大鼠肠神经于细胞体外培养和鉴定

肠神经元发育缺陷或损伤常导致胃肠动力异常性疾病，较常见有先天性巨结肠、责门失弛缓症、假性肠梗阻等，目前多采用对症手术治疗。我们通过改良的肠神经干细胞（ENSCs）培养液及方法，试图建立完善的ENSCs提取和体外培养体系。[第一段]     

改良NADPH-d和AchE酶组织化学法诊断先天性巨结肠

目的 ：探讨进一步改良后的还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶（NADPH-d）和乙酰胆碱酯酶（AchE）酶组织化学染色法诊断先天性巨结肠（HD）的优势,以期提高HD术前及术中诊断的准确率。 方法：取HD患儿术中切除的结肠标本18例,其中女7 例,男11例,平均年龄（8.6±3）月。标本分狭窄段、移行段、扩张段,其冰冻切片分别用改良的NADPH-d和AchE酶组织化学染色法进行染色,与常规HE染色进行比较,并用肠神经元特异标记物β-III Tubulin（TUJ-1）行免疫荧光及蛋白基因产物9.5（protein gene product 9.5,PGP9.5）行免疫组化检查论证改良方法的特异性。结果：NADPH-d法能快速确定扩张段近端切缘是否存在神经节细胞,诊断HD的阳性率为94.4%（17/18）;AchE法对于HD狭窄段黏膜下异常增生的神经丛诊断阳性率为88.9%（16/18）;两组间诊断阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。耗时方面NADPH-d法为（7.0±1.7）min,AchE法为（30.9±2.2）min,组间比较差异有统计学意义（P＜0.001）。上述两种改良方法与TUJ-1及PGP9.5对照结果一致。结论：NADPH-d法能快速确定肠管切缘是否有神经节细胞分布,适用于术中快速诊断HD;AchE法适用于术前直肠黏膜层的活检诊断。     

1035例小儿鞘膜积液门诊手术治疗

目的探讨小儿鞘膜积液的门诊手术治疗模式和注意点。方法回顾性统计我院近5年间门诊手术治疗1035例小儿鞘膜积液的治疗情况与结果。本组中左侧384例,右侧640例,双侧11例;手术方式采用腹股沟横纹小切口经外环口行鞘状突高位结扎术。结果采用门诊治疗模式,所有1035例手术患儿均术后2～4h回家,无死亡病例,无手术部位错误,无切口感染、手术意外损伤及术后较明显出血发生,无医疗纠纷与投诉,术后复发7例,复发率为0.68%。结论门诊手术模式是一项安全、快捷、费用低的手术治疗模式,经外环口鞘状突高扎术的优点在该模式中充分体现,具有较好的社会效益和经济效益,值得推广。     

先天性巨结肠肠壁S-100蛋白的表达和神经元型一氧化氮合酶阳性神经的异常分布

目的探讨先天性巨结肠(HD)肠壁S-100蛋白的表达和神经元型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经的异常分布。方法对25例HD的病变肠段行S-100蛋白和nNOS染色,比较其染色结果和分布特点。结果扩张段及狭窄段结肠壁S-100在神经丛内的神经纤维、施万细胞及周围细胞均有阳性表达,而在神经节细胞则无阳性表达;扩张段nNOS阳性神经节细胞和神经纤维形态分布良好,狭窄段无nNOS阳性神经节细胞,散在分布细小nNOS阳性神经纤维以黏膜层为多。扩张段及狭窄段中神经纤维数密度无明显差异(t=1.251 P>0.05),但前者神经纤维直径明显较后者大(t=4.492 P<0.01)。结论神经分布异常是HD发病的机制之一,S-100与nNOS的协同检测可作为HD明确诊断的重要手段。     

改良NADPH—d和AchE酶组织化学法诊断先天性巨结肠

目的：探讨进一步改良后的还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶（NADPH—d）和乙酰胆碱酯酶（AchE）酶组织化学染色法诊断先天性巨结肠（HD）的优势,以期提高HD术前及术中诊断的准确率。方法：取HD患儿术中切除的结肠标本18例,其中女7例,男11例,平均年龄（8．6±3）月。标本分狭窄段、移行段、扩张段,其冰冻切片分别用改良的NADFH—d和AchE酶组织化学染色法进行染色,与常规HE染色进行比较,并用肠神经元特异标记物β-Ⅲ Tubulin（TUJ-1）行免疫荧光及蛋白基因产物9．5（proteingeneproduct9．5,PGP9．5）行免疫组化检查论证改良方法的特异性。结果：NADPH—d法能快速确定扩张段近端切缘是否存在神经节细胞,诊断HD的阳性率为94．4％（17／18）;AchE法对于HD狭窄段黏膜下异常增生的神经丛诊断阳性率为88．9%（16／18）;两组间诊断阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。耗时方面NADPH-d法为（7．0±1．7）min,AchE法为（30．9±2．2）min,组间比较差异有统计学意义（P〈0．001）。上述两种改良方法与TUJ-1及PGP9．5对照结果一致。结论：NADPH—d法能快速确定肠管切缘是否有神经节细胞分布,适用于术中快速诊断HD;AchE法适用于术前直肠黏膜层的活检诊断。     

同一胎鼠肠和脑神经干细胞神经递质的表达

目的：观察同一胎鼠肠神经干细胞和脑神经干细胞的神经递质表达情况,探索神经干细胞移植治疗相关疾病的合适干细胞源。方法：从孕20 d的同一SD胚鼠中分别提取肠神经干细胞和脑神经干细胞,采用改良的神经干细胞培养液反复传代,取传代培养6~10 d后得到的2种不同来源的神经细胞球,通过琼脂糖预包埋免疫细胞化学检测法及流式细胞仪检测法测定神经干细胞4种神经递质的表达。结果：2种不同来源的神经干细胞的琼脂糖预包埋免疫细胞化学检测显示：肠神经干细胞神经元型一氧化氮合酶（n NOS）、胆碱乙酰转移酶（Ch AT）与相应的对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;脑神经干细胞n NOS、Ch AT、多巴胺β羟化酶（DβH）与相应的对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;2种不同来源神经干细胞间n NOS、Ch AT比较差异有统计学意义（P〈0.05）。流式细胞仪检测提示：肠神经干细胞γ-氨基丁酸（GABA）、n NOS、Ch AT、DβH阳性细胞合计率分别为1.59%、14.97%、5.43%、1.36%,其中n NOS、Ch AT与相应的同型对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;而脑神经干细胞GABA、n NOS、Ch AT、DβH阳性细胞合计率分别为1.68%、6.14%、25.42%、9.30%,其中n NOS、Ch AT、DβH与相应的同型对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：肠神经干细胞表达的神经递质主要为一氧化氮（NO）和乙酰胆碱（Ach）,以NO为主;脑神经干细胞表达的神经递质为NO、Ach和去甲肾上腺素（NA）,以Ach为主;2种神经干细胞均无明显表达GABA。     

大鼠肠神经干细胞体外培养和鉴定

肠神经元发育缺陷或损伤常导致胃肠动力异常性疾病,较常见有先天性巨结肠、贲门失弛缓症、假性肠梗阻等,目前多采用对症手术治疗。我们通过改良的肠神经干细胞(ENSCs)培养液及方法,试图建立完善的ENSCs提取和体外培养体系。     

水痘后急性脊髓炎3例和文献复习

水痘是一种强传染性的出疹性疾病,但少有严重并发症 [1],脊髓病变尤为少见. Boughtom报道的 1517例水痘病人中只发生 1例 [2].我院从 1993年 1月～ 2002年 1月收住的 97例有并发症的水痘病人中 3例发生急性脊髓炎.现结合文献报告如下.     

S100、Cajal间质细胞在先天性肾盂输尿管连接处梗阻的表达

先天性肾积水是儿童常见疾病,其原因较多,其中90%为肾盂输尿管连接处梗阻。引起肾盂输尿管连接处梗阻的病因和病理机制尚未完全阐明,国内外有较多的观点。最近国外研究发现肾盂输尿管连接处狭窄段肌层神经纤维缺乏     

固尔苏治疗溺水后ARDS2例报告

作者于2002年10月～2003年6月予固尔苏治疗溺水后ARDS 2例,现将治疗过程报告如下. 1临床资料 例1男,3岁,因"溺水后8h"入院.患儿溺水15min后救起,当时全身发绀、昏迷、无心跳及自主呼吸.在当地医院进行心肺复苏(Cardio-Pulnonary Resuscitation,CPR)后转我院.查体:体温39.7℃,HR 142bpm,BP122/93mmHg,气管插管、气囊加压给氧下自主呼吸弱,浅昏迷,瞳孔0.3cm,对光反射迟钝,颜面、颈部有针尖大小出血点,两肺闻及湿罗音,四肢肌张力高.