传染性单核细胞增多症患儿血浆sHLA-G及外周血淋巴细胞亚群检测

目的 通过检测EB病毒(EBV)感染传染性单核细胞增多症(IM)患儿的血浆可溶性HLA-G (sHLA-G)水平及外周血淋巴细胞亚群比例,分析EBV感染IM患儿血浆sHLA-G水平与外周血淋巴细胞亚群的相关性.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA),检测了51例EBV感染IM患儿及146例正常对照儿童血浆sHLA-G水平,采用流式细胞术检测了86例EBV感染IM患儿及30例正常对照儿童的外周血淋巴细胞亚群.结果 EBV感染IM组血浆sHLA-G水平130.30(77.28～217.23)U/ml,明显高于对照组的19.82(6.39～44.90) U/ml,经Mann-Whitney U检验差异有统计学意义(Z=-9.472,P＜0.01);EBV感染IM组外周血CD3+、CD8+淋巴细胞百分率较对照组明显上升、而CD4+、CD4 +/CD8+、CD16+56+、CD19+淋巴细胞百分率较对照组明显下降,差异均有统计学意义(均P＜0.01);EBV感染IM组血浆sHLA-G水平与CD3+、CD4+、CD8+、CD4 +/CD8+、CD16+56+以及CD19+细胞表达率间均无明显相关性.结论 EBV感染IM患儿血浆sHLA-G水平明显升高,并存在细胞免疫功能紊乱,血浆sHLA-G水平可作为EBV感染IM的辅助诊断指标,其升高的机制还有待于更深入的研究.     

医院科研论文投稿管理工作的实践与体会

医学科研论文既是反映医院科研实力、评价医务人员科研能力的重要依据,也是扩大医院学术影响力、促进科技工作全面发展的有效手段之一。为增加医院科研实力,加强医院科研论文投稿管理,温州医学院附属第二医院通过建立科研论文投稿系统、规范论文审批流程、加强科研论文伦理审查、制定论文一稿多投和一稿多发惩罚制度等多项措施,使得医院的论文产出数量和质量有了大幅提高。     

儿童巨细胞病毒IgG抗体亲和力指数测定的意义

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)特异性IgG抗体亲和力指数(AI)在儿童HCMV感染诊断中的意义。方法:对150例临床疑似HCMV感染的儿童,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和微粒子酶免化学发光法检测尿液HCMV DNA载量和血清HCMV IgM/IgG抗体;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定HCMV IgG抗体亲和力指数(AI)。结果:150例疑似HCMV感染的儿童尿液HCMV DNA阳性检出率为83%(124/150),病毒载量范围为2.67×103～1.31×106copies/mL;血清HCMV IgM阳性检出率为74%(111/150),HCMV IgG阳性检出率为91%(136/150),其中HCMV IgM单阳性检出率为6%(9/150),HCMV IgG/IgM双阳性检出率为68%(102/150);102例HCMV IgG/IgM双阳性标本,AI>60%占71%(72/102),40%≤AI≤60%占6%(6/102)例,AI<40%占24%(24/102)。结论:IgG抗体亲和力指数测定能准确地反映HCMV感染的活动状况,有助于HCMV感染的诊断与治疗。     

HRM技术检测β-地中海贫血IVS-2-654(C＞T)与-28(A＞G)突变方法的建立及初步应用

目的 建立基于高分辨率熔解曲线(HRM)技术快速筛查β-地中海贫血(简称β-地贫)基因突变的方法,并初步探讨其临床应用价值.方法 选取温州地区人群β-地贫常见基因突变位点IVS-2-654(C＞T)与-28(A ＞G)作为研究位点,采用TA克隆技术构建其质粒DNA作为模板或基因分型对照,建立基于HRM技术检测β-地贫基因突变的方法,并对该方法的特异性、重复性、灵敏度等指标进行方法学评价.收集2009年11月至2010年10月温州医学院附属第二医院、育英儿童医院临床疑似β-地贫患者117例,抽取外周血标本,提取外周血白细胞DNA,用该方法进行IVS-2-654(C＞T)与-28(A ＞G)位点的HRM检测,并将检测结果与双向直接测序做比较.结果 建立的HRM技术可对β-地贫IVS-2-654(C＞T)与-28(A＞G)突变位点进行检测,未见非特异性扩增片段;不同基因型HRM检测的批内、批间熔解温度(Tm)值的变异系数(CV)均＜0.1％;该法最低可检出103拷贝的DNA模板,并可检测低至10％的突变存在.117份临床疑似β-地贫患者样本经该法检测,45份为IVS-2-654(C＞T)杂合突变型,9份为-28(A＞G)杂合突变型,未发现2个位点的纯合突变型基因;此结果与直接测序所得基因型结果完全一致.结论 建立的HRM技术操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于β-地贫基因突变筛查,并为β-地贫其他突变位点的检测及基因组单核苷酸多态性分型等提供了一个通用的技术平台.     

实时逆转录聚合酶链反应定量检测人 TNF-αmRNA的表达

目的建立一种快速、灵敏、特异定量检测人外周血单个核细胞(PBMC)表达 TNF-α mRNA 的方法。方法根据 Gene Bank 中 TNF-α mRNA 序列和 MGB 探针荧光定量分析原理,设计合成特异的引物和探针,优化实验条件,建立定量检测人 TNF-α mRNA 的实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,并对10名健康体检者 PBMC PHA 刺激前后进行 TNF-α表达检测。结果本法灵敏度为10~3拷贝/毫升、线性检测范围达6个数量级(10~3～10~9拷贝/毫升);特异性好,PCR 产物电泳后无非特异性条带产生,非目的扩增产物用本法进行检测,均无荧光信号响应;以 Ct 值计算变异系数(CV 值),批内批间 CV值均小于5%;10名健康体检者 PBMC PHA 刺激前后 TNF-α mRNA 的平均含量分别为10~(4.15±0.49)和10~(5.19±0.43)拷贝/毫升。结论Taqman-MGB 实时荧光 RT-PCR 定量检测人 TNF-α mRNA 表达水平,结果快速、准确、特异、灵敏,具有临床推广价值。     

替格瑞洛单抗治疗对PCI术后病人心血管事件及出血事件的影响

目的:观察替格瑞洛单抗治疗对经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后病人心血管事件及出血事件的影响。方法:选取2017年4月—2019年12月于我院住院行PCI术的冠心病病人126例,所有病人PCI术后行替格瑞洛及阿司匹林双抗治疗,双抗治疗3个月后若出现出血倾向、阿司匹林相关并发症则转为替格瑞洛单药治疗,服用剂量、次数维持不变,其他病人仍维持双抗,持续9个月。其中,全程使用双抗的病人为双抗组,在PCI术后3个月转为单抗的病人为单抗组。观察两组治疗后血清纤维蛋白原(FIB)、凝血酶原时间(PT)、心血管事件及出血事件情况。结果:本次共纳入因冠心病接受PCI治疗的病人126例,其中,单抗组41例,双抗组85例,两组性别、年龄、吸烟史、饮酒史、凝血指标、肝肾功能指标、血脂及合并症比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后FIB、PT比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组心血管事件发生率分别为12.20%和7.06%,差异无统计学意义(P>0.05)。两组分别进行BARC 3型或BARC 5型出血统计,单抗组2例,占4.88%,双抗组7例,占8.24%,差异无统计学意...     

静脉血管扩张剂在急性失代偿心力衰竭中的应用进展

随着治疗药物、器械植入以及外科手术治疗理念的不断进展,各种急性心血管疾病的长期存活率得到显著提高。相当数量的存活患者将逐步进展至慢性心力衰竭,并不断经历各种原因导致的心力衰竭的急性失代偿。与慢性心力衰竭治疗取得了实质性进展不同,急性失代偿心力衰竭的基础理论与药物治疗策略均有待进一步的深入研究与评估。在急性失代偿心力衰竭治疗的临床实践中,血管扩张剂是继利尿剂后的另一种重要的基石性药物,但其应用目前尚存诸多争议,缺乏充分的证据。现旨在综述急性失代偿心力衰竭患者使用静脉血管扩张剂的病理生理机制、相关临床循证试验证据、适应证优化以及可能存在的风险。     

过敏性紫癜患儿肾脏早期损害指标的探讨

过敏性紫癜 (ＨＳＰ)是一种与免疫有关的全身性小血管炎 ,肾脏为受累的靶器官之一[1] 。我们联合检测和比较常规尿检阴性的ＨＳＰ患儿尿微量白蛋白 (ｍＡＬＢ)、转铁蛋白 (ＴＲＦ)、免疫球蛋白Ｇ(ＩｇＧ)和Ｎ 乙酰 β Ｄ氨基葡萄糖苷酶 (ＮＡＧ) 4项指标 ,以探讨ＨＳＰ患儿肾脏早期损害的监控指标。1　材料和方法1.1　临床资料　全部病例均为 2 0 0 0年～ 2 0 0 1年温州医学院附属育英儿童医院住院患儿 ,疾病诊断符合美国风湿病协会的诊断标准。其中男 2 5例 ,女 2 1例 ,年龄 3～12岁。全部病例常规尿检阴性 ,肾功能正常 ;另选同期年龄相仿…     

儿童细菌性和非细菌性脑膜炎患者脑脊液中铁蛋白的RIA及临床应用

脑脊液铁蛋白(简称CSF-Fer)的测定对中枢N系统白血病、恶性肿瘤、脑损伤及出血的诊断价值已有报道，但CSF-Fer在颅内感染患儿中报道较少，或即有报道例数也不够。我们用RIA法检测161例正常时期儿童及脑膜炎患儿CSF-Fer，以探讨其含量的变化并对临床诊断，治疗及预后观察的应用价值。     

冠脉内注射法舒地尔预防急性心肌梗死原发经皮介入治疗中慢血流及无复流的效果

目的观察冠脉内注射法舒地尔预防急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠脉内介入治疗(PCI)术中慢血流/无复流的有效性、安全性。方法首发STEMI且具备无复流高危因素患者82例,其中PCI术中予以冠脉内注射法舒地尔联合替罗非班29例(法舒地尔组),单独应用替罗非班27例(替罗非班组),术中不应用上述药物26例(非给药组)。分析各组术后即刻造影TIMI血流、矫正TIMI帧数计数(CTFC)及心肌呈色分级(MBG),测定术后肌酸磷酸激酶同工酶(CKMB)峰值浓度,1 w时检测N端脑钠肽前体(NTpro BNP)并行超声心动图检测室壁运动分数指数(WMSI)。结果法舒地尔组TIMI血流、CTFC及MBG与非给药组比较差异显著,CKMB峰值、NTpro BNP、WMSI与非给药组比较均下降(P0.01);术中收缩压与替罗非班组比较无统计学差异;法舒地尔与替罗非班组比较仅MBG改善有统计学意义;替罗非班组与非给药组上述指标比较差异亦有统计学意义。结论 STEMI术中冠脉内联合给予法舒地尔及替罗非班可有效预防或减少术中慢血流/无复流的发生,无诱发或恶化低血压现象。