单磷酸腺苷激活的蛋白激酶在罗哌卡因致SH-SY5Y细胞凋亡中的作用

目的 评价单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(AMPK)在罗哌卡因致神经母细胞瘤SH-SY5Y 细胞凋亡中的作用.方法 SH-SY5Y细胞在含15%胎牛血清的DMEM/F12培养基中于37℃、5%CO2细胞培养箱中培养.将SH-SY5Y细胞按5×105个/孔接种于6孔培养板中.采用随机数字表法,将培养孔随机分为5组:对照组(Ⅰ组)、空载体质粒pEGFP-N1组(Ⅱ组)、重组质粒pEGFP-N1-AMPKα2组(Ⅲ组)、阴性对照质粒pGPU6/GFP/Neo NC组(Ⅳ组)和重组质粒pGPU6/GFP/Neo-shRNA AMPKα2组(Ⅴ组).Ⅰ组细胞不给予任何处理,其余各组按每孔4 μg质粒、10μl脂质体Lipofectamine2000转染SHSY5Y细胞.采用Western blot法测定AMPKα2蛋白表达水平.SH-SY5Y细胞经3 mmol/L罗哌卡因处理后,采用流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;采用MTT法检测细胞存活情况,计算细胞存活率;分别采用流式细胞术和Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率.结果 重组质粒pEGFP-N1-AMPKα2可上调AMPKα2蛋白表达;而重组质粒pGPU6/GFP/Neo-shRNA AMPKα2可下调AMPKα2蛋白表达(P<0.01).下调AMPKα2蛋白表达可抑制细胞内ROS的生成,抑制细胞凋亡;而上调AMPKα2蛋白表达可促进细胞内ROS的生成,导致细胞凋亡(P<0.01).结论 罗哌卡因可通过激活AMPK引起SH-SY5Y细胞ROS生成增多,从而导致细胞凋亡.

Abstract：

Objective To determine if activation of AMP-activated protein kinase (AMPK) is involved in ropivacaine-induced reactive oxygen species (ROS) production and apoptosis in human neuroblastoma cell line SHSY5Y.Methods SH-SY5Y cell line was purchased from cell center of Shanghai life Science Research Institute,Chinese Academy of Sciences and cultured in DMEM/F12 liquid culture medium containing 15 % bovine calf serum at 37 ℃ in incubator filled with 5% CO2 . Plasmids pGPU6/GFP/Neo-shRNA AMPKα2 and pEGFP-N1-AMPKα2were transfected into the SH-SY5Y cell line. The expression of AMPKα2 was determined by Western blot analysis.The SH-SY5Y cells transfected with recombinant plasmids were exposed to 3 mol/L ropivacaine. Intracellular ROS was detected by flow cytometry. Cell viability was quantitatively determined by MTT colorimetry assay. Apoptosis was assessed by flow cytometry and Hoechst33258 staining. Results The plasmid pEGFP-N1-AMPKα2 upregulated while pGPU6/GFP/Neo-shRNA AMPKα2 down-regulated the expression of AMPKα2 ( P < 0.01). Down-regulation of AMPKα2 expression attenuated while up-regulation of. AMPKα2 expression promoted intracellular ROS production and cell apoptosis induced by ropivacaine ( P < 0.01) . Conclusion AMPK probably mediates ROS production and cell apoptosis induced by ropivacaine.     

多媒体健康教育在乳腺癌术后患肢功能锻炼中的运用

[目的]探寻适用、高效、病人满意度高的健康教育方式。[方法]将乳腺癌病人64例随机分成观察组和对照组各32例,观察组采用多媒体光盘进行功能锻炼,专科护士指导;对照组采用传统健康教育方式进行功能锻炼;评价两组病人对健康教育方式的满意度、对功能锻炼健康教育内容的掌握度、患侧上肢功能恢复状况。[结果]观察组病人的满意度、健康教育内容掌握度、患侧上肢功能恢复状况与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]多媒体健康教育较传统健康教育方式效果好。     

腹腔镜泌尿外科手术应用硬膜外麻醉60例体会

我院封60例腹腔镜泌尿外科手术施行硬膜外腔麻醉，今将麻醉处理总结如下。     

脑血管病神经介入治疗的麻醉体会

目的:总结脑血管病患者神经介入治疗的麻醉管理体会.方法:492例脑血管病患者,ASA分级Ⅰ～Ⅱ级.术前肌注东莨胆碱和咪唑安定,入室静注芬氟合剂,手术开始前静注异丙酚0.75～1.0 mg/kg,以30～100μg/(kg·min)泵注维持.必要时术中予压宁定、艾司洛尔、硝酸甘油控制性降压.结果:473例患者麻醉镇静、镇痛效果好,血压控制满意,手术顺利,术毕清醒迅速,血压回升平缓,无反跳性高血压.16例患者需泵注硝酸甘油和艾司洛尔控制血压;3例患者因动脉瘤破裂后行急诊开颅手术.结论:保留自主呼吸异丙酚静脉全麻,必要时辅以适当的控制性降压,用于脑血管病神经介入治疗术是一种安全有效、简单可行的麻醉方法.     

全膝关节置换术后镇痛治疗的研究进展

背景 术后镇痛治疗是全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)后的基本辅助措施,直接关系到手术效果和术后膝关节功能的恢复.目的 综述国内外关于TKA镇痛治疗的研究进展.内容 TKA的镇痛疗法各有优缺点,新型镇痛药物及技术的应用使镇痛方案选择更加多元化,镇痛方式及药物的选择也更加注重利于患者术后膝关节功能的康复及个体化感受.趋向 以局部浸润镇痛(local infiltration analgesia,LIA)治疗为代表的多模式镇痛(multimodal analgesia,MMA)是近年来国内外提出并研究较多的新的镇痛治疗方式,通过已有的研究已经证实MMA的积极治疗作用,但如何制定个体化的MMA方案仍然是临床面临的重要问题之一.     

毛叶黄杞化学成分的研究Ⅰ

目的:研究毛叶黄杞茎皮的化学成分,并对相关成分化学结构的光谱进行解析。方法:反复利用硅胶柱层析,反向C18柱层析等分离方法进行成分分离,并采用理化和波谱分析方法进行结构测定。结果:从毛叶黄杞茎皮中乙酸乙酯提取部份分出4个化合物,分别为β-谷甾醇、槲皮素、槲皮素-3-O-鼠李糖苷、β-胡萝卜苷。结论:4个化合物均为首次从该植物中得到。     

妇科腹腔镜手术中颈静脉球压力及相关因素对颅内压的影响

目的　探讨妇科腹腔镜手术颈静脉球压力 (jugularbulbpressure,JBP)等的变化及可能对颅内压 (ICP)产生的影响。方法　选择 2 4例ASAⅠ～Ⅱ级妇科腹腔镜手术患者 ,在局麻下行左颈内静脉逆行穿刺置管达颈静脉球 ,以丙泊酚 (或异氟醚 )、维库溴铵及芬太尼行气管内全麻 ,潮气量(VT) 7ml/kg ,呼吸频率 (RR) 14次 /分 ,术中维持通气条件不变。监测气腹前、气腹与头低位即刻及气腹后 10、2 0、6 0min时的JBP、气道峰压 (PIP)、平均动脉压 (MAP)及呼气末二氧化碳 (PETCO2 )等。结果气腹后JBP、PIP、MAP及PETCO2 均显著升高 (P <0 0 0 1) ,JBP及PIP之均数呈完全正相关。结论　头低位气腹条件下PIP及JBP明显增高 ,颅内静脉回流受阻 ,可引起ICP增高     

不同功能状态时甲襞微循环、指容波幅及心率改变分析

本实验观察武汉体院气功专业学员12人在1989.9～1991.3间练习调节功(16次)与特异功能(移物、透视、遥感等28次)时,功前常态、功态中及功后的甲襞微循环,指容波幅与心率的变化。结果:1.甲襞毛细     

救必应化学成分研究(Ⅰ)

目的 研究冬青科冬青属植物救必应Ilex rotunda的化学成分.方法 对救必应95％乙醇提取物的石油醚部位和醋酸乙酯部位进行色谱分离,根据光谱数据和理化性质确定各化合物的结构.结果 分离得到1个新化合物二丁香醚(1)和6个已知成分,分别为木栓酮(2)、3-羟基齐墩果烷(3)、紫丁香苷(4)、芥子醛葡萄糖苷(5)、十九烷酸(6)、硬脂酸(7).结论 化合物1为新化合物,化合物2为首次从冬青属植物中分离得到.     

环甲膜穿刺气管内表麻在小儿气管异物麻醉中的应用

气道异物多发生在2～4岁的小儿，是临床上较常见的急症。1996-08～2000-08作者应用静脉全麻加环甲膜穿刺气管内表麻行气道异物取出术68例．取得了满意的效果，现报告如下。