2277株大肠埃希菌的耐药性及TEM与SHV型β-内酰胺酶基因的研究

目的 了解大肠埃希菌的耐药性,尤其要了解TEM与SHVβ-内酰胺酶基因在产ESBLs大肠埃希菌的流行情况.方法 2006年1月-2008年11月医院分离的2277株大肠埃希菌用VITEK-32 GNI+鉴定,GNS-145和GNS-448检测对氨基糖苷类、β-内酰氨类、喹诺酮类等21种抗菌药物的耐药性,并对其中36株产ESBLs大肠埃希菌用聚合酶连反应(PCR)检测TEM和SHV基因型别的流行状况.结果 共检出1025株ESBLs阳性菌株,ESBLs检出率为45.0%;21种抗菌药物氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、头孢呋辛、氨曲南、头孢匹肟、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、复方新诺明,呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和头孢西丁耐药率分别为83.0%、74.0%、52.0%、52.0%、29.1%、27.8%、16.5%、47.0%、31.0%、54.5%、53.0%、56.8%,10.0%、53.9%、38.5%、5.0%、4.0%、5.0%和5.0%,未检出哑胺培南、美罗培南耐药株;36株产ESBLs大肠埃希菌PCR检测结果TEM阳性25株,SHV阳性14株,检出率分别为69.4%和38.9%.结论 大肠埃希菌耐药性严霞,尤其足产ESBLs大肠埃希菌存在着严重的多药耐药性,产ESBLs大肠埃希菌菌株TEM和SHV基因检出率高,且与多药耐药关系密切.     

胃癌患者中血清淀粉样蛋白A的测定及临床意义

目的 利用蛋白质组学技术研究胃癌血清淀粉样蛋白A的变化及临床意义.方法 应用表面加强激光解析(SELDI)技术检测胃癌血清中相对分子质量11 100～11 900的一簇蛋白峰,采用高效液相色谱(HPLC)技术分离该簇蛋白,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)分析该簇蛋白的肽指纹图,经数据库搜索进行鉴定分析.结果 分析显示.相对分子质量11 100～11 900的一簇蛋白峰在胃癌患者血清中明显高于健康组(P<0.01),同时该蛋白峰的表达水平术后显著下降,经鉴定该簇蛋白峰为血清淀粉样蛋白A(SAA).采用ELISA方法进一步验证了胃癌血清中SAA的表达.结论 胃癌患者SAA对于监测胃癌具有重要意义,可能成为胃癌诊断和病情监测一个新的生物学标志物.     

产ESBLs大肠杆菌的耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解大肠杆菌的耐药性,尤其要了解产ESBLs大肠杆菌氨基糖苷类的耐药性及其修饰酶基因流行情况。方法2006年1～12月我院分离的大肠杆菌用VITEK-32GNI 鉴定,K-B法检测对氨基糖苷类、β-内酰氨类等18种抗菌药物的耐药性,并对其中17株产ESBLs大肠杆菌用聚合酶连反应(PCR)检测氨基糖苷类修饰酶aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ。结果产ESBLs大肠杆菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、氨曲南、头孢唑啉、头孢匹肟、头孢他啶、头孢曲松、环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、头孢西丁、呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、复方新诺明的耐药率分别为100%、100%、41.6%、100%、69.5%、30.5%、98.2%、81.0%、81.0%、79.6%、79.2%、34.4%、12.5%、7.1%、7.9%、5.4%、81.0%、,未见亚安培南耐药株,产ESBLs检出率为46.4%。其中17株产ESBLs大肠杆菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素的耐药率分别为52.9%(9/17)、100%(17/17)和100%(17/17)。氨基糖苷类酰基转移酶基因检出率以aac(3)-Ⅱ最高,占94.1%,aac(6′)-Ⅰb次之,占35.3%,ant(3″-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ较低,分别占11.8%和5.9%,其中1株表型耐药,但未检出以上基因。6株aac(6′)-Ⅰb阳性的大肠杆菌,经DNA序列测定,其中4株为经典型,1株为aac(6′)-Ⅰb-Cr型,另外1株为aac(6′)-Ⅰb新亚型。结论大肠杆菌耐药性较为严重,尤其是产ESBLs大肠杆菌多重耐药更为突出。氨基糖苷糖苷类修饰酶基因以aac(3)-Ⅱ最高,aac(6′)-Ⅰb次之,ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ较低,aac(3)-Ⅰ和aac(6′)-Ⅱ未检出。大肠杆菌氨基糖苷类修饰酶基因aac(6′)-Ⅰb至少存在3种型别,以经典型为主,同时存在aac(6′)-Ⅰb-Cr型和aac(6′)-Ⅰb新亚型。     

运用蛋白指纹图谱技术筛选类风湿关节炎患者血清特异性标志物

目的: 用纳米磁珠与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测类风湿关节炎(RA)患者血清蛋白质组,筛选候选蛋白标志物并建立诊断模型,初步探讨所建立的诊断模型在RA早期诊断中的临床意义。方法: 采用弱阳离子(WCX)纳米磁性微球捕获60例RA患者、35例骨性关节炎(OA)患者和36名健康体检者血清中的蛋白质。所获蛋白经PBSⅡ-C蛋白质芯片阅读仪绘制蛋白指纹图谱。这些蛋白指纹图谱经Ciphergen ProteinChip和Biomarker Wizard软件分析之后,再用Biomarker Patterns 软件进行识别,最终筛选出RA的特异性蛋白标志物,并优化组合建立诊断模型。结果: 在RA患者和对照组之间共找到33个差异蛋白峰(P<0.05)。其中质荷比(m/z)为15 715.5D、7 771.4D、8 959.4D、8 469.8D和8 710.8D的蛋白峰用于建立RA诊断模型。经双盲实验验证,该模型对RA诊断的敏感性为86.7%,特异性为90.0%。结论: 采用WCX纳米磁性微球联用MALDI-TOF-MS技术可检出RA患者血清中的特异性蛋白标志物,并建立敏感性和特异性均较高的RA诊断模型。     

胃癌患者中血清淀粉样蛋白A的测定及临床意义

目的 利用蛋白质组学技术研究胃癌血清淀粉样蛋白A的变化及临床意义.方法 应用表面加强激光解析(SELDI)技术检测胃癌血清中相对分子质量11 100～11 900的一簇蛋白峰,采用高效液相色谱(HPLC)技术分离该簇蛋白,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)分析该簇蛋白的肽指纹图,经数据库搜索进行鉴定分析.结果 分析显示.相对分子质量11 100～11 900的一簇蛋白峰在胃癌患者血清中明显高于健康组(P<0.01),同时该蛋白峰的表达水平术后显著下降,经鉴定该簇蛋白峰为血清淀粉样蛋白A(SAA).采用ELISA方法进一步验证了胃癌血清中SAA的表达.结论 胃癌患者SAA对于监测胃癌具有重要意义,可能成为胃癌诊断和病情监测一个新的生物学标志物.     

大肠埃希菌新的氨基糖苷类修饰酶基因型别研究

目的研究大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶基因aac（6’）-Ⅰb各亚型的流行情况。方法对氨基糖苷类修饰酶基因aac（6’）-Ⅰb阳性的菌株进行DNA序列测定，测得序列与已在美国国立生物信息中心（NCBI）登录的aac（6’）-Ⅰb基因家族序列比对，确定型别。结果6株aac（6’）-Ⅰb阳性的大肠埃希菌，经DNA序列测定，其中4株为经典型，1株为aac（6’）-Ⅰb—Cr型，另外1株为aac（6’）-Ⅰb新亚型。结论大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶基因aac（6’）-Ⅰb至少存在3种型别，以经典型为主，同时存在aac（6’）-Ⅰb-Cr型和aac（6’）-Ⅰb新亚型。     

微粒子酶免法检测HBV感染者血清学标志物的结果分析

目的探讨不同年龄组HBV感染者的感染情况及雅倍微粒子酶免法(MEIA法)试剂同国产ELISA法试剂的评价.方法MEIA法、ELISA法.结果HBV感染者各年龄组HBsAg与CORE含量无显著性差异(P＞0.05),而HBeAg的含量有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05).ELISA法试剂检测乙肝标志物同MEIA法试剂相比的结果符合率以HBsAg、Anti-HBs为最佳,而CORE、Anti-HBe符合率偏低.结论HBV感染者不同年龄组HBeAg含量有显著性差异,HBsAg与CORE最无显著差异;MEIA法试剂检测乙肝标志物优于ELISA法试剂.     

胃癌患者中血清淀粉样蛋白A的测定及临床意义

目的 利用蛋白质组学技术研究胃癌血清淀粉样蛋白A的变化及临床意义.方法 应用表面加强激光解析(SELDI)技术检测胃癌血清中相对分子质量11 100～11 900的一簇蛋白峰,采用高效液相色谱(HPLC)技术分离该簇蛋白,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)分析该簇蛋白的肽指纹图,经数据库搜索进行鉴定分析.结果 分析显示.相对分子质量11 100～11 900的一簇蛋白峰在胃癌患者血清中明显高于健康组(P<0.01),同时该蛋白峰的表达水平术后显著下降,经鉴定该簇蛋白峰为血清淀粉样蛋白A(SAA).采用ELISA方法进一步验证了胃癌血清中SAA的表达.结论 胃癌患者SAA对于监测胃癌具有重要意义,可能成为胃癌诊断和病情监测一个新的生物学标志物.