大鼠肝移植自发免疫耐受模型CD4+CD25+和CD8+CD28-调节性T细胞的变化

目的:比较CD8 CD28-,CD4 CD25 调节性T细胞(T regulatory cells,Treg)及其亚群表型在大鼠自发免疫耐受形成中的变化,并探讨其在肝移植免疫耐受形成中的作用.方法:(1)建立雄性Brown Norway近交系大鼠(简称BN)到Lewis近交系大鼠(简称LEW)原位肝移植免疫耐受模型(存活＞120 d),取同周龄LEW大鼠作为对照组,应用梯度离心法分离外周血及脾单个核细胞,应用流式细胞仪检测CD8 CD28-,CD4 CD25 T细胞亚群比例;(2)应用免疫磁珠分离方法,通过间接法阴性分选和直接法阳性分选两步分离纯化CD8 CD28-,CD4 CD25 T细胞,并对其亚型表型进行检测,比较它们在移植耐受前后的差别.结果:(1)耐受组大鼠外周血及脾单个核细胞中CD8 CD28-,CD4 CD25 调节性T细胞的比例同对照组比较:CD8 CD28-T细胞增高,外周血为(30.2±5.8)%比(16.4±6.1)%,脾为(23.7±7.2)%比(13.4±5.5)%,P＜0.01;CD4 CD25 T细胞无明显差别,外周血为(9.9±3.5)%比(10.4±4.2)%,脾为(15.1±3.7)%比(14.7±4.6)%,P＞0.05.(2)CD8 CD28-,CD4 CD25 T细胞的亚型表型检测,①CD8 CD28-T细胞:耐受组为CD152(CTL-4)-,CD11b ,CD25-,CD45RO ;对照组为CD152(CTL-4)-,CD11b ,CD25-,CD45RO部分表达(76%);②CD4 CD25 T细胞:耐受组为CD152(CTL-4) ,CD11b ,CD28 ,CD45 RO ;对照组为CD152(CTL-4) ,CD11b ,CD28 ,CD45 RO .结论:CD8 CD28-Treg细胞在耐受组大鼠外周血及脾单个核细胞中的比例明显增高,而CD4 CD25 Treg细胞则无明显改变,提示CD8 CD28-Treg细胞在大鼠肝移植自发耐受的形成中的作用可能更为重要;CD152(CTL-4)在两种Treg细胞表达差别可能是引起它们作用及表现不同的重要原因;黏附分子CD11b可能同两种Treg细胞的功能均密切相关;CD8 CD28-Treg细胞包含着不同亚群,而CD45RO表达的增加可能同CD8 CD28-Treg细胞发挥抑制功能密切相关.     

刺五加MDD基因启动子的克隆与生物信息学分析

目的克隆并分析刺五加甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶(mevalonate diphosphate decarboxylase,MDD)基因的启动子序列。方法根据刺五加MDD基因的c DNA序列,采用PCR扩增和热不对称交错PCR(TAIL-PCR)技术,克隆MDD基因5’端的DNA序列及启动子序列。利用Plant CARE等软件对其进行生物信息学分析。结果克隆得到长1 423 bp的刺五加MDD基因启动子序列及长1 024 bp的5’端DNA序列。该启动子序列含有49个TATA-box、25个CAAT-box。还含有脱落酸响应元件、茉莉酸甲酯响应元件、胚乳表达必须顺式作用元件、干旱胁迫响应元件、光响应元件等多种顺式作用元件,以及2个MYBHv1与2个MBY结合位点。结论首次克隆并分析了刺五加MDD基因的启动子序列,为该基因的表达调控奠定了基础。     

泛素蛋白连接酶及其底物在胃肠道恶性肿瘤组织中的表达及临床意义

目的探讨泛素蛋白连接酶MDM2、SKP2及相应底物p53、p27在胃肠道癌组织中的表达。方法检测30例胃肠道癌内镜下肿瘤、癌旁和正常组织活检标本上述标志物的表达情况。结果肿瘤组织MDM2、SKP2和p53高于对照；p27低于对照。MDM2与p53、SKP2与p27分别呈负相关。上述指标与患者年龄、性别、肿瘤大小、部位无关，病理分级与MDM2、SKP2和p53呈负相关，与p27呈正相关，有淋巴结转移者MDM2和SKP2更高，而p27较低。结论胃肠道恶性肿瘤的发生和转移可能与泛素蛋白连接酶作用下某些蛋白底物过度降解有关。     

121例非酒精性脂肪肝的临床研究

目的　研究非酒精性脂肪肝 (NAFL)的临床特点及其与胰岛素抵抗的关系。方法　B超确诊NAFL 12 1例 ,研究其肝功能、体重指数及胰岛素敏感性并与对照组比较。结果　脂肪肝组体重指数、腰围、臀围、腰臀比均高于正常组 ;男性发病早 ,且多为中心性肥胖 ;胰岛素敏感性明显低于正常人 ;ALT、TG高于对照组。不同严重程度病人 ,ALT ,GGT有差别。结论　脂肪肝的发生与体重、体态、胰岛素敏感性有关 ,肝损害的程度与疾病程度、性别有关     

粒细胞集落刺激因子促进大鼠移植肝的再生作用

目的:探讨部分肝移植后,粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF)对部分肝移植物再生的促进作用．方法:采用改良“二袖套法”建立SD大鼠 50％部分肝移植模型,受体鼠随机分为实验组和对照组,术后分别注射(sc)G-CSF和相同体积的生理盐水5 d．观察大鼠移植肝存活时间．术后1,3,5,7和14 d取血清和移植肝脏,测移植物与受体质量比(graft-recipient weight ratio,GRWR),检测血清生化指标,并采用免疫组织化学方法观察肝内的增殖细胞核抗原 (proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达．结果:实验组移植肝存活率较对照组高(90％ vs 60％,X2=5．03,P<0．05),术后第3-5天,实验组GRWR较对照组明显增加(P<0．05)．两组肝再生均于移植后3 d达高峰．与对照组相比, 实验组肝坏死灶少,AST,ALT水平低(3 d:t= 17．61,P<0．05;t=20．16,P<0．05;5 d:t=15．64, P<0．05;t=23．08,P<0．05),白蛋白水平高(3 d: 36．2±4．7 vs 29．5±3．4,P<0．05;5 d:43．2± 4．1 vs 33．8±3．9,P<0．05),PCNA表达升高(t= 23．08,P<0．05)．结论:大鼠部分肝移植后G-CSF可以促进肝细胞再生,减轻肝损伤．     

T细胞亚群在TNBS诱发大鼠实验性结肠炎发病及治疗后的变化

目的探讨T细胞亚群在TNBS诱发大鼠实验性结肠炎模型的外周血、脾、结肠中变化特点及经柳氮磺胺吡啶（SASP）和氢化泼尼松（PSL）治疗后这些细胞的变化。方法分为对照组、建模后1周及3周组、SASP及PSL治疗组，用流式细胞仪检测各组外周血、脾和结肠黏膜上皮细胞内CD4^＋，CD8^＋T细胞比例的变化；肠道积分评定组织学变化。结果CD4^＋T细胞：建模第1周外周血、脾明显低于对照组；建模第3周脾CD4^＋T细胞升至对照组水平，SASP治疗组外周血高于模型3周组，PSL治疗组外周血、脾、结肠均明显低于对照组和模型3周组。CD8^＋T细胞：建模第1周外周血、结肠低于对照组，建模第3周外周血中仍低，结肠升至对照组水平；SASP治疗组外周血高于模型3周组。PSL治疗组外周血、脾、结肠均明显低于对照组，脾、结肠低于模型3周组。结论大鼠实验性结肠炎发病过程中，机体免疫功能下调，以局部免疫异常为主，与整体的免疫异常可能关系较小。PSL导致机体免疫功能下调。SASP对全身免疫状态影响较小，其作用更集中于肠道。     

益生菌治疗大鼠实验性结肠炎效果观察及对T细胞亚群的影响

目的评价益生菌对大鼠实验性结肠炎的疗效,以及研究治疗后体内T细胞亚群变化情况。方法选择北京大学人民医院消化内科与北京医院特需医疗科于2004年9月至2005年2月建立实验性结肠炎模型,设立不同剂量益生菌治疗组、阴性对照组和阳性对照治疗组(泼尼松治疗组及柳氮磺胺吡啶治疗组),组织学积分评定疗效;流式细胞仪检测外周血、脾脏和结肠CD4 、CD8 T细胞亚群变化情况。结果大剂量益生菌对治疗大鼠实验性结肠炎有效;结肠炎大鼠结肠内CD4 、CD8 T细胞均增加,益生菌治疗后回落,而CD4 /CD8 比值及外周循环T细胞亚群无变化。结论大剂量益生菌治疗大鼠实验性结肠炎有效,可能与免疫调节机制有关。     

代谢综合征组分及相关疾病在不同阶段结直肠肿瘤患者中的表现

目的 通过分析代谢综合征(MS)组分及相关疾病在不同阶段结直肠肿瘤患者中的表现,评价其与结直肠肿瘤发展的关系.方法 以2003年1月至2010年10月住院行内镜下或手术切除结直肠肿瘤的患者为研究组,并将研究组分为非进展性肿瘤组和进展性肿瘤组;以行结肠镜检查排除结直肠肿瘤和IBD的患者作为对照组.比较各组患者MS组分及相关疾病(肥胖、高血糖、高血压、血脂异常、高尿酸血症、非酒精性脂肪性肝病)的患病率,分析MS组分及相关疾病与不同阶段结直肠肿瘤的关系.统计学处理采用x2检验.结果 共有405例患者纳入研究,男女比为1.66∶1,其中菲进展性肿瘤组132例,进展性肿瘤组273例(包括36例原位癌或浸润癌).对照组76例,男女比为1.11∶1.研究组高血压患病率高于对照组[48.6％(197/405)比32.9％(25/76),x2=6.3851,P=0.0115].进展性肿瘤组高血压患病率(53.8％,147/273)高于非进展性肿瘤组(37.9％,50/132,x2=9.0809,P=0.0026)和对照组(x2=10.4406,P=0.0012),高血糖患病率(22.3％,61/273)也高于非进展性肿瘤组(13.6％,18/132,x2=4.2971,P=0.0382)和对照组(11.8％,9/76,x2=4.0894,P=0.0432).伴发≥1项MS组分的患者在研究组中占76.5％(310/405),高于对照组的63.2％(48/76,x2=6.0240,P=0.0141).伴发≥1项MS组分的患者在进展性肿瘤组中占81.0％(221/273),高于非进展性肿瘤组的67.4％(89/132,x2=9.0695,P=0.0026).伴发MS组分数量的增加与进展性肿瘤所占比例升高相关(x2=9.1508,P=0.0274).结直肠癌在伴发MS组分者的结直肠肿瘤患者中占10.6％(33/310),高于不伴发MS组分者的3.2％(3/95,x2=5.0334,P=0.0249).结论 伴发MS组分可能与结直肠肿瘤发展相关.     

白塞病胶囊内镜检查5例

白塞病(Behcet’s disease, BD)是一种原因不明的慢性多血管炎症性疾病,主要表现为反复口腔溃疡生殖器溃疡眼部损害及皮肤损害,并可累及血管、神经系统、消化道、关节、肺、肾、附睾等。白塞病累及消化道称为胃肠型白塞病,文献多称肠白塞病,全消化道均可受累。胶囊内镜作为一种无痛无创的检查方法,对小肠的病变有很高的检出率与诊断率。对具有消化系统症状的白塞病患者应行胶囊内镜检查,可全面评估小肠病变的部位及形态,弥补了胃肠镜的不足。现报道北京大学人民医院消化科5例完成胶囊内镜检查的白塞病,并进行文献复习,为临床工作提供一定参考。     

胆囊增生性病变136例临床分析

目的 探讨胆囊增生性病变的临床、影像和病理学特点以及影像与病理的关系,提高此类疾病的鉴别诊断水平.方法 回顾性分析2000年1月至2005年5月我院136例因胆囊息肉、胆囊腺肌症、胆囊癌住院手术患者的资料.对临床、影像及病理学特点进行分析.结果 胆囊增生样病变与胆囊癌比较,其上腹部疼痛率(22.1%)明显低于胆囊癌(68.2%).超声与手术结果比较,诊断正确率为88.5%.此组患者中胆固醇性息肉占66%,腺瘤性占17%,其他占17%.前者多发率为56%,后者多发率为26%,两者比较有显著性差异(P<0.05).胆固醇性息肉直径为(0.94±0.35)cm,腺瘤性息肉直径为(1.44±0.12)cm,两者比较有显著性差异(P<0.05).胆固醇性息肉的炎症及结石伴发率(85.1%,14.9%)明显高于腺瘤组(47.3%,0%),结石伴发率低于胆囊癌组(42%).1例腺瘤癌变者,直径为2.2cm.结论 超声是诊断胆囊增生性病变的经济可靠手段.多发小息肉(<1cm)多为胆固醇性,大息肉要考虑早癌的可能.胆囊癌的结石并发率高于胆囊其他病变.