心理控制浅析任军，杨健（川北医学院，西南石油学院）体育教学过程既是一个认识过程，也是一个体能和智能的发展过程，又是一个多层次、多形式的运动过程，因此，应把体育教学过程作为一个教学系统来看待。体育教学过程具有层次结构的复杂性，它包含教师...     

胃液中肿瘤相关抗原MG_7Ag的检测及临床意义

为探讨提高胃癌患者胃液中肿瘤相关抗原的检出率及早期胃癌检测的敏感性，应用以胃癌单克隆抗体的特异性和聚合酶链反应（ＰＣＲ）的高度敏感性相结合建立的免疫－ＰＣＲ检测胃液中肿瘤相关抗原ＭＧ７Ａｇ。结果胃癌３７例、慢性萎缩性胃炎８例、慢性浅表性胃炎４例及消化性溃疡８例，胃液中ＭＧ７Ａｇ阳性分别为３０例、２例、０例及１例，胃癌患者胃液中ＭＧ７Ａｇ的阳性检出率为８１．１％。结果提示该方法对诊断胃癌有较大的应用价值     

胃癌中E-cad的表达及启动子甲基化的临床意义

目的探讨E-cad（上皮型钙黏素）在胃癌和癌旁组织中的表达及其启动子甲基化状态与胃癌发生、发展、转移和预后等生物学特性的关系。方法应用免疫组织化学SP法和MSP（甲基化特异PCR法）,检测38例癌旁组织和72例胃癌组织中E-cad的表达情况及其启动子甲基化状态。结果癌旁组织均表达E-cad,而胃癌组织E-cad阴性表达率为63.89%（46/72）,其表达缺失与胃癌的分化程度、临床分期、肿瘤浸润深度密切相关（P〈0.05）。在癌旁组织中无E-cad启动子甲基化,而胃癌组织E-cad启动子甲基化发生率为56.94%（41/72）。随着肿瘤的去分化,临床分期增高,肿瘤浸润深度增加和淋巴转移E-cad启动子甲基化率逐渐增加（P〈0.05）。结论E-cad表达缺失和启动子甲基化与胃癌的发生、发展及预后密切相关,启动子甲基化是E-cad表达缺失的重要原因。     

左心舒张功能不全误诊原因分析

1临床资料患者，男，18岁，因骑车致左小腿摔伤，有一长约3cm左右伤口，急来我院就诊，既往身体健康，无过敏史，经当日值班医生清创缝合后来急诊科注射TAT。由两名护士共同判断试验结果为阴性。遵医嘱给予1500单位TAT肌肉注射。在急诊科观察半小时后，皮丘无改变，注射部位无红肿及痒感，也无胸闷、憋气等其他不适症状，便离院上学。6小时后，患者再次来诊，其左上臂三角肌部位出现红肿皮丘多个，大如花生米，小如黄豆，左腰部有在约7cm&#215;5cm左右红肿硬结，臀部注射部们有一约2cm&#215;3cm左右的硬结，硬结处有痒感，皮试部位也出现瘁感，即遵医嘱给予氟美松5mg肌肉注射，非那根25mg肌肉注射，20分钟后病人症状缓解。     

重组葡激酶突变体(r-SAKΔN)的纯化

重组葡激酶突变体基因在大肠杆菌中高效表达,产物以包涵体的形式存在于胞浆中.通过发酵,扩增工程菌,机械破菌,离心分离粗制包涵体,后者经纯化后用盐酸胍溶解,r-SAKΔN分子复性后用离子交换层析和分子筛脱盐,纯度达97%,比活性5×104HU/mg,Mr14000,等电点为pH6.8.