胰高血糖素样肽-2对大鼠烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨大鼠烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡情况及胰高血糖素样肽－2（GLP－2）对其的影响。方法 75只Wistar大鼠随机分为烧伤组、GLP－2治疗组与正常对照组。动物于伤后6、12h、1、3、5d处死，检测肠粘膜上皮细胞凋亡数、Caspases-3酶活性及Bcl-2 mRNA表达的变化。结果 烧伤后6h-5d肠上皮凋亡细胞数较正常组明显增加，GLP－2治疗后在伤后6、12h、1d、3d、5d均明显低于烧伤组；caspase-3的活性在伤后1d明显升高，伤后3d到峰值，然后迅速下降至正常范围内，GLP－2组caspase-3活性只在伤后3d明显高于伤前，而与烧伤组相比则在伤后1、3d活性明显降低。肠粘膜Bcl-2mRNA表达在伤后12h开始低于正常，至伤后5d仍低于正常，GLP－2组Bcl-2基因表达在伤后1、3、5d低于正常组，但与烧伤组相比，GLP－2组在伤后12h、1d、3d、5d高于烧伤组。结论 GLP－2可降低烧伤后肠粘膜上皮细胞凋亡，其机制可能与降低Caspases-3酶活性，促进Bcl-2mRNA表达有关。     

反相高效液相色谱法测定烧伤大鼠肠三叶因子

建立了测定大鼠肠三叶因子 (ITF)的反相高效液相色谱法 ,该法简便、灵敏和准确。色谱柱为 Hypersil C4(30 0 A,5μm,4.6× 2 5 0 m m)以乙腈 /三氟乙酸为流动相 ,梯度洗脱 ,流速为 1ml/min。在 2 14nm检测波长下 ,ITF在 1～ 10 0 m g/L范围内具有良好的线性关系 ,检测下限为 2 0 ng。ITF的平均回收率为 99.8% ,日内及日间的变异系数分别为 4.0 9%和5 .37%。运用所建立的方法分别测定了烧伤后静脉营养和肠道喂养两组烧伤大鼠 ITF的含量及其变化规律 ,结果表明同静脉营养相比 ,肠道营养能明显降低烧伤大鼠 ITF下降的幅度 ,说明肠道营…     

Raplb在肿瘤中的功能及意义

Rapl是一种小的Ras样GTP酶，在调控多种信号通路如增殖、分化、形态形成以及凋亡中起分子开关的作用。Rapl共有两种异构体，即Rapla和Raplb。Raplb缺失可以导致血管生成、内皮细胞迁移及增殖功能受损以及MAPK信号通路受阻。无论是血管发生、内皮迁移以及MAPK通路都在肿瘤的发生发展中发挥重要作用，因此，Raplb在肿瘤中意义重大。本文就国内外对Raplb在肿瘤中的作用及意义的研究进展做一综述。     

肠黏膜屏障功能评估方法概述

肠黏膜上皮屏障是体内重要的生物防御屏障,在抵御肠腔内细菌和(或)内毒素移位过程中起着极其重要的作用.广义的肠黏膜屏障包括主要由肠上皮细胞及细胞间连接组成的机械屏障,主要由肠腔内常驻微生物群组成的生物屏障,主要由免疫活性细胞及肠道相关淋巴样组织等组成的免疫屏障,以及主要由消化液、消化酶、分泌性蛋白等组成的化学屏障;     

烧伤后清洁肠道与肠源性高代谢的实验研究

目的探讨烧伤后是否存在"肠源性高代谢”.方法在建立严重烧伤加清洁肠道动物模型基础上,将88只Wistar大鼠随机分为烧伤对照(B)组和烧伤加清洁肠道(D)组.观察了大鼠伤后0～10d静息能量消耗(REE)的变化,同时检测了伤后1、3、5、7、10d血中内毒素、肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素1(IL-1)的含量,并进行相关分析.结果烧伤后两组大鼠的REE、TNF、内毒素和IL-1均明显高于伤前.两组相比,D组的REE、TNF、内毒素和IL-1较B组均有不同程度的降低.相关分析显示,REE同内毒素、TNF和IL-1呈显著正相关(r1=0.77,P＜0.05;r2=0.81,P＜0.05;r3=0.90,P＜0.01).结论清洁肠道可降低烧伤大鼠高代谢反应,大鼠血中炎症介质的含量也下降,提示烧伤后存在肠源性高代谢.     

Rho激酶在大鼠严重烧伤后肠黏膜通透性改变中的作用及机制研究

目的观察严重烧伤早期不同时相点大鼠肠黏膜通透性的变化，探讨Rho激酶在这一过程中的作用及机制。方法常规制备烧伤大鼠模型后取回肠末段，分为正常对照组、烧伤组和烧伤6h＋Y27632组，以荧光素标记法（FITC-D）检测大鼠肠黏膜在未烧伤1、2、6、12、24h等不同时相点通透性的变化指标；用Western blot法检测肠黏膜肌球蛋白轻链（myosin light chain，MLC）、磷酸化MLC（p-MLC）和Rho激酶蛋白水平的变化。结果严重烧伤后大鼠肠黏膜通透性明显增加，并呈时相依赖性变化，6～12h达到最高；p-MLC以及Rho激酶蛋白表达均明显增加。上述蛋白表达的增强可在加入Rho激酶特异性抑制剂Y27632后消失。结论严重烧伤后肠黏膜Rho激酶激活和p-MLC表达增加，是导致其通透性增加及屏障功能损害的分子机制之一。     

谷氨酰胺对大鼠烧伤后代谢率变化及相关激素分泌的影响

目的　探讨谷氨酰胺对大鼠烧伤后代谢率变化及相关激素分泌的影响。方法　采用 3 0 %体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型 ,将 88只Wistar大鼠随机分为烧伤对照 (B)组和谷氨酰胺 (GLN)组。两组大鼠采用等氮、等热卡的营养支持 ,GLN组予 1 0g/kg dGLN ,B组予等量的甘氨酸。观察了伤前及伤后 (PBD) 1、3、5、7、10d大鼠静息能量代谢率 (REE)的变化 ,检测了血中胰岛素、胰高血糖素及皮质醇的含量 ,并进行相关分析。结果　烧伤后两组大鼠的REE、血浆胰岛素、胰高血糖素和皮质醇含量均明显高于伤前。两组相比 ,GLN组的REE明显低于B组 ,血浆胰高血糖素和皮质醇略低于B组 ,胰岛素含量略高于B组 ,在PBD3～ 5存在显著差异。而胰岛素及胰岛素 /胰高血糖比值则明显高于B组 ,在PBD1～ 10存在显著差异 ( P <0 0 5 ,P <0 0 1)。相关分析显示 ,REE同胰岛素 /胰高血糖素比值呈显著负相关 (r=-0 78,P <0 0 5 )。结论　烧伤大鼠代谢率明显增高 ,服用谷氨酰胺能有效降低烧伤后高代谢反应 ,其机制与谷氨酰胺能促进合成激素分泌 ,降低分解激素释放有关     

肠道营养和静脉营养对严重烧伤所致肠道损害的影响

目的 观察肠道营养和静脉营养对严重烧伤所致肠道损害的影响并探讨其机制。方法 采用30%体表面积Ⅲ度烧伤大鼠模型。80只大鼠随机分成静脉营养（PN）及肠道营养（EN）组,另取8只大鼠作为伤前对照（Control)。EN和PN组给予相同的营养液,剂量为每天152ml/kg(732.2KJ/kg),糖、脂肪及蛋白的供热比分别为54.5:31.5:14,其中糖153g/L,卡氮比为183：1,检测肠粘液层厚度,肠粘膜增殖细胞核抗原（PCNA）,血浆内毒素含量及血浆二胺氧化酶（DAO）活性。结果 同PN组相比,EN组大鼠肠道受损程度,血浆内毒素水平及DAO活性明显降低,而肠粘膜PCNA值及肠粘液层厚度则明显高于PN组。结论 静脉营养可减轻肠粘膜受损程度,促进肠粘膜修复。     

肠三叶因子与严重烧伤后肠道损伤及修复的关系

目的 探讨肠三叶因子（ＩＴＦ）在烧伤后的变化规律及其与肠道损伤和修复的关系。方法 Ｗｉｓｔａｒ大鼠４８只随机分成伤前对照（Ｃ）、烧伤后（ＰＢＤ）１、２、３、５及７ｄ共６组。采用高效液相色谱仪定量检测了肠粘膜中ＩＴＦ的动态变化,同时观察了血浆内毒素（ＬＰＳ）水平、肠粘膜损伤指数及肠粘膜增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的变化,并进行相关分析。结果 烧伤后肠杯状细胞分泌ＩＴＦ的能力下降,除伤后第１天ＩＴＦ含量     

SAA3启动子调控的炎症诱导表达系统体内表达及对内毒素响应特性研究

目的：探索应用血清淀粉样蛋白启动子（ＳＡＡ３）调控下游基因的可能性,利用构建的ＳＡＡ３ 启动子／氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）表达载体观察ＳＡＡ３ 启动子／增强子应用于调控目的基因体内表达特性及对体内炎症信号刺激的响应特性。方法：小鼠随机分２组,采用腹腔注射法转染脂质体／ＤＮＡ复合物,４８ ｈ 后ＬＰＳ攻击,测定ＬＰＳ攻击后不同时间ＣＡＴ的诱导表达（ＥＬＩＳＡ法）及不同时间的血清ＩＬ－６ 水平（ＥＬＩＳＡ法）。结果：ＬＰＳ攻击可诱导转染小鼠ＣＡＴ在肝、肺表达,ＬＰＳ活化迅速诱导肝脏ＣＡＴ表达,１２ ｈ 达３．７４ｎｇ／ｍｇ 蛋白,３６～４８ ｈ 维持较高的表达水平,９６ ｈ 下降;小鼠血清ＩＬ－６的水平与肝脏ＣＡＴ表达显著正相关ｒ＝ ０．８７。结论：本研究证实ＳＡＡ３ 启动子转录调控序列（－ ３０６～＋ ４７）在体内可响应炎症刺激灵敏启动、诱导下游的报告基因ＣＡＴ表达,适合于构建自适应炎症诱导性表达载体,为炎症疾病的基因治疗奠定基础及治疗新策略