神经细胞粘附分子及OCT-4蛋白在隐睾中的病理表达及意义

目的 探讨神经细胞粘附分子(NCAM)及转录因子OCT-4在人隐睾中的病理表达及意义.方法 48例隐睾患儿,年龄6个月～13.1岁,平均3岁,单侧43例,双侧5例,共50个隐睾组织活检样本.免疫组化法检测生精小管和间质内NCAM、OCT-4的表达情况.结果 50个样本中,NCAM生精小管内阴性、睾丸间质细胞(Lc)阳性、OCT-4阴性的牛理规律表达率为38%(19/50).NCAM牛精小管、Lc中病理表达率为58%(29/50).NCAM生精小管内阳性病理表达率为30%(15/50),与年龄、睾丸位置无相关性(P>0.05).NCAM于Lc内阴性病理表达率为32%(16/50),与睾丸位置无相关性(P>0.05),但随年龄增加,阳性表达率增加(P<0.05).OCT-4阳性病理表达率为12%(6/50),与睾丸位置无相关性(P>0.05).结论 NCAM和OCT-4在隐睾中的病理性表达反映了生殖母细胞的迁移分化障碍或延迟,可以被作为预测隐睾生殖潜能和癌变趋势的可靠分子标志物.     

胚胎期不同药物诱导大鼠隐睾模型的比较

Objective To establish the rat model of cryptorchidism induced by fetal drug exposure. Methods Pregnant SD rats were randomly assigned into 5 groups according the treatment.From the gestational day 12 to day 21, the rats of the DBP group were administered with dibutyl d-1) and diethylstilbestrol (DES), respectively. The normal pregnant rats were injected subcutanecontrols. The testes were removed on postnatal day 20 and day 80 (PD20 and PD80). The incidence of cryptorchidism was recorded. The testes' morphology and histology were also studied. Results The fetal DES exposure failed to induce cryptorchidism. Of the Flu rats on PD20 and PD80, testis volumes were ( 123. 27 ± 7. 09)mm3 , and (0. 96 ± 0. 26)cm3 , respectively. The organ coefficients were (2. 27 ±0. 09)‰, and ( 1.94 ± 0. 62)‰, respectively. Mean seminiferous tubule diameters (MSTD) were (91.50 ± 6. 29)μm and ( 161.26 ± 33. 80)μm, respectively. Mean seminiferous tubule areas (MSTA)were (6. 62 ± 0. 90 ) × 103 μm2 and (2. 00 ± 1.00) × 104μm2 and ( 1.19 ± 0. 24) × 1 04μm2 , respectively. Of the DBP rats on PD20 and PD80, testis volumes were (117. 39 ± 8. 00)mm3, and (0. 79 ± 0. 28)cm3 , respectively. The organ coefficients were (2. 26 ± 0. 09)‰, and (2. 20 ± 0. 87)‰, respectively.Mean seminiferous tubule diameters (MSTD) were (94. 74 ± 6. 75)μm, and (122. 20 ± 12. 55)μm, respectively. Mean seminiferous tubule areas (MSTA) were (7. 14 ± 1.03) × 103 μm2, and ( 1.19 ±0. 24) × 104 μm2, respectively. The testis volumes, organ coefficient, MSTD and MSTA of the Flu and DBP rats on PD20 and PD80 were significant smaller than those of the controls (P＜0. 01 ). The presences of gonocytes were noted in the center of cryptorchidism seminiferous tubules on PD20 and PD80, which indicated the fetal Flu exposure delayed the lumen formation of the seminiferous tubules.No gonocytes was found in the cryptorchidism seminiferous tubules of the DBP rats. Conclusions The crytorchidism can be induced by fetal Flu exposure characterized by gonocytes malmigration and delayed seminiferous tubules formation. It is a good model to explore the gonocytes development in cryptorchism.     

HIV靶细胞在包皮的表达及其意义

在我国,艾滋病病毒(HIV)的性传播,正逐渐成为主要传播途径[1].防治HIV性传播已成为有效预防艾滋病的重要途径.最近几年,非洲关于包皮环切术与HIV感染关系的实验结果引起了全球的广泛关注,研究结果表明包皮环切术可使HIV自女性传染给男性的比例减少60%,包皮环切术预防HIV感染的作用机制尚不清楚,本研究通过检测包皮内外板HIV靶细胞表达的情况,探讨包皮环切术与HIV感染的相关性及预防HIV感染的可能机制.     

隐睾发生过程中DNA甲基化状态和甲基化转移酶表达的实验研究

目的研究环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二（2-乙基已基）酯[Di—（2-ethylhexy）phthalate,DEHP]作用于孕鼠后,胎鼠睾丸组织基因组DNA甲基化水平的变化及3种DNA甲基化转移酶的表达情况;探讨DEHP所致表观遗传修饰改变在睾丸下降过程中的作用。方法妊娠昆明小鼠（KMmice）随机分为3组,即正常对照组、玉米油对照组和DEHP实验组,每组15只。玉米油对照组和DEHP实验组自妊娠第12．5天到妊娠第18．5天分别持续经口予以玉米油和DEHP,用量按每日500mg／kg,正常对照组不予灌药。采用高效液相色谱仪检测基因组DNA甲基化水平,实时荧光定量PCR检测3种DNA甲基化转移酶的表达量。结果正常对照组和玉米油对照组DNA甲基化水平和3种甲基化转移酶的表达均无统计学意义（P〉0．05）：DEHP实验组DNA甲基化水平比对照组增高约10％。与对照组相比,差异有显著统计学意义（P〈0．05）;实验组3种甲基化转移酶的表达量均比对照组高,与对照组相比,差异有显著统计学意义（Dnmt1,P〈0．05;Dnmt3a,P〈0．01;Dnmt3b,P〈0．05）。结论环境内分泌干扰物DEHP通过影响3种甲基化转移酶的表达而导致基因组DNA甲基化水平升高,从而抑制睾丸下降过程中多种基因的表达,发生隐睾。DNA甲基化等表观遗传学修饰的改变可能是DEHP诱发隐睾的分子机制之一。     

十一味益肾降糖片治疗早期糖尿病肾病临床观察

目的研究十一味益肾降糖片治疗早期糖尿病肾病的方法及效果。方法选择2015-04—2016-06间在开封市中医院收治的早期糖尿病肾病患者50例,在常规治疗的基础上,加用十一味益肾降糖片进行治疗,记为观察组。同期选择早期糖尿病患者50例,仅采用常规治疗方法进行治疗,记为对照组。对比两组患者治疗前后的空腹血糖、餐后2 h血糖、24 h尿蛋白等水平,同时对比两组患者的总体治疗效果。结果治疗前,两组患者在空腹血糖、餐后2 h血糖、24 h尿蛋白水平上差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者空腹血糖、餐后2 h血糖、24 h尿蛋白水平均显著优于治疗前(P<0.05),其中观察组患者24h尿蛋白水平显著由于对照组患者(P<0.05);治疗后,观察组患者治疗总有效率为88.00%,高于对照组患者的68.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论使用十一味益肾降糖片治疗早期糖尿病肾病,能够取得理想的治疗效果。     

先天性尿道下裂病因研究进展

尿道下裂是小儿泌尿系统常见畸形之一 ,其病因复杂 ,发病率呈逐年上升趋势。本文就国内外研究从基因异常、内分泌、环境因素、药物及异常的细胞间信号传导对尿道下裂病因研究进展作一综述     

转录因子Twist的siRNA筛选、腺病毒构建及功能检测

目的 筛选特异性沉默人的Twist基因的siRNA序列,构建siTwist腺病毒并在MG63及143B骨肉瘤细胞中进行功能鉴定.方法 体外退火获得4组siTwist双链DNA序列,克隆至含有Twist基因的pSOS-Twist质粒中获得pSOS-siTwist质粒,脂质体转染HEK293细胞,GFP检测筛选有功能的siTwist片段,将筛选出的siTwist序列构建腺病毒,感染143B骨肉瘤细胞.通过RT-PCR、Western 印迹检测Twist的表达.siTwist与Twist腺病毒共感染MG63骨肉瘤细胞,细胞计数及细胞侵袭实验检测siTwist对Twist的抑制作用.结果 在HEK293细胞中,4组siTwist中有2组GFP的表达明显降低,且siTwist腺病毒能抑制143B骨肉瘤细胞中内源性的Twist表达,Twist腺病毒能促进MG63骨肉瘤细胞的增殖和转移,而两组siTwist与Twist共感染组MG63细胞的增殖及迁徙率均明显低于Twist组(P<0.05).结论 筛选出两对特异性沉默Twist基因的siRNA片段,并成功构建腺病毒,转染细胞后能有效抑制内源性和外源性的Twist表达,为研究Twist在骨肉瘤细胞增殖和转移中的作用及具体机制提供了有效的分子工具.     

以形态与组织学为基础筛选诱导胎鼠腭裂的四氯二苯二噁英最适剂量

目的观察在不同四氯二苯二噁英(TCDD)剂量的作用下,胎鼠腭裂形成过程中的形态学、组织学变化,以筛选TCDD诱导腭裂模型的最适剂量。方法C57BL/6J孕鼠于妊娠第10天随机分为对照组和实验Ⅰ～Ⅳ组,每组6只;对照组以玉米油0.1ml灌胃,实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别以TCDD32、28、24、20μg/kg灌胃。妊娠第17.5天处死孕鼠,称量孕鼠及胚胎体重,记录活胎鼠数、腭裂数、吸收胎及死胎鼠数。另取15只C57BL/6J孕鼠随机分组同前,处理方法同前;各组分别于妊娠第13.5、14.5和15.5天剪取胎鼠头部,解剖显微镜下观察;并行苏木精-伊红染色(HE染色),观察。结果各组孕鼠增加的体重及活胎鼠的体重差异均无显著性。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组较对照组双侧腭突发育瘦小,上抬延迟;Ⅳ组双侧腭突发育及上抬与对照组相比无明显差异。Ⅰ～Ⅳ组胎鼠腭裂发生率分别为97.37%、93.02%、65.12%、56.82%,对照组未见胎鼠腭裂形成。结论 TCDD28μg/kg是建立C57BL/6J胎鼠腭裂模型的最适剂量。     

先天性肾上腺皮质增生症致46XX性发育异常的外科治疗分析

目的 探讨先天性肾上腺皮质增生症(CAH)致儿童46,XX性发育异常(DSD)外科治疗最佳手术时机、手术方式及外科治疗效果.方法 回顾性分析2008年1月至2015年1月我院收治CAH致儿童46,XXDSD患儿共39例,18例定期门诊随访纳入本次研究,年龄1岁2个月～13岁3个月,平均4岁2个月,中位年龄3岁,随访时间3个月～7年.2例患儿仅表现为阴蒂肥大,行阴蒂整形术.16例同时伴有尿生殖窦共同开口,长度为0.5～4.0 cm,平均1.0 cm.8例阴道成形同时行尿道口前移;8例仅阴道成形术,未行尿道口前移.结果 15例术后会阴整体形态满意,3例因自行停用激素出现阴蒂肥大,18例患儿阴蒂触觉及温热觉正常;8例阴道成形、尿道口前移患儿中6例阴道口大小位置可;2例未遵医嘱行阴道扩张出现阴道狭窄;2例出现尿道口退缩;1例尿道阴道瘘.8例阴道成形患儿阴道口位置正常;2例未阴道扩张出现阴道狭窄.结论 CAH致儿童46,XXDSD最佳手术时机及手术方式仍存在争议.早期阴蒂整形术可以获得良好的会阴外观,且保持阴蒂的感觉功能;建议诊断明确及激素水平控制后尽早手术,最好于学龄前完成;早期阴道成形术后拥有满意疗效,但可能出现阴道狭窄,定期阴道扩张可能有助于减少阴道狭窄的发生;尿道口前移术后可能出现尿道口退缩、尿道阴道瘘等并发症.手术时机及手术方式需根据患儿激素水平、会阴发育情况及手术单位医疗水平综合进行考虑.