斑马鱼模型评价抗真菌药物的耳毒性

目的利用斑马鱼模型研究三种抗真菌药物-氟康唑、联苯苄唑、制霉菌素-的耳毒性。方法1.分别探索三种药物的最大非致死浓度(MNLC)和10%的致死浓度(LC10);2.每种药物分别选取LC10、MNLC、1/3 MNLC和1/10 MNLC四个浓度进行研究。利用荧光立体显微镜和解剖显微镜观察并分析斑马鱼平衡囊、躯体形态及毛细胞数量的改变。5μg/mL的庆大霉素为阳性对照组,0.1%DMSO为阴性对照组,养鱼用水为空白对照组。结果1.氟康唑、联苯苄唑、制霉菌素三种药物的MNLC分别是653.8μg/mL、0.37μg/mL和10.5μg/mL。LC10分别是705.4μg/mL、0.52μg/mL和11.8μg/mL。2.三种药物均能导致斑马鱼平衡囊形态改变及身体屈曲。在LC10、MNLC、1/3 MNLC和1/10 MNLC四种浓度下,氟康唑组斑马鱼毛细胞损伤率分别为99%、95%、30%和28%;联苯苄唑组分别为94%、87%,、63%和49%;制霉菌素组分别为99%、89%、83%和25%。庆大霉素组斑马鱼毛细胞损伤率为55%。当与空白对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.001)。结论三种抗真菌药物均具有斑马鱼耳毒性,导致斑马鱼平衡囊形态发生改变并导致斑马鱼身体屈曲。三种药物均导致斑马鱼毛细胞数量的减少,并存在剂量依赖关系。     

紫草素诱导甲状腺髓样癌TT细胞自噬的实验研究

目的探讨紫草素能否诱导甲状腺髓样癌细胞发生自噬。方法采用透射电镜观察不同浓度紫草素对甲状腺髓样癌TT细胞发生自噬的形态。利用Western-blot分析紫草素作用甲状腺髓样癌TT细胞后自噬标志物Beclin-l和LC3蛋白的表达,利用荧光显微镜观察自噬标记蛋白LC3-Ⅱ的点状聚集情况。结果不同浓度紫草素作用24~72h对TT细胞均有自噬现象发生。2μg/m L、4μg/m L紫草素处理组作用24h后透射电镜观察TT细胞自噬的形态,发现TT细胞出现典型的自噬囊泡：双层膜包绕的圆形或椭圆形结构。紫草素处理自噬相关基因Beclin-l的表达明显低于空白对照组,参与自噬降解的p62表达水平下降,其下降水平与剂量呈相关性,自噬标记蛋白LC3-Ⅱ的表达明显提高。将TT细胞转染GFP-LC3质粒24h后,用紫草素处理24h,于荧光显微镜下观察,处理组与空白对照组相比,胞浆上出现大量的LC3-Ⅱ点状聚集。结论紫草素能诱导甲状腺髓样癌TT细胞发生自噬,透射电镜下可见自噬体,荧光显微镜下可观察到自噬特异性蛋白LC3-Ⅱ。紫草素诱导TT细胞自噬,可能与降低自噬抑制基因Beclinl表达水平相关。     

急性低频感音神经性听力下降的研究概述北大核心CSCD

急性低频感音神经性听力下降被认为是一种独立疾病,在突发性聋的发病中占比较高,预后最佳。目前该病病因未明,针对各项病因学说采取的治疗方法多样,及时有效的治疗往往能取得良好的效果,但仍有一定程度的复发性,甚至有进展为梅尼埃病的风险。