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141.
目的建立一氧化氮间接测定方法。方法硝酸盐还原酶还原硝酸盐(NO-3)至亚硝酸盐(NO-2)过程中所消耗NADPH量与NO-3浓度呈正比,用340nm处NADPH吸光度下降值推算NO-3的存在量。结果血清NO-3浓度为57.49±3.57μmol/L时,批内变异系数(CV)=6.21%,批间CV=8.75%。50μmol/L和100μmol/LKNO3标准其回收率分别为97.02%和87.14%。18例正常人血清和15例正常人不定时尿中NO-3浓度分别为36.64±15.91和633.35±264.75μmol/L。结论用该方法测定血清及尿中NO-3浓度简便快速,特异性高,干扰因素少,不需要进行去蛋白等预处理。  相似文献   
142.
目的建立一种新型化学发光测定一氧化氮方法。方法用氩气将全血样品中一氧化氮(NO)排出进入发光仪中鲁米诺-过氧化氢(H2O2)体系,NO与H2O2反应氧化鲁米诺产生发光。用碘化钾(KI)在酸性环境中使部份NO代谢产物还原为NO,增加方法的灵敏度。用EDTA为络合剂,无水乙醇为去泡剂,去除金属离子和血气泡的干扰。结果NO含量与发光强度呈正相关,120~1000pmolNO含量范围内有良好的线性关系(r=0.998)。全血一氧化氮浓度为6.55μmol/L时,批内变异系数(CV)为8.71%。结论该方法用于全血NO测定,灵敏、特异,可避免液体介质中各种因素干扰。  相似文献   
143.
目的 选择一个在乙型肝炎病毒-丙型肝炎病毒-人类免疫缺陷病毒(HBV—HCV—HIV)三联荧光PCR检测试验中既可有效监控假阴性结果出现,又对阳性结果影响最小的内标浓度。方法应用不同浓度的内标参入酶链聚合反应(PCR)反应,确定最佳内标参人量;并在适量内标浓度下,检测低浓度标本的阳性检出率。结果由内标浓度5拷贝/PCR、10拷贝/PCR、20拷贝/PCR、50拷贝/PCR、100拷/PCR5个浓度中,优选出最适的内标浓度为20拷贝/PCR,此条件下,阴性标本的内标检出率为100%,检测灵敏度标本的阳性检出率与无内标样本差异无统计学意义。结论合适浓度的内标参与荧光PCR检测能有效地解决了每个标本的质控问题,指示反应体系(试剂耗材)与检测体系(仪器)的有效性。  相似文献   
144.
红细胞功能检测方法的研究进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
红细胞是血液中数目最多的1类细胞,其主要功能是运送氧气和二氧化碳,保障人体组织和器官的正常供氧,其次是免疫功能.本文着重总结目前检测红细胞携氧功能和清除循环免疫复合物功能方法的研究进展.  相似文献   
145.
目的探讨我国人群通用血浆制备的最佳配比方案。方法用试管凝集法确定A、B、AB型血浆两两之间的最佳比例,然后计算出三种血型的搭配比例,以血浆比例、时间、温度3个因素进行正交设计。观察3个因素对混合血浆抗体效价的影响。结果三种血型血浆两两之间的最佳比例分别是A:B=3:1、B:AB=1:3、A:AB=1:2;正交试验结果表明将A:B的比例定位于3:1附近,再按照B:AB=1:3、A:AB=1:2去补偿,抗体效价可降到通用血浆的标准,且时间、温度对血浆抗体效价无影响。结论实验结果表明,A、B、AB三种血型血浆按照接近中国人血型比例6:2.5:1混合,于22℃孵育1h可以得到抗血型抗体IgM效价符合标准的混合血浆。  相似文献   
146.
目的:评估临床常用的几种血小板激活剂,即凝血酶、ADP和CaCl2活化的富血小板血浆(PRP)上清对巨噬细胞表型的影响并探究储存时间对PRP功能的影响。方法:采用含不同激活剂或不同储存时间的活化PRP上清的培养基体外培养人单核衍生巨噬细胞,流式细胞仪检测巨噬细胞表面标记分子的表达,ELISA方法检测PRP上清中的生长因子浓度。结果:培养24 h后,凝血酶和CaCl2活化PRP上清刺激的巨噬细胞CD86的表达水平均明显高于PRP组(P<0.05),且CaCl2活化PRP上清增加了巨噬细胞CD163的表达。而对于不同激活剂组比较,CaCl2活化组的巨噬细胞CD163的表达明显高于凝血酶和ADP组(P<0.05)。ELISA结果显示,在-80℃储存大于20个月和10-20个月的PRP在CaCl2活化后,其上清中FGF(P<0.001)和EGF(P<0.05)的浓度明显高于储存小于10个月组,且两组上清处理的巨噬细胞CD86(P<0.01)、CD163(P...  相似文献   
147.
目的探讨抗-HI抗体的筛查和鉴定在临床输血中的应用价值。方法选取2016年2-11月该院4例抗-HI抗体阳性患者作为研究对象,采用抗人球蛋白法和盐水试管法进行不规则抗体的筛查和鉴定,并对临床输血效果进行评价。结果 4例患者均为ABO血型,其中A型RhD阳性2例,AB型RhD阳性2例。抗人球蛋白法的筛查结果均为弱阳性,盐水试管法的筛查结果均为阳性。在盐水介质条件下,4例患者血清与16系谱细胞反应结果均为阳性,与自身红细胞反应结果均为阴性;在抗人球蛋白介质条件下,4例患者血清与16系谱细胞反应结果除1例弱阳性外均为阴性,与自身红细胞反应结果均为阴性。2例治疗用血患者输血后,血红蛋白上升达到预期效果,无输血不良反应发生。结论为抗-HI抗体阳性患者输血时,应选择ABO同型且盐水试管法及抗人球蛋白法配血结果均相合的血液。  相似文献   
148.
不同剂量力谷源胶囊抗疲劳作用的实验   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的:探讨不同剂量力谷源胶囊缓解体力疲劳功能的差异。方法:实验于2004-06/09在解放军总医院动物实验中心完成。160只昆明雄性小鼠,体质量20~22g,每个实验用40只小鼠,随机分为空白对照组和3个不同剂量组,每组10只,分别为0.36g/kg、0.72g,kg、1.08g,kg 3个剂量组及对照组。各组小鼠每日称体质量后以力谷源胶囊(主要成分为玉米胚芽提取物、葛根提取物、L-精氨酸)灌胃1次,连续30d。进行4个实验:①小鼠负重游泳时间实验:末次给予试验用样品30min后,称体质量,每只鼠尾根部负荷5%体质量铅皮,置于水深(30&;#177;1)cm、水温(25&;#177;1)℃游泳箱中游泳,不时搅动水,使小鼠四肢保持运动,记录自游泳开始至死亡时间(min)。②小鼠肝糖原含量测定实验:末次给予试验用样品30min后处死小鼠,取肝脏,清洗吸干,精确称取100mg,计算肝糖原含量。③血乳酸测定实验:末次给予试验用样品30min后,称体质量,将小鼠置于水深(30&;#177;1)cm、水温(25&;#177;1)℃游泳箱中游泳,不时搅动水,使小鼠四肢保持运动,10min后取出。分别于游泳前、游泳后立即、游泳后休息20min从眼内眦准确采血20μL,用乳酸仪测定血乳酸含量(实测值为测量值3倍),计算血乳酸曲线下面积。④血清尿素氮含量测定实验:末次给予试验用样品30min后,称体质量,将小鼠置于水深(30&;#177;1)cm、水温(25&;#177;1)℃游泳箱中游泳,不时搅动水,使小鼠四肢保持运动,90min后取出,休息60min后,摘眼球采血。用COBAS MIRA全自动生化分析仪测定尿素氮含量。结果:各组小鼠在实验中无意外死亡、丢失及补充,进入结果分析小鼠数量为160只。①各组小鼠体质量的变化:力谷源胶囊对各项实验的小鼠体质量无明显影响,在小鼠游泳时间、肝糖原含量、血清乳酸及血清尿素含量4个实验中,不同剂量组体质量与对照组比较,差异均无显著性(P〉0.05)。②生化代谢指标的变化:各实验组随灌胃力谷源胶囊剂量的增加,小鼠的负重游泳时间延长、血清肝糖原含量增加、血乳酸曲线下面积减少,其中1.08g/kg和0.72g/kg实验组与对照组的差异有显著性(t=3.357~5.625,P〈0.01);各实验组小鼠的尿素氮含量未见明显变化(P〉0.05)。结论:中剂量(0.72g/kg)、高剂量(1.08g/kg)力谷源胶囊能延长小鼠的负重游泳时间,降低血中乳酸的含量及血清中尿素氮的含量,提高体内肝糖原储备量,从而为机体提供更多的能量来源,延缓疲劳的产生。其效果具有剂量反应关系。  相似文献   
149.
本研究旨在制备具有功能活性的重组人血小板表面CD36抗原的鼠抗人单克隆抗体。提取人肝细胞总RNA,经RT-PCR扩增编码人血小板CD36抗原胞外区(Gly30-Asn439)氨基酸残基cDNA,构建于原核表达载体pMDl8并转化大肠杆菌DH5α,筛选获得阳性重组子pMD18-CD36,提取质粒。经序列测定后,将该基因插入到真核细胞瞬时表达载体pTE2上,构建成为pTE2-s-CD36-10His真核瞬时表达载体。采用lipofectamine2000转染法,将重组质粒转染至HEK293细胞,表达产物经Ni^2+2NTA柱层析纯化。以制备的重组CD36蛋白免疫BALB/c小鼠后,取脾与小鼠骨髓瘤细胞融合,筛选出阳性克隆,行Western blot检测抗体结合活性。结果显示:RT-PCR扩增获得了1.4kb的片段。经测序,该序列分析结果与GenBank中的NM_001001547.2完全一致。SDS-PAGE证实转染的HEK293细胞表达了人CD36抗原胞外区蛋白片段。鼠单克隆抗体在Westernblot中可以识别重组CD36蛋白,灵敏度达到8ng。结论:成功制备了抗人血小板CD36单克隆抗体,为临床筛选CD36阴性患者及献血员、深入研究人血小板CD36表面抗原对血小板输注无效的影响提供了实验基础。  相似文献   
150.
目的分析北京某地区无偿献血人员的构成,调查与献血有关主要疾病的感染情况。方法收集2005年1月至2012年12月在我院无偿献血人员的基本信息,分为18—25岁、26—35岁、36—45岁和46.55岁四个组,对不同年龄段的信息进行统计学处理;丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT)采用微板速率法检测,HBsAg、抗-HCV、抗-HIV和抗-TP用酶联免疫吸附试验检测,对这5项传染性指标进行回顾性分析。结果165566人次中男女比例约为(90.4±1.0):(9.6±1.0),四个年龄段献血者动态变化由高到低的顺序由2005年的26~35岁〉36~45岁〉18~25岁〉46~55岁逐渐变为2012年的18~25岁〉26~35岁〉36~45岁〉46~55岁。8年期间献血累计不合格为13515人次,总不合格率为8.16%,不合格血以2012年最高(10.05%),各项指标检出率从高到低依次为ALT(6.47%)〉HBsAg(0.71%)〉抗-HCV(0.46%)〉抗-TP(0.35%)〉抗-HIV(0.013%)。HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的阳性检出率总体呈上升趋势,其中HBsAg的阳性检出率整体最高,抗-HIV的阳性检出率最低。结论18~25岁年龄段是目前无偿献血的主力军,血液感染性疾病总检出率和各项检出率都表现出升高的趋势。  相似文献   
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