抗肝癌单链双功能抗体在Hut-78细胞系中的表达及体外杀伤活性

目的 用携带分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因（sFv-TNF-α）的重组逆转录病毒感染T细胞淋巴瘤Hut-78细胞，使其表达并分泌针对人肝癌细胞的sFv-TNF-α融合蛋白，观察转导的T细胞对体外培养肝癌细胞的杀伤作用。方法 用感染性重组病毒产生细胞C22（PA317/PST）产生的病毒上清转导入T细胞淋巴瘤Hut-78细胞，采用PCR，RT-PCR，细胞原位杂交及免疫组织化学染色等方法，对转导的Hut-78细胞进行DNA，mRNA及蛋白水平的分析。转导的Hut-78细胞分别与SMMC-7721，HHCC共培养，MTT法检测Hut/PST细胞表达产物对两种肝癌细胞的杀伤作用。结果 PCR，RT-PCR结果显示转导Hut细胞中扩增出外源目的基因对应的电泳条带，neo基因探针原位杂交显示转导细胞质内有较强的紫蓝色阳性反应信号，其阳性率约为95%，鼠抗人TNF-α多克隆抗体免疫组织化学染色，转导细胞质内有明确的棕黄色阳性反应信号，MTT法检测结果，分泌型抗肝癌单链双功能抗体对体外培养的两种肝癌细胞的杀伤率分别为15.4%和26.5%。结论 分泌型抗肝癌单链双功能抗体基因可以在T细胞中整合并稳定表达，其分泌的表达产物对两种肝癌细胞均具有一定的亲合活性，并且具有一定的体外杀伤作用。     

端粒酶活性与肿瘤相关性研究

本研究采用TRAP－银染色法和（或）PR－ELISA技术进行端粒酶活性研究。1997－1999年对肝癌、胃癌、急性淋巴细胞白血病、子宫颈癌、鼻窦部浆细胞肉瘤、恶性甲状腺瘤、精原细胞癌、阴茎癌等22种肿瘤共115份肿瘤组织标本检测，端粒酶阳性率为80％（92／115），同时检测这些肿瘤的临近正常组织共96份，端粒酶阳性率为5．2％（5／96）；34份子宫平滑肌瘤和8份非肿瘤病变组织端粒酶阳性率为7．1％（3／42），它们的临近正常组织阳性率为2．4％（1／42）；肿瘤细胞克隆株3例均为阳性。结果表明，恶性肿瘤组织细胞中端粒酶活性明显高于良性肿瘤和正常细胞（P＜0．01）；1999－2000年对胃癌组织进行研究，得出同样结果，因此端粒酶活性的检测有望成为一种新的肿瘤标志物用于临床诊断研究。端粒酶活性的增高与恶性肿瘤高度相关，对试图通过调控端粒酶活性来达到对恶性肿瘤的治疗研究提供了一个新的靶点和可靠依据。     

南京恙虫病2例报告

1986年10月和11月,我们在南京发现恙虫病2例,现报导如下: 例1,男,44岁,南京西郊江浦某单位干部。1986年10月4日开始周身乏力,鼻塞。7日起发热,体温达39.2℃,自觉咽痛,胸闷,气急,心慌,腹痛,恶心。同时发现右腘窝有一椭圆形溃疡,已结痂,无痛痒。曾两次门诊按上呼吸道感染处理无效。10日入院时呈急性发热病容,体温38.9℃,脉搏86次,血压100/60;皮肤、巩膜无黄染,未见出血点。右腘窝见1×0.5cm椭圆形焦痂,周围皮肤稍隆起呈樱红色,界限明显;右腹股沟可触及数个蚕豆大淋巴结,触痛明显。血白细胞4200,中性66%,淋巴34%,红细胞391     

止咳宝的药效学研究

本研究证明止咳宝对多种动物和多种引咳法有镇咳作用,在镇咳剂量下,对呼吸、心电图,胸腔内压力无明显影响;止咳宝可增加呼吸道粘膜上皮纤毛运动,有利于痰液的咳出,可舒张豚鼠离体气管平滑肌,对整体豚鼠亦有平喘作用。     

应用羟基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺脂探讨新型免疫抑制剂J2作用机制

目的探讨基于CIM立体构型设计的新型免疫抑制剂（J2）在小鼠体内的免疫抑制作用以及其作用机制。方法将羧基荧光素二醋酸琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记的C57BL／6（H-2b）小鼠的淋巴细胞4×10^6～6×10^6经尾静脉注入经印钴照射（900拉德）后的DBA／2（H-2d）小鼠体内构建模型。将DBA／2小鼠随机分为5组，每组5只，模型建立后即刻腹腔注射J2，每天1次。对照组注射生理盐水、CsA组注射环孢素A（10mg／kg体重）；实验组J2A组（1mg／kg体重）、J2B组（4mg／kg体重）、J2C组（8mg／kg体重）。给药3d后分组处死DBA／2小鼠取脾制备淋巴细胞，用CD3、CD4、CD8单抗分别标记受检T细胞，FACS流式细胞仪检测CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞在小鼠体内分裂增殖的情况，并检测CD4^＋T细胞的凋亡情况。结果CFSE标记C57BL/6小鼠的脾淋巴细胞着染率大于99％。对照组分裂的CD4^＋T细胞（75．34±1．58）％、分裂的CD8^＋T细胞（83．48±1．25）％明显多于CsA组和实验组（P〈0．01）。J2B组和J2C组分裂的细胞数分别与CsA组比较差异无统计学意义（P〉0．05），但J2A组多于CsA组（P〈0．05）。对照组CD4^＋T细胞早期凋亡的比例（41．1±3．4）％明显高于其他各组（P〈0．01）。J2A组（35．6±4．1）％、J2B组（24．0±3．7）％和J2C组（13．6±2．3）％CD4^＋T细胞早期凋亡的比例显著高于CsA组（7．4±1．9）％（P〈0．05）。结论J2可能抑制T细胞亚群CD4^＋T细胞的活化，从而进一步抑制CD8^＋T细胞的分裂增殖而具有免疫抑制作用。     

豚鼠前庭感觉细胞中同时检测一氧化氮和活性氧基

近来有相当多的证据提示一氧化氮(NO)和与其有关的活性氧基(ROS)在某些内耳疾病中起到关键作用,例如听觉器官外伤、迷路炎、氨基糖苷类抗生素与顺铂的耳中毒以及内淋巴积水。很多关于ROS在氨基     

两种穿刺方法用于腰-硬联合麻醉的对比观察

腰-硬联合麻醉(CSEA)自90年代初开始应用于临床后,由于其具有腰-硬麻醉的双重优点,在有些国家和地区已成为各种下腹部手术及下肢手术的首选麻醉方法.目前国内广泛采用联合麻醉包,在同一间隙以针内针穿刺技术行CSEA,其优点已有许多报道,而采用双间隙针并针法施行CESA的报道较少,对费用的比较则更少,为此笔者进行了对比观察,现报告如下.……     

“胰岛素正常”的胰岛素瘤

目的分析胰岛素瘤胰岛素水平正常的原因，以提高其诊断水平。方法对我院1982年6月至2005年10月诊断为胰岛素瘤，且胰岛素水平检测结果在正常范围内的12例进行回顾性分析。结果12例患者均出现空腹或发作性低血糖症状，连续检测血糖，至少1次血糖值〈2．8mmol／L。同期检测外周静脉血中免疫反应性胰岛素（IRI）水平均〈25mU／L。周围静脉血中免疫反应性胰岛素／血糖比值（IGR）：〈0．3者5例，〉0．3者7例。12例中8例进行了血清C-肽检测，6例高于正常。结论少数胰岛素瘤患者的血胰岛素可在正常范围内，血胰岛素水平正常不能排除胰岛素瘤的诊断。     

血清痩素对老年男性骨质疏松的影响

目的 探讨血清瘦素水平对老年男性骨质疏松的影响。方法 选取年龄在60-92岁的158例老年男性，采用双能X线法（DXA）检测骨密度，并根据测值将受试者分为骨质疏松组与非骨质疏松组，用放射免疫法（RIA）检测两组空腹血清瘦素浓度，进行比较研究。结果 血清瘦素测值在不同年龄组间的差异无统计学意义，而在肥胖组与非肥胖组间有显著差异（P〈0．01）。在老年男性骨质疏松组血清瘦素测值明显低于非骨质疏松组，两者具有显著差异（P〈0．05）。结论 血清瘦索测值并不随老年男性的年龄而变化。但与老年男性的体重指数呈正相关，血清瘦素对老年男性骨质疏松有较好的预示及保护作用。     

生活方式及心理因素对体外受精-胚胎移植的影响

越来越多的证据表明相同治疗条件下,不孕夫妇的生活方式对体外受精-胚胎移植的成功有重要影响,但其具体作用机制有待进一步研究.体外受精-胚胎移植治疗过程中,不孕夫妇的负性心理影响治疗的成功率,心理干预可有效地提高妊娠率.目前,有关心理因素影响体外受精-胚胎移植成功率的作用机制及更为有效的心理干预措施仍在研究中.