化疗药物诱导后乳腺肿瘤细胞离子浓度变化的检测

细胞内游离钙离子浓度的变化是导致细胞生理功能变化的重要物质基础,也是多种受体激动后信息传递过程的中心环节.     

流式细胞仪的原理及应用

流式细胞仪 (Flowcytometer,FCM )亦称荧光激活细胞分类仪 (FACSC) ,是一种将现代免疫荧光技术与流体力学、激光学、应用电子学和计算机等学科的先进技术相融合用于基础与临床细胞生物学研究的一项高科技实验设备。1　流式细胞仪的分析原理流式细胞仪由以下几个系统组成。液流系统 :制备好的单细胞悬液通过样本管被压进喷嘴(SIP)的中央 ,同时无细胞的鞘液也被压入SIP ,形成包绕细胞的鞘液流 ,使细胞以单列进入流动室 ,与水平方向的激光光束 (一般为 4 88nm的氩离子激光 )垂直相交。光学系统 :稳定的液流推进装置使样本呈单列、每个细…     

Tα1对食管癌细胞RNA转染的脐血树突状细胞诱导T细胞杀瘤活性的影响

目的:探讨食管癌细胞RNA转染脐血树突状细胞(dendritic cells.DCs)对T细胞增殖和CTL特异性抗肿瘤作用的影响,以及Tα1对脐血DCs疫苗的免疫佐剂作用.方法:分离脐血单个核细胞,经rhSCF、rhGM-CSF和rhlL-4诱导和T.Tn细胞RNA转染形成成熟DCs,加入Tα1制备肿瘤疫苗.流式细胞术(FCM)检测各组DCs表型变化;MTT法检测各组脐血DCs诱导T细胞增殖和CTL细胞毒活性.结果:T.Tn细胞RNA转染后组较转染前组脐血DCs高表达MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、CD54、CD80和CD86分子(MHC-Ⅰ:70-36±6.09 VS8.17±1.93;MHC-Ⅱ:72.03±5.32 VS 7.64±5.33;CD54:69.36±7.33 VS 2.05±2.03;CD80:67.21±6.77 VS 2.33±1.65;CD86:68.85±7.41VS 6.73±1.97,P＜0.01);与转染前组相比,可显著促进T细胞增殖(10:1:4.77±0.79 V5 1.65±0.71;50:1:3.85±0.57 VS 1.56±0.13;100:1:2.89±0.59 VS 1.19±0.21,P＜O.05),并有效诱导CTL的特异性杀瘤活性(10:1:27.36±8.93VS 10.35±2.93;20:1:44.55±2.36 VS 11.77±1.03;50:1:51.08±4.92 VS 12.75±1.49,P＜0.05).而Tα1能显著促进RNA致敏脐血DCs的各种表面分子表达(MHC-Ⅰ:87.88±9.13VS 70.36±6.09;MHC-Ⅱ:93.16±3.34 VS 72.03±5.32;CD54:91.75±3.84 VS 69.36±7.33;CD80:87.27±8.68 VS 67.21±6.77;CD86:89.09±6.86 VS 68.85 7.41,P＜0.05);和刺激T细胞增殖能力(10:1:8.31±1.78 VS 4.77±0.79;50:1:5.97±0.14 V5 3.85±0.57;100:1:4.03±0.13 VS 2.89±0.59,P＜0.05);及诱导CTL的能力(10:1:47.66±4.12 VS 27.36±8.93;20:1:56.72±7.24 VS 44.55±2.36;50:1:76.48±3.47 VS 51.08±4.92,P＜0.05).结论:Tα1联合食管癌细胞RNA转染脐力DCs可制备高效、特异的肿瘤疫苗,有望成为食管癌生物治疗的新途径.     

沙培林(OK-432)腔内注射治疗恶性腹腔积液12例临床体会

恶性腹腔积液是晚期肿瘤患者常见的表现。由于常规化疗药物如顺铂、氟尿嘧啶等虽有一定疗效 ,但毒副作用较大 ,而使其预后较差。我科 1999～ 2 0 0 0年对 12例恶性腹腔积液患者应用腹腔内注入沙培林的方法 ,取得了满意的疗效。现报道如下。1　资料与方法1 1　一般资料 :合并恶性腹水的晚期肿瘤患者 12例 ,男 8例 ,女 4例 ,其中胃癌 3例 ,肝癌 2例 ,结肠癌 5例 ,直肠癌 1例 ,乳腺癌 1例。全部患者均经B超、X线、CT、病理确诊 ,腹水中找到癌细胞或经手术确诊 ,且Karnofsky标准评分≥ 4 0分。1 2　治疗方法 :注射沙培林前常规行青霉素皮试。…     

黄芪提取物对Aβ_(25-35)诱导的海马神经细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨黄芪提取物(EA)对Aβ_(25-35)所致海马神经元损伤的保护作用及其作用机制。方法分离孕18 d的胎鼠的海马神经细胞进行体外培养,实验分为3组:对照组、模型组和黄芪组。对照组:只加入无B27神经生长因子的神经基础培养基(NB)原液培养24 h;模型组:加入无B27神经生长因子的NB原液,再加入终浓度为10μmol/L Aβ_(25-35)培养24 h;黄芪组:加入无B27神经生长因子的NB原液,先加入终浓度为黄芪提取物20 mg/L培养4 h,再加入终浓度为10μmol/L Aβ_(25-35)培养20 h。在倒置显微镜下观察各组海马神经细胞形态学变化;采用乳酸脱氢酶(LDH)法和3-(4,5-甲基噻唑-2)-2,5-苯基的氮唑溴盐(MTT)法检测细胞活性;Western blot检测各组海马神经细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果模型组的海马神经细胞活性明显下降,细胞出现凋亡的典型的形态学特征,Bcl-2蛋白的表达水平下降而Bax蛋白的表达水平升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。黄芪组海马神经细胞活性提高、凋亡的细胞数减少,Bcl-2蛋白的表达水平升高而Bax蛋白的表达水平下降,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪提取物对Aβ_(25-35)所诱导的海马神经元损伤具有一定的保护作用,可能与其降低海马神经细胞Bcl-2蛋白的表达水平升高Bax蛋白的表达水平有关。     

中期妊娠引产后出血抢救的护理体会

引产后出血是目前引产术中的严重并发症之一 ,如抢救不及时 ;可导致失血性休克 ,甚至危及受术者的生命。现将我站 1 0年来对引产后出血抢救的护理体会介绍如下 :1　资料和方法1 .1　临床资料 :我站自 1 991年 2月至 2 0 0 0年 1 2月共收治中期妊娠引产孕妇 2 32 8例 ,年龄 2 0～ 36岁 ,平均 2 8岁。孕周 1 4～ 36周 ,平均 2 5周。孕次 1～ 6次 ,平均 3次。1 .2　方法经腹穿刺羊膜腔内注射雷佛奴尔针 1 0 0ｍｇ。2　产后出血原因及结果本文 2 32 8例引产孕妇中 ,发生产后 2 4ｈ内累积出血量≥ 50 0ｍｌ者 62例 ,发生率为 2 .7% ,低于国内相关…     

负载酸洗脱食管癌抗原肽的脐血树突状细胞对CTL杀伤活性的影响

分离脐血中的单个核细胞,以酸洗脱食管癌抗原肽负载获得分化成熟树突状细胞（DCs）,检测其对特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL）的诱导和体外杀伤效应的影响。结果发现,负载食管癌抗原肽的脐血DCs诱导的CTL对酸洗前食管癌细胞株T.Tn的杀伤率显著高于酸洗后组和各对照组（P均〈0．05）,而对无关肿瘤细胞株Hep2无显著杀伤作用。认为负载食管癌抗原肽的脐血DCs体外可诱导CTL产生特异性杀伤效应。     

rhHSP70对食管癌细胞RNA转染的脐血树突状细胞诱导CTL抗肿瘤功能的影响

目的研究重组人热休克蛋白70(rhHSP70)联合食管癌细胞RNA转染脐血树突状细胞(DCs)对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性抗肿瘤作用的影响。方法分离脐血单个核细胞,经rhSCF、rhGM-CSF和IL-4诱导和食管癌RNA转染形成成熟DCs,加入rhHSP70,检测DCs表面标志及DCs诱导的T细胞增殖、CTL杀伤活性。结果食管癌RNA转染后DCs高表达抗原提呈分子、协同刺激分子和黏附分子,对T细胞的促增殖作用和CTL杀伤活性显著增强(P<0.01),rhHSP70能显著促进DCs功能。结论 rhHSP70具有增强食管癌细胞RNA转染的DCs对T细胞的促增殖和CTL杀伤活性的作用。