Akt重组腺病毒载体的构建及其对肝癌细胞生存的影响

目的 构建携带Akt基因的重组腺病毒载体,初步研究其对肝癌细胞生存的影响。方法 分别将Akt-wt及Akt-dn基因亚克隆至穿梭质粒pacAd5 CMVK-NpA,采用RAPAd R○ CMV腺病毒表达系统构建重组腺病毒并用PCR鉴定,以蛋白质印迹检测Akt及其下游GSK3β、p-GSK3β的表达,后将Akt重组腺病毒感染肝癌SK-HEP-1细胞,检测血清饥饿24 h后细胞存活情况。结果 酶切pacAd5 CMV-Akt-wt和pacAd5 CMV-Akt-dn均获得大小为6 kb和1.44 kb(Akt)的两个片段。PCR 扩增得到1.44 kb左右的条带。蛋白质印迹结果 显示两组中p-GSK3β表达有明显差别,肝癌SK-HEP-1细胞存活率在感染pacAd5 CMV-Akt-dn组较感染Akt-wt腺病毒组明显降低。结论 成功构建了Akt-wt及Akt-dn基因重组腺病毒载体,并初步发现其有促进肝癌细胞死亡作用,为体内外进一步研究Akt基因及其相关信号通路在肝癌发生发展中的作用奠定了基础。     

吉西他滨单药与联合顺铂化疗治疗中老年晚期非小细胞肺癌的疗效观察

目的:评价吉西他滨联合顺铂治疗非小细胞肺癌(NSCLC)与单独使用吉西他滨的疗效与安全性.方法:140例晚期NSCLC(Ⅲb/Ⅳ期)患者随机均分为吉西他滨联合顺铂组(n=70)和单独使用吉西他滨组(n=70).联合给药组患者静脉注射吉西他滨(1 250 mg/m2,第1、8天)和顺铂(75 mg/m2,第1天);单独给药组患者静脉注射吉西他滨(1 250 mg/m2,第1、8天).每21天为一个疗程,共持续4个疗程.结果:吉西他滨与顺铂联合给药组疗效优于吉西他滨单独给药组(P＜0.05).而在血细胞减少、血红蛋白减少以及恶心呕吐等不良反应上,吉西他滨单独给药组低于联合给药组,但组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后2年的随访结果也显示经吉西他滨与顺铂联合治疗的患者1年有效率及中位生存期均优于吉西他滨单独治疗组(P＜0.05).结论:吉西他滨联合顺铂治疗中老年晚期非小细胞肺癌疗效确切,未明显增加不良反应,患者耐受性好,值得临床推广.     

寡核苷酸芯片技术检测中国肝细胞癌p53基因点突变

目的探讨寡核苷酸芯片技术在我国肝细胞癌p53基因点突变发生频率及形式,并以DNA测序法进行验证。方法参照国际p53突变公共数据库资料,以发生频率最高的7个点突变序列设计探针,制备p53基因点突变专用寡核苷酸芯片,应用该技术检测我国肝细胞癌p53基因7个常见突变位点的突变频率及形式,以DNA测序法验证结果,比较不同分组时p53基因点突变差异。结果共检测肝细胞癌石蜡包埋标本54例,p53基因突变率为38.9%(21/54)。54例中广西肝癌高发病区组17例,广西低发病区组(低发区组)19例,区(省)外组18例,三组突变率分别为47%、21%、50%。p53突变主要发生在249编码区,主要突变形式为249ser突变(由AGG→AGT,第三碱基G→T颠换);以DNA测序法对结果进行验证,两种技术检测结果重合率100%。结论寡核苷酸芯片技术可作为检测肝癌p53基因突变的一种新的、可靠和便捷的手段;我国肝癌不同地区之间p53基因突变在频率及形式上既有差异性又有类似性,可能预示不同地区肝细胞癌的病因学异同性。     

鼻咽癌组织照射2 Gy前后基因表达差异研究

目的研究鼻咽癌组织照射2Gy后基因表达谱的变化。方法采用BioStarH-141s（2004）型含14112点的人类全长基因cDNA表达谱芯片，对1例放射敏感的鼻咽癌组织进行放疗前及放疗2Gy后检测，并分析它们之间的基因表达差异。结果鼻咽癌放疗2Gy后与放疗前比较，组织表达差异基因共38个，其中上调28个，下调10个。表达差异基因中改变最明显的功能群是免疫系统相关的基因，如IGLV1-44、SLPI、CXCL14、IL1RN、HLA-DQA1、HLA-DOA等上调。细胞增殖、细胞调亡、细胞周期、DNA修复系统也有部分基因发生明显变化，如MLL5上调、POLR2B下调等。结论提示对鼻咽癌组织照射2Gy后基因表达谱改变的研究可以更好地阐明放射敏感性差异机理，为放疗前或放疗早期寻找到预测放射敏感性分子标志提供理论依据。     

幽门螺杆菌感染及其根治对胃溃疡血清胃泌素的影响

目的：了解幽门螺杆菌（HP）相关性胃溃疡（GU）与胃泌素（GAS）的关系以及根除HP治疗对GAS的影响。方法：对42例GU（其中HP阳性31例，HP阴性11例）患进行空腹胃泌素测定、胃粘膜组织活检及快速尿素酶试验测定。用洛赛克丽珠得乐，阿莫西林及灭滴灵进行治疗。疗程2个月，停药1个月后重复上述检查。结果：⑴HP阳性GU患的GAS显高于HP阴性。⑵HP根除后GAS较治疗前显降低。结论：GAS在HP相关性胃溃疡中有重要意义。     

应用寡核苷酸芯片并行检测肝细胞癌p53基因突变类型

目的：并行检测原发性肝癌p53基因突变类型。方法：参照国际公共p53突变数据库资料发生频率最高的7个突变类型作为检测探针设计寡核昔酸芯片，应用该项技术检测肝癌抑癌基因p53上对应的7个常见突变位点的突变频率及形式。结果：检测高发区及低发区肝癌石蜡包埋标本各14例，p53突变发生率分别为64．3％及14．3％(P＜0．05)，高发区组p53突变热点为249编码区，占该组突变的77．8％，突变形式为^249ser突变。结论：本研究发现高发区组肝癌p53基因突变热点为^249ser突变，应用寡核昔酸芯片技术可并行、高效、多位点检测肿瘤的基因突变。     

维生素E预防草酸铂周围神经毒性的临床研究

目的:探讨维生素E在草酸铂引起的周围神经系统毒性中的防治作用.方法:将符合入组条件的32例病人,随机分为两组,A组(17例)接受维生素E 400mg/d治疗+化疗,B组(15例)单纯接受化疗.治疗从接受草酸铂化疗前开始口服,直至草酸铂化疗结束后的3个月.在患者完成8个周期的化疗后评估和统计1、2、3、4级周围神经毒性的发生率.结果:A组1、2、3级的周围神经毒性明显低于B组(P＜0.05).结论:维生素E对草酸铂导致的神经毒性具有神经保护作用,并可作为以草酸铂为基础的化疗病人的补充治疗.     

应用脾部分栓塞术治疗肝硬化合并脾功能亢进症及门静脉高压症(附15例报告)

门静脉高压、脾功能亢进是肝硬化后期最常见的并发症及临床表现形式,肝硬化患死亡原因往往与二密切相关,因此,肝硬化失代偿期患治疗及控制门静脉高压、脾功能亢进至关重要。以往采用外科脾手术切除方法由于其创伤性大,危险性高及其产生的一系列后续并发症使手术切除的应用受到限制。目前,部分性脾动脉栓塞(PSE)在治疗肝硬化并发症方面中的应用已越来越得到在国内外同行的重视,本研究采用PSE治疗肝硬化并门静脉高压、脾功能亢进症15例,取得较好效果,现报道如下。     

封闭式腹水超滤浓缩回输腹腔治疗顽固性腹水的临床研究

目的 :研究封闭式腹水超滤浓缩回输腹腔治疗顽固性腹水的临床疗效。方法 :应用腹水回输仪及透析管等设备 ,直接建立体外封闭式腹水循环 ,将腹水超滤浓缩后回输腹腔 ,监测每次治疗前后临床症状、体征变化 ,及血液、腹水的蛋白、电解质指标改变情况。结果 :2 1例患者共进行 5 5例次治疗 ,平均每例次腹水滤出量 (4 85 0± 95 5 ) ml,治疗后临床症状、体征均得到迅速改善 ,血液蛋白浓度及电解质稳定。结论 :封闭式腹水超滤浓缩回输腹腔术对大量顽固性腹水有明显的治疗作用 ,无明显的毒副作用 ,方法安全、简单易行 ,易于推广