虚寒、虚热证大鼠神经、内分泌、免疫与血液流变学的时相性研究

目的 :用虚寒、虚热证鼠研究神经、内分泌、免疫、血液流变学等机能以了解其变化的时相性和稳定性。方法 :以血清DβH活性 ,17 OHCS ,内脏神经递质含量 ,ANAE % ,NK免疫细胞功能 ,PFC抗体机能 ,纤维蛋白原含量 ,红细胞变形指数 ,全血黏度及红细胞聚集指数等指标进行测定。结果 :虚热时交感神经兴奋 ,肾上腺皮质素释放增多 ,ANAE % ,PFC空斑数增多 ,NK活性降低 ,血内纤维蛋白原增多。虚寒时神经、内分泌、免疫功能均降低 ,纤维蛋白原也增多。结论 :神经内分泌反应较快而持久 ,免疫功能对内环境的变化很敏感容易受损伤 ,血液流变学的变化较轻、较晚。用中药调节整体机能对各系统机能变化和疾病有治疗和预防作用。     

复方百肤青抗大肠杆菌引起细菌性阴道病生物膜的研究

细菌性阴道病，又称非特异性阴道炎，是生育期妇女最常见的疾病之一，主要研究在临床已证实治疗细菌性阴道病(bacterial vaginosis，BV)有显著疗效，以及实验研究中对细菌性阴道病有良好的抗菌作用的中药复方百肤青抗BV主要致病菌大肠杆菌生物膜的作用，目的是预防细菌性阴道病的复发．解决细菌性阴道病复发率高的问题。同时，为寻找抗菌生物膜新药开辟新途径。     

百肤青对细菌性阴道病主要致病菌抗菌作用的研究

研究发现,BV不仅与盆腔炎等妇科疾病有关,而且可引起早产、绒毛膜羊膜炎、产后子宫内膜炎、子宫颈癌、新生儿低体重等.细菌性阴道病是妇科常见疾病,研究认为它是由加特纳氏菌及某些厌氧菌引起的混合感染性疾病.目前临床应用的抗菌药物主要为西药,因而存在一些毒副作用;本文将已在临床上证实治疗细菌性阴道病有显著疗效的中药复方百肤青,对从非特异性阴道炎患者体内分离到的多株病原菌进行最低抑菌浓度(MIC)的试验;目的是为探讨其作用机理,全面了解其抗菌作用.     

苦参碱对体外白念珠菌生物膜抑制作用

目的 研究苦参碱对体外白念珠菌生物膜的影响.方法 采用甲基四氮盐(XTT)减低法评价苦参碱对白念珠菌的生物膜及黏附牲的影响.镜下观察苦参碱对白念珠菌生物膜的形态学影响;细胞毒试验检测苦参碱毒副作用.结果 苦参碱抑制白念珠菌生物膜50%及80%的药物浓度(SMiC50、SMIC80)分别为500,1 000 μg/ml.1 000μg/ml苦参碱对培养0,1,2,4 h的自念珠菌黏附,100μg/ml苦参碱对培养0.1 h的白念珠菌黏附;10 μg/ml苦参碱对培养Oh的白念珠菌黏附均有抑制作用;1 000 μg/ml苦参碱完全抑制白念珠菌生物膜的形成,且只引起14.05%红细胞溶血.结论 苦参碱对体外白念珠菌生物膜有较强的抑制作用.     

黄芩苷体外抗白念珠菌生物膜作用的研究

目的研究黄芩苷对体外白念珠菌生物膜的影响。方挂采用XTT减低法评价黄芩苷对白念珠菌的生物膜及黏附性的影响；镜下观察该药对白念珠菌生物膜的形态学影响；细胞毒试验检测该药的毒副作用。结果 各黄芩苷对白念珠菌生物膜的SMIC50、SMIC80分别是1000μg／ml、2000μg／ml;2000μg／ml及200μg／ml的黄芩苷对白念珠菌的早期黏附及菌丝生长有抑制作用；黄芩苷对人细胞毒性较弱。结论 黄芩苷对体外白念珠菌生物膜有较强的抑制作用。     

黄苓苷体外抗白念球菌生物膜作用的研究

目的 研究黄芩苷对体外白念珠菌生物膜的影响.方法 采用XTT减低法评价黄芩苷对白念珠菌的生物膜及黏附性的影响;镜下观察该药对白念珠菌生物膜的形态学影响:细胞毒试验检测该药的毒副作用.结果 各黄芩苷对白念珠菌生物膜的SMIC50、SMIC80分别是1 000μg/ml、2 000 μg/ml;2 000μg/ml及200μg/ml的黄芩苷对白念珠菌的早期黏附及菌丝生长有抑制作用:黄芩苷对人细胞毒性较弱.结论 黄芩苷对体外白念珠菌生物膜有较强的抑制作用.     

呼吸道生物被膜菌体外生长群感效应的研究

目的:观察体外细菌群感效应对呼吸道生物被膜菌的生物膜形成和铜绿假单胞菌色素产生的影响。方法:从呼吸道感染患者痰标本中分离铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌与肺炎链球菌,用改良平板法建立铜绿假单胞菌生物膜及上述混合菌的生物膜,观察两者形成生物膜的差别。用液体培养法观测混合菌对铜绿假单胞菌色素产生的影响。结果:铜绿假单胞菌单独培养需7 d可形成生物膜,与其他细菌混合培养48 h即可形成生物膜;肺炎链球菌与铜绿假单胞菌混合培养24 h可促进其绿色素的形成。结论:不同菌种之间的群感效应能改变细菌某些生物学性状。     

黄芩苷对非白念珠菌生物膜抑制作用的研究

目的:研究黄芩苷对光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌等非白念珠菌生物膜的影响.方法:96孔微量培养板上构建4种非白念珠菌生物膜;微量稀释法检测黄芩苷对4种非白念珠菌最低抑菌浓度(MIC);XTT减低法评价黄芩苷对4种非白念珠菌生物膜SMIC及菌细胞黏附性的影响.结果:4种非白念珠菌在96孔板中可形成成熟的生物膜;黄芩苷对4种非白念珠菌MIC分别是125,250,125,62.5 mg·L~(-1);黄芩苷对4种非白念珠菌生物膜的SMIC50分别是＞1 000,500,125,250 mg·L~(-1);SMIC80均大于或等于1 000 mg·L~(-1).黄芩苷对4种非白念珠菌的黏附有一定的抑制效应.结论:黄芩苷对近平滑念珠菌、克柔念珠菌、季也蒙念珠菌生物膜有较强的抑制作用.     

复方泽漆冲剂含药血清调控PI3K/Akt/NF-κB通路与NLRP3炎症小体缓解银屑病细胞模型损伤作用机制研究

目的 探讨复方泽漆冲剂含药血清对银屑病细胞模型PI3K/Akt/NF-κB通路及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体的调控作用以阐明该药对银屑病的干预机制。方法 制备复方泽漆冲剂大鼠含药血清,体外以10 ng·mL^-1的角质形成细胞生长因子(KGF)刺激人永生化角质形成细胞系HaCaT建立银屑病细胞模型,将细胞分为对照组、模型组及复方泽漆冲剂5 %、10 %、20 %含药血清组,CCK-8法检测不同体积分数含药血清作用于HaCaT细胞0、24、48、72 h时的细胞活力,确定复方泽漆冲剂含药血清最佳体积分数及作用时间。体外以10 ng·mL^-1的KGF刺激HaCaT细胞建立银屑病细胞模型,以siRNA基因沉默HaCaT细胞NLRP3,将细胞分为对照组、模型组、10 %含药血清组、si-NLRP3-NC组(质粒阴性对照)、si-NLRP3组,CCK-8法检测复方泽漆冲剂含药血清对银屑病模型细胞相对活力的影响;ELISA检测含药血清干预后白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-17α、IL-23、IL-8和趋化因子配体(CXCL)1、CXCL2的分泌水平及乳酸脱氢酶(LDH)释放量;实时荧光定量PCR (qRT-PCR)分析NLRP3、半胱氨酸蛋白酶(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、磷脂酰激醇激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、核因子-κB (NF-κB)的mRNA表达水平;Western blotting分析NLRP3、Caspase-1、ASC、p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB、cleaved-Caspase-1、Gasdermin D (GSDMD)的蛋白表达水平;免疫荧光检测p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB、ASC、Caspase-1的表达与分布。结果 10 %复方泽漆冲剂含药血清及作用48 h为含药血清最佳作用体积分数和时间;在KGF刺激HaCaT细胞增殖的银屑病细胞模型中,与对照组比较,IL-17α、IL-23、IL-1β、IL-8和CXCL1、CXCL2的分泌水平升高,LDH释放量显著升高;与模型组相比较,10 %复方泽漆冲剂含药血清干预48 h后,银屑病细胞模型中IL-17α、IL-23、IL-1β、IL-8和CXCL1、CXCL2表达显著降低,LDH释放量显著下降;NLRP3、ASC、Caspase-1、PI3K、Akt、NF-κB的mRNA表达水平也有所降低;含药血清处理后,NLRP3、Caspase-1、ASC、p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB、cleaved-Caspase-1、GSDMD的蛋白表达水平下降明显,p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB、ASC、Caspase-1的表达与分布也有所减少。结论 复方泽漆冲剂含药血清通过下调PI3K/Akt/NF-κB信号通路及NLRP3炎症小体发挥对银屑病细胞模型的干预作用。