一个新的视网膜母细胞瘤结合蛋白的分子克隆和鉴定

视网膜母细胞瘤蛋白家族包括RB、p107和p130。RB是研究得最为广泛的家族成员,是肿瘤抑制基因。它与其结合蛋白发生作用,如与E2F转录因子结合形成RB-E2F-DNA复合物,则阻止了其它序列特异性的DNA结合蛋白与启动子元件接近,从而抑制基因的转录。 本文分子克隆和鉴定一个新的视网膜母细胞瘤结合蛋白,称"Rim”为蛋白。作者应用修改的酵母双杂交系统筛选所获得的克隆并进行EST同源搜寻,得到了一个包含有3＇和5＇UTR,编码897个氨基酸     

SSCP突变分析技术新进展

单链构象多态性是突变分析中的一项重要技术,近年来,在分辨率,自动化,高通量等方面有了较大改进,是现代分子遗传学研究中用于已知基因突变检测和未知基因突变筛查的一种非常有用的工具。     

人类端粒探针及其应用

应用酵母瑞粒功能,在酵母中克隆包括人类端粒的片段被称之为半-YAC克隆。这个策略导致了分离大量完整的人类杂色体末端片段。通过对半-YAC克隆的精确分析表明,绝大多数克隆包含有一长串多态性的亚端粒重复序列,这些序列为许多的染色体所共有。因此,半-YAC克隆本身并不能够作为诊断探针。为了进一步分离单个染色体所特有的序列,作者采用了下面几种方法:第一,带有所克隆的染色体最远端序列的半-YAC载体-插入子接头     

用荧光原位杂交和聚合酶链反应技术鉴定无精症患者标记染色体的来源

目的　研究无精症患者标记染色体的来源 ,对无精症患者进行明确的遗传学诊断。方法　应用双色荧光原位杂交 (fluorecence in situ hybridization,FISH)和聚合酶链反应 (polymerase chain reaction,PCR)技术对 2例无精症患者进行了分子细胞遗传学和分子遗传学检测。结果　确定了两例特发性无精症患者的标记染色体均来源于 Y染色体 ,确定其核型为 :4 6 ,X,·ish del(Y) (q11) (DYZ3+,DXZ1- )。结论　 FISH结合 PCR技术是鉴定标记染色体来源的又一非常重要方法     

UBE3A基因的研究进展

本文对UBE3A基因及其所编码的蛋白 :遍在蛋白 蛋白质连接酶E3A的结构及功能 ,UBE3A基因突变导致Angelman综合征等进行了综述。     

染色体涂染技术及其在染色体病诊断中的应用

染色体涂染（ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｐａｉｎｔｉｎｇ）技术是用染色体特异性或染色体区带特异性ＤＮＡ文库作为探针池，与中期分裂相染色体（或间期核）进行荧光原位杂交（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＦＩＳＨ）和染色体原位抑制（...     

粘多糖贮积症Ⅱ型患者IDS基因的一个新突变

目的　研究粘多糖贮积症 型 ( mucopolysaccharidosis type ,MPS )患者的艾杜糖 - 2 -硫酸酯酶 ( iduronate- 2 - sulfatase,IDS)基因的基因突变。方法　应用聚合酶链反应 -单链构象多态性( polymerase chain reaction- single strand conformation polymorphism,PCR- SSCP)对患者的 IDS基因可能的常见突变第 2、3、5、7～ 9外显子进行检测 ,并对 PCR- SSCP检出的突变进行直接测序 ,测序发现的突变进行 PCR-限制性酶切分析验证。结果　经 PCR- SSCP和 DNA序列分析发现该患者的第 7外显子发生新的点突变 ( G12 5 3T) ;聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性 ( PCR- RFL P)电泳检测示患者和母亲出现突变导致的酶切位点 ,进一步验证了序列分析结果。结论　筛查所得的点突变 G12 5 3T可能是该 MPS 患者的致病原因     

小儿遗传性肾病综合征

遗传性肾病综合征是一类主要在小儿中发生的临床疾病。它主要有芬兰型先天性肾病,特发性类固醇抵抗性肾病综合征,病灶节段性肾小球硬化征和弥散性肾小球硬化征等类型。本文综述了该类疾病的基因定位与克隆研究进展、应用及未来展望。     

后基因组计划中的蛋白组分析新方法——多重色谱与质谱

双相聚苯稀酰氨凝胶电泳(2DPAGE)与质谱(MS)是分辨和鉴定蛋白的最常用的方法,但也存在有缺点。本文介绍一些分离和鉴定蛋白质的新方法,包括用高效液相色谱(HPLC)、毛细管等电聚焦(CIEF)、毛细管电泳(CE)或微毛细管色谱的1D和2D色谱方法等。     

DNA甲基化在法医学中的研究进展和应用现状

目前表观遗传学在各个领域展开深入研究, 因其不以DNA序列改变为前提的特殊遗传模式, 而在法医学中具有很高的应用和研究价值。在表观遗传学中, DNA甲基化作为发现最早且研究最多的表观遗传现象, 其为解决同卵双生子的鉴别、年龄的推断、组织体液的推断等法医学实践问题提供了新的思路和方法。本文将对法医学中DNA甲基化的常用检测方法进行总结和归纳, 并对DNA甲基化在同卵双生子的鉴别、年龄的推断和组织体液的推断中的研究进展和应用现状进行阐述。以此展示了DNA甲基化和法医学的密切联系, 并对其在法医学领域中的研究价值和应用前景进行了讨论。