Notch信号通路调控骨肉瘤细胞增殖的机制研究*

目的 观察Notch通路阻断剂DAPT和Notch通路激动剂Jagged1对人骨肉瘤143B细胞和MG63细胞体外增殖和体内成瘤的影响,探讨Notch信号通路在骨肉瘤细胞增殖中的调控作用。方法 体外培养人骨肉瘤143B细胞和MG63细胞,采用CCK-8法、集落形成试验以及BrdU染色法检测DAPT和Jagged1对两种细胞增殖的影响;在体内利用裸鼠成瘤试验,观察DAPT对于骨肉瘤细胞体内成瘤能力的调控作用,并对肿瘤组织进行切片染色,观察肿瘤组织恶性程度的变化情况。结果 CCK-8法检测结果表明DAPT显著抑制143B细胞和MG63细胞的增殖,且和浓度呈正相关,但10 μM的DAPT与20 μM的DAPT对143B细胞的增殖抑制能力无明显差异。肿瘤集落形成试验结果表明DAPT能够显著抑制肿瘤集落的形成。BrdU染色结果显示DAPT组的BrdU阳性细胞明显少于对照组和Jagged1组,而Jagged1组的阳性细胞数明显多于对照组。体内裸鼠成瘤实验结果显示,与对照组相比,DAPT组能够明显抑制肿瘤大小,Ki67阳性率降低。HE染色结果显示,DAPT组肿瘤组织中的细胞核数量和血管数量明显减少,且组织内部更加疏松。 结论 Notch信号通路参与调控人骨肉瘤143细胞和MG63细胞的体外增殖与体内成瘤行为,抑制Notch通路的表达可能成为骨肉瘤治疗的重要靶点。     

人脐带来源Muse细胞培养、筛选、鉴定及其移植治疗大鼠脊髓损伤

目的:应用免疫磁珠筛选方法从人脐带华通胶间充质基质细胞中特异性地分选多系分化持续应激细胞(multilineage-differentiating stress-enduring,Muse),并探讨Muse细胞移植治疗大鼠亚急性脊髓损伤的安全性和有效性。方法:将捐赠的脐带华通胶剥离剪碎、胶原酶/胰酶消化、密度梯度离心获得足量间充质基质细胞,应用免疫磁珠特异性筛选SSEA3+的Muse细胞,并使用流式细胞仪及细胞免疫组织化学方法鉴定。体内实验:使用NYU-Ⅲ代大鼠脊髓损伤打击仪建立垂直打击脊髓损伤模型,分为A组(假手术组)、B组(对照组)、C组(Non-Muse细胞移植组)和D组(Muse细胞移植组)。A组大鼠接受标准化的椎板切除手术,但不进行脊髓打击;B、C、D组大鼠均接受标准化的脊髓打击损伤,10 g撞击杆于12.5 mm高度自由落下。脊髓损伤造模后2周进行细胞移植,A组大鼠仅打开伤口不接受移植操作,B、C、D组大鼠分别接受PBS注射、Non-Muse细胞移植、Muse细胞移植,每只大鼠脊髓接受四点注射法,共4×105个细胞。自脊髓损伤造模术后1 d及1、2、3、4、5、6周分别进行大鼠BBB运动功能评分,造模术后6周(即细胞移植后4周)处死动物,用免疫荧光染色研究大鼠脊髓内移植细胞存活、迁移和分化情况。结果:流式细胞仪显示脐带间充质基质细胞CD105+、CD90+和CD73+的百分比均达到99.5%以上,且CD45、CD14表达均低于0.5%,而SSEA3阳性率仅有1.46%。MACS特异性筛选后的细胞群有92.0%同时表达SSEA3和CD105,且免疫组织化学显示SSEA3呈典型的膜染色、形态特别。动物实验:A组动物在各个时间点的BBB评分均为21。单因素方差分析及LSD检验BBB评分情况:细胞移植后6周,C、D组与B组比较差异均有统计学意义(P=0.004,0.002),C组和D组比较差异无统计学意义。进一步组内配对t检验表明,C组第4周与第3周比较差异有统计学意义(P=0.005);D组第4周与第3周比较差异有统计学意义(P=0.016),且第6周与第5周比较差异有统计学意义(P=0.034),说明大鼠运动功能持续改善。脊髓免疫组织化学染色显示,Muse细胞和Non-Muse细胞均由注射点向损伤区迁移,但Muse细胞存活数量明显多于Non-Muse细胞,且在损伤区均匀分布。结论:特异性免疫磁珠筛选是获得高纯度Muse细胞的良好高效的方法,Muse细胞可在大鼠损伤脊髓内大量存活4周并向损伤区迁移,且能持续改善大鼠运动功能,Muse细胞有望成为治疗脊髓损伤的一种新的种子细胞。     

遗传性多发性外生骨疣伴颈髓压迫1例

<正>患者,男,29岁,因左侧肢体无力7年,加重1个月于2016年8月26日来我院脊柱外科就诊。7年前无明显诱因出现左侧肢体无力,以下肢为重,起步及迈步时自觉下肢沉重,手部精细活动受限,同时伴有右侧肢体麻木及胸腹部束带感,无大小便障碍,就诊于当地医院后行X线检查被诊断为股骨和肱骨骨软骨瘤,曾于2007年接受左股骨和左肘截     

全膝关节置换后关节后方复合松解的可行性评价

背景：临床对于膝骨关节炎患者可以实施全膝关节置换治疗,为提高修复效果,促进功能恢复,要采取有效措施改善置换过程中的关节间隙以及置换后的关节活动度。 目的：探讨全膝关节置换后行关节后方复合松解的有效性及可行性。 方法：从两家三甲医院2009年12月至2013年12月收治的行单侧全膝关节置换的膝骨关节炎患者中选择118例进行研究,随机分为对照组和观察组,每组59例。在患者全膝关节置换过程中完成截骨之后,对照组行常规后髁增生骨清理,观察组行关节后方复合松解。观察两组患者置换后伸、屈膝间隙情况和主动屈膝90°和120°所需时间,记录3个月随访时的膝关节功能美国纽约特种外科医院评分以及最大屈膝角度,并进行比较。 结果与结论：经统计和比较,两组患者在屈膝间隙方面差异无显著性意义(P > 0.05);但在伸膝间隙、主动屈膝90°、120°所需时间以及最大屈膝角度方面,两组差异均有显著性意义,观察组优于对照组(P均< 0.05)。比较置换后3个月两组患者的膝关节功能美国纽约特种外科医院评分,可得观察组的各项指标得分以及总分均显著高于对照组,差异均有显著性意义(P均 < 0.05)。表明全膝关节置换后行关节后方复合松解具有一定的有效性和可行性,可以有效改善置换过程中伸膝间隙以及置换后膝关节活动度,但对置换过程中屈膝间隙方面无明显影响。中国组织工程研究杂志出版内容重点：人工关节;骨植入物;脊柱;骨折;内固定;数字化骨科;组织工程     

射频热凝术微创治疗顽固性枕大神经炎的临床应用

2007-2009年在我科就诊的顽固性枕大神经炎患者46例,均排除有严重的脏器疾病及其它原因所致的神经痛,男25例,女21例;年龄27-58岁,平均37岁;病程5-14个月,平均11个月;均经药物治疗后效果不佳。采用北京产R-2000 B温控射频热凝仪治疗,患者俯卧位,暴露患处皮肤,在颈后乳突与枢椎棘突连线的中点处找压痛点（可触及明显的疼痛性条索）作为进针点标记,常规消毒,     

退变性腰椎侧凸的外科治疗

目的探讨退变性腰椎侧凸手术治疗的临床疗效。方法自2003年10月至2007年8月,手术治疗退变性腰椎侧凸45例,其中4例行单纯椎管减压术,25例行减压＋后路内固定融合术,16例行减压＋后路内固定融合术＋椎间隙植入C age。术后常规抗炎,营养神经,对症处理,佩戴胸骶或腰骶支具3个月。结果本组均获得随访,时间6~30个月,平均18个月,93.3%的患者术后症状体征得到了明显的改善,生活质量提高。X线发现Cobb角术后平均9.3°（0~°20°）,改善率为61.4%,并且无断钉及螺钉松动。10例出现并发症,5例硬膜撕裂,发生脑脊液漏,1例肺部感染,1例脑梗死,2例假关节形成,1例腰痛症状加重,经保守治疗症状缓解。结论彻底减压是术后获得良好效果的保证,在充分减压解决患者疼痛的前提下,最大限度重建脊柱在冠状面和矢状面的平衡,恢复脊柱的稳定性是治疗退变性脊柱侧弯较理想的手术方法。     

辨病、辨证与辨位“三位一体”诊疗模式在膝痹病诊断中的意义

1膝痹病的概念及范畴 祖国医学认为骨性关节炎属于＂骨痹＂范畴,《内经》指出：＂风寒湿三气杂至,合而为痹。＂《素问,阴阳应象大论》谓：＂年四十而阴气自半也＂,肝藏血,肾藏精,精血互生。阴精虚久阳必虚＂。《内经》有＂男子六八,女子六七,虚衰之象渐显＂。     

中西医治疗成人大骨节病研究评述

成人大骨节病中晚期患者症状明显,严重影响了日常生活及工作。中医内治法根据证型进行辨证论治,中医外治法治疗大骨节病疗效独特,具有作用迅速、痛苦小、副作用小等优点,主要有熏洗法、中药外敷、涂药按摩、针刀、按摩等诸多方法。西医则根据病情选择西药口服或手术治疗。单独运用中医或西医治疗难以有效改善患者的功能,而中西医结合治疗能够发挥各自所长,取长补短弥补单独治疗的不足之处。     

髓核细胞凋亡调控中的MicroRNA-182

BACKGROUND: Previous study has found that hsa-miR-182 is probably related to the apoptosis-related genes such as cytochrome C (Cycs C) and calcineurin subunit CnB (PPP3R1) in nucleus pulposus cells. OBJECTIVE: To determine whether miR-182 plays a regulatory role in nucleus pulposus cell apoptosis by detecting the relative gene expression levels after transfecting miR-182 with Cycs C and PPP3R1 into nucleus pulposus cells via plasmid delivery. METHODS: After a bioinformatics prediction about miR-182, miR-182 and target genes were transfected into the nucleus pulposus cells, and at the same time, blank control group was established. Then the expression levels of the target genes were detected through cell lysis. RESULTS AND CONCLUSION: miR-182 significantly inhibited the expression of Cycs C in nucleus pulposus cells compared with the blank control group (P < 0.05). Compared with the blank control group, miR-182 made no inhibitory effect on the expression of PPP3R1. These findings suggest that miR-182 may play a regulatory part in nucleus pulposus cell apoptosis by inhibiting the expression of Cycs C. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

羟基磷灰石涂层改善骨内植物界面促进骨整合

BACKGROUND: We have designed and manufactured a novel artificial cervical vertebra and intervertebral complex (ACVC) which combines the cervical titanium cage with the artificial cervical disc, and also developed the ACVC with a hydroxyapatite biocoating (ACVC-HA). OBJECTIVE: To evaluate biomechanical properties of the joint system, and the role of HA coating in promoting osseointegration and long-term stability. METHODS: Twenty-four goats were randomly divided into three groups and underwent the anterior C _2/3 and C _3/4 discectomy, and C₃ subtotal corpectomy, followed by ACVC implantation (group 1) and ACVC-HA implantation (group 2), and given no intervention (black control group), respectively. group. At 12 weeks after surgery, C _1-5 samples were collected to undergo biomechanical tests and histological staining. RESULTS AND CONCLUSION: Prior to the fatigue test, compared with the blank control group, the range of motion and neural zone of groups 1 and 2 in the directions of flexion-extension and lateral bending showed no significant differences, but the above indicators were significantly increased in the direction of rotation (P < 0.05). Additionally, the stiffness in all three directions was significantly lower than that in the blank control group (P < 0.05). There were no significant differences in the range of motion and neural zone in all directions between groups 1 and 2. Similar results were found after the fatigue test. The histological staining showed that both two implants had good biocompatibility and abradability, but more new bone formed on the ACVC-HA. These results suggest that ACVC can effectively reconstruct the motor function of the cervical spine after decompression. Furthermore, HA coating can markedly improve bone-implant interface to promote osseointegration.