Targeting therapy of choroidal neovascularization by use of polypeptide- and PEDF-loaded immunoliposomes under ultrasound exposure

Pigment epithelium derived factor (PEDF) has been proven to be an effective drug for the treatment of choroidal neovascularization (CNV).However,the lack of ideal administration route is the biggest bottleneck preventing PEDF from wider clinical use.In this study,we developed a novel PEDF-carrying system which employed immuno-nano-liposomes (INLs) under ultrasound exposure.PEDF-loaded INLs were prepared by conjugating nanoliposomes to the peptide ATWLPPR specifically targeting the receptor-2 for vascular endothelial growth factor (VEGFR-2) and reversely encapsuling PEDF.RF/6A cells were incubated with PEDF-loaded INLs.CNV models of BN rats were injected with PEDF-loaded INLs.MTT assay was used to evaluate the cytotoxicity of the INLs on RF/6A cells.Flow cytometry was conducted to detect the apoptotic rate of cells.Laser scanning confocal microscopy was employed to observe the binding and transmitting process of PEDF-loaded INLs and to calculate the area of CNV in the rat model.The results showed that the PEDF-loaded INLs could exclusively bind to CNV but not to the normal choroidal vessels.The CNV area was significantly decreased in PEDF treatment groups in comparison with control group (P<0.05).Moreover,PEDF-loaded INLs exposed under ultrasound were more efficient in reducing the CNV area (P<0.05).It was concluded that INLs in combination with ultrasonic exposure can transmit PEDF into cytoplasma with high specificity and efficiency,which strengthens the inhibitory effects of PEDF on CNV and reduces its side effects.PEDF-loaded INLs possibly represent a new treatment paradigm for patients with ocular neovascularization.     

亚临床型铁锈症继发青光眼误诊1例

0引言亚临床型铁锈症继发青光眼是一组特殊类型的青光眼,在国内很少报道,由于病情隐蔽常常容易误诊或漏诊,导致患者眼球功能严重损伤。我们近期收治1例,报告如下。1病例报告患者,男,54岁,因"左眼外伤性白内障术后眼红、眼     

肝脓肿致内源性眼内炎1例

资料患者男性,49岁。因发热6d、右眼视力骤降4d于2018年1月14日收入我科。入院前曾于当地医院静脉滴注抗生素(头抱菌素类,具体不详)治疗,发热缓解,但眼部红肿加重。既往史:糖尿病病史5年,未规律治疗。否认眼部手术史及外伤史。视力:右眼FC/50cm,左眼0.4。眼压:右眼27.5mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),左眼20.5 mmHg。     

超声联合载色素上皮源性因子免疫纳米脂质体靶向治疗脉络膜新生血管

目的研究超声联合载色素上皮源性因子（PEDF）免疫纳米脂质体对脉络膜新生血管（CNV）的靶向治疗作用。方法以CNV内皮细胞上血管内皮生长因子受体-2（VEGFR-2）为靶向位点,将其配体寡肽连接到纳米脂质体上,再反向装载PEDF,制备能与CNV内皮细胞特异性结合的免疫纳米脂质体。对48只BN大鼠右眼行半导体倍频激光（波长为532nm）光凝术建立CNV模型。光凝后7d,实验组鼠尾静脉分别注射游离PEDF、载PEDF脂质体、载PEDF免疫脂质体,联合眼局部超声波辐照20s,并设立玻璃体腔注射PEDF组和对照组。光凝后14d,脉络膜巩膜冰冻切片观察免疫脂质体对CNV的靶向性。FITC-右旋糖酐标记脉络膜巩膜铺片行新生血管定量分析。结果载PEDF免疫脂质体可特异性靶向结合CNV。CNV与FITC标记的PEDF免疫纳米脂质体结合而呈现绿色荧光,正常脉络膜血管不显现荧光。玻璃体腔注射PEDF组及鼠尾静脉注射游离PEDF、载PEDF脂质体、载PEDF免疫脂质体组CNV面积均较对照组减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。超声联合PEDF免疫纳米脂质体组对CNV的抑制作用强于玻璃体腔注射PEDF组（P〈0.05）。结论动物实验证实PEDF免疫纳米脂质体可特异性结合CNV细胞,超声可增强PEDF免疫纳米脂质体对CNV的抑制作用,该方法有望为眼新生血管的治疗提供新途径。     

增生型糖尿病视网膜病变患者血浆和玻璃体中VEGF和低密度脂蛋白受体相关蛋白6的表达及其相关性

目的　通过定量检测血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）和低密度脂蛋白受体相关蛋白６（ｌｏｗｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒ-ｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ６,ＬＲＰ６）在增生型糖尿病视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＰＤＲ）患者血浆和玻璃体中的表达水平,并探究其相关关系,为ＰＤＲ的防治提供依据。方法　选择ＰＤＲ患者６０例,非增生型糖尿病视网膜病变（ｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＮＰＤＲ）患者６２例,单纯性糖尿病患者（对照组）５５例。ＥＬＩＳＡ检测各组血浆和玻璃体中ＶＥＧＦ、ＬＲＰ６浓度,并对三组检测指标进行统计学比较。结果　ＰＤＲ组血浆和玻璃体ＶＥＧＦ浓度显著高于对照组和ＮＰＤＲ组,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。对照组和ＮＰＤＲ组差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＰＤＲ组玻璃体中ＬＲＰ６浓度高于ＮＰＤＲ组和对照组,差异均具有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。ＮＰＤＲ组和对照组玻璃体中ＬＲＰ６差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。各组血浆中ＬＲＰ６浓度差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。ＰＤＲ组血浆和玻璃体中ＶＥＧＦ浓度呈显著正相关（ｒ＝０．６０,Ｐ＜０．０５）。结论　ＰＤＲ患者血浆和玻璃体中ＶＥＧＦ与ＬＲＰ６水平能较好反映视网膜新生血管活动情况,检测血浆和玻璃体中ＶＥＧＦ与ＬＲＰ６水平可为早期诊断ＰＤＲ提供理论依据。     

华蟾素诱导人红白血病细胞K562凋亡及对Caspase-3表达的影响

目的观察华蟾素对白血病细胞的凋亡诱导作用并探讨其机制。方法通过MTT法观察华蟾素对K562细胞的生长抑制作用。通过DNA电泳、流式细胞术、AnnexinV标记法检测华蟾素作用后K562细胞的凋亡状况。流式细胞术分析Caspase-3表达的影响。结果华蟾素能明显抑制K562细胞生长，且有浓度依赖关系，作用48小时的IC50值为（0．152±0．012）ug／ml。K562细胞经0．5ug／ml的华蟾素作用48小时后，DNA琼脂糖电泳可见凋亡的特征性梯形条带。0、0．0625、0．125、0．25、0．5ug／ml的华蟾素作用K562细胞48小时后的凋亡率分别为（3．78±0.09）％、（3.84±0．19）％、（39．43±1．90）％、（64．55±2．70）％、（81．05±4．23）％。华蟾素作用后K562细胞Caspase-3表达增高在0．0625±0．5ug／ml的浓度范围内具有一定的量效关系。结论华蟾素对红白血病细胞K562具有凋亡诱导作用，其机制与提高Caspase-3表达有关。     

真菌培养和共聚焦显微镜检查诊断非首诊真菌性角膜炎的临床评价

目的：评价真菌培养和共聚焦显微镜检查在非首诊真菌性角膜炎患者诊断中的作用。

方法：采用回顾性研究。对2016-09/2017-02于我院住院治疗的非首诊真菌性角膜炎患者的共聚焦显微镜检查和真菌培养检查进行汇总和分析,利用配对四格表资料的χ²检验统计方法比较两种检查的阳性率。

结果：非首诊真菌性角膜炎患者31例31眼中,真菌培养阳性18眼,阳性率58%,角膜共聚焦显微镜检查阳性6眼,阳性率19%,真菌培养检查的阳性率明显高于共聚焦显微镜检查的阳性率,差异有统计学意义(χ²=7.56,P<0.01)。真菌培养阴性的13例13眼患者中,2眼共聚焦显微镜检查阳性; 共聚焦显微镜检查阴性的25例25眼患者中,14眼真菌培养阳性。

结论：对非首诊真菌性角膜炎患者,真菌培养阳性率较角膜共聚焦显微镜检查阳性率更高。真菌培养是诊断非首诊真菌性角膜炎并明确真菌种属的重要辅助检查方法。在临床诊治过程中,共聚焦显微镜检查因其有着快速、无创、可重复操作的特点,也应作为怀疑真菌性角膜炎患者的首选辅助检查。两种检查方法联合应用可提高诊断阳性率。对于部分辅助检查阴性的患者,不可轻易否定其真菌感染的可能性。     

视网膜新生血管形成过程中VEGF对TGF-β表达的影响—生长因子冗余性的初步探索

目的:研究早产儿视网膜病变新生血管形成过程中VEGF对TGF-β表达的影响。方法:体外培养人视网膜血管内皮细胞(HRCECs),分别转染重组腺相关VEGF病毒和VEGF的RNA干扰质粒到HRCECs,增高和抑制VEGF的表达,通过二氯化钴诱导HRCECs缺氧,观察TGF-β在不同VEGF水平下的mRNA表达变化,同时观察HRCECs增殖的变化。结果:高表达VEGF组(C组),低表达VEGF组(D组),阴性对照组(E组),阳性对照组(F组)的VEGF/actin分别为:1.15±0.77,0.36±0.31,0.28±0.16,0.83±0.72;而TGF-β/actin为:0.55±0.39,0.92±0.57,0.18±0.07,0.70±0.45,当VEGF高表达,TGF-β的mRNA表达下调;在VEGF低表达时,TGF-β的mRNA表达上调。结论:TGF-β能部分代偿VEGF的功能,视网膜新生血管形成过程中生长因子具有冗余性。     

基于“脏腑别通”理论的穴位埋线法治疗肥胖型高脂血症疗效观察

目的 观察“脏腑别通”理论指导下的穴位埋线法对肥胖型高脂血症患者的影响,以及治疗结束后3个月的复发情况。 方法 选取2016年1月—2018年10月期间经金华市中医医院临床确诊的肥胖型高脂血症患者70例,采用数字盲法随机分为埋线组和对照组,埋线组在“脏腑别通”理论的指导下取穴腕骨、三焦俞、膈俞、带脉、天枢、水道、丰隆,将长为1.5 cm的灭菌2-0号羊肠线埋入相应的穴位中,1周治疗1次,2次为1个疗程;对照组取穴同埋线组,采用毫针刺入相应的穴位,得气后留针30 min,每周5次,10次为1个疗程。分别在3、6个疗程后对2组患者进行临床疗效评比,比较治疗前后的脂肪率(F%)、血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C),计算体重指数(BMI),并观察随访6个疗程治疗结束后3个月的复发率。 结果 2组间总有效率及复发率比较,埋线组优于对照组(均P<0.05);埋线组BMI、F%、TC、TG均较对照组降低(均P<0.05),HDL-C较对照组升高(均P>0.05),且治疗6个疗程的疗效优于治疗3个疗程(P<0.05)。 结论 在“脏腑别通”理论的指导下的穴位埋线法能够有效降低肥胖型高脂血症患者体重、F%、BMI及血清TC、TG,上调HDL-C,且复发率低,治疗6个疗程的临床疗效明显优于治疗3个疗程。      

FD-OCT、Visante OCT及A超角膜测厚仪测量人中央角膜厚度的比较

目的比较FD-OCT、Visante OCT及A超角膜测厚仪测量人中央角膜厚度的差异,为临床检查提供参考。方法 选取健康志愿者27人(54眼),依次用FD-OCT、VisanteOCT及A超角膜测厚仪测量双眼中央角膜厚度,三种仪器均测量3次,取其平均值,对所得数据进行统计学分析。结果 54眼志愿者中央角膜厚度测量结果:FD-OCT测量值为(530.74±31.74)μm,Visante OCT为(554.06±33.32)μm,A超为(531.61±31.76)μm。三种测量方法结果差异有统计学意义(F=9.053,P<0.01)。两两比较显示:FD-OCT测量结果与A超相比,差异无统计学意义(P>0.05);Visante OCT与A超相比,差异有统计学意义(P<0.05);Visante OCT和FD-OCT相比,差异也有统计学意义(P<0.05),但两种测量结果高度相关(r=0.949),前者所测中央角膜厚度较后者厚(23.32±10.46)μm,两者差值的95%可信区间为20.46～26.17μm。结论 A超作为目前角膜厚度测量的金标准,随着检查舒适度、检查速度等要求的提高,使用渐显局限。新的角膜测厚仪的出现,有望改善这些问题,但是诊断分析时需注意其可能带来的测量结果偏差。