转染自体胃癌细胞总RNA的树突状细胞诱导个体化免疫治疗的体外实验

目的探讨转染自体胃癌细胞总RNA的树突状细胞(DC)体外介导抗胃癌的免疫效应。方法制备短期培养的原代胃癌细胞。用rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α体外诱导胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中DC的发育和成熟,并转染自体肿瘤细胞总RNA,激活自体T细胞产生CTL,用CCK-8试剂盒检测CTL的杀伤活性。应用流式细胞术及混合淋巴细胞培养技术检测DC的免疫功能状态。用ELISA法测定IL-12和INF-γ的水平。结果转染自体肿瘤细胞总RNA的成熟DC,不仅可高表达MHC-I、II类分子及CD80、CD83和CD86协同刺激分子,并可获得高效刺激自体或异体T细胞增殖的能力。转染RNA的成熟DC,分泌IL-12的水平及其刺激产生的CTL培养上清液中INF-γ的水平显著高于单纯成熟DC及未成熟DC;且CTL对自体胃癌细胞的杀伤率显著高于异体组。结论转染自体胃癌细胞总RNA的成熟DC能够体外诱导产生对自体肿瘤细胞具有高度抗原特异性杀伤活性的CTL。     

阈值校正方式对PET脑显像统计参数图分析显示结果的影响

目的 探讨各种阈值校正方法对统计参数图(SPM)软件统计比较结果显示的影响.方法 利用Hoffman标准脑模型制作缺损模型PET成像与正常模型PET成像,进行统计参数图的统计比较.并选取脑梗死患者与健康检查者进行统计参数图的统计比较.结果 校正与非校正产生的结果有差异,其中族错误率(FWE)校正(P=5×10-2)得到的统计分析结果激活区最少及最小,其次是错误发现率(FDR)校正(P=5×10-2),非校正方式(P=1×10-3)得到的激活区最多及最大.但FDR校正效果不稳定,有时不如不校正.结论 统计参数图软件中FWE校正方法可明显降低假阳性,得到的结果可信度稳定地高于非校正方法.     

恙虫病东方体Sta56抗原的原核表达、纯化及其在间接ELISA中的应用

目的　构建含恙虫病东方体sta5 6基因的重组表达质粒 ,在E .coli中表达Sta5 6重组抗原 ,纯化后用于间接ELISA检测恙虫病。方法　从含有恙虫病东方体Karp株sta5 6基因的重组质粒TOPO sta5 6扩增出截短的sta5 6 ,定向插入pET30a载体 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,用SDS PAGE及Westernblot进行分析 ;采用电洗脱方法纯化重组抗原并应用于间接ELISA检测恙虫病。结果　以截短的sta5 6基因片段构建了重组表达质粒pETOt95 7,重组的Sta5 6抗原可在E .coli中以融合蛋白的形式有效表达 ,SDS PAGE显示了一条相对分子质量 (Mr)为 4 0 .3× 10 3 的蛋白表达带 ,West ernblot证实该融合蛋白能被恙虫病患者阳性血清所识别。电洗脱纯化的重组抗原应用于间接法ELISA检测恙虫病 ,与间接免疫荧光法IFAT比较 ,其敏感性和特异性分别为 91.7%和 76 .5 %。结论　在大肠杆菌中表达的Sta5 6重组抗原具有免疫反应性 ,纯化后可用作免疫诊断试剂。     

层粘连蛋白受体、Ⅳ型胶原的表达及微血管密度与乳腺癌转移的关系

目的：探讨乳腺癌组织层粘连蛋白受体（LN－R）、Ⅳ型胶原（Col Ⅳ)、间质微血管密度与乳腺癌淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组织化学S－P方法标记82例乳腺癌组织中LN－R、Col Ⅳ、FⅧRAg，并在第Ⅷ因子相关抗原（FⅧRAg)标记切片上计算微血管密度（MVD）。结果：LN－R表达强度及MVD的高低在乳腺癌有淋巴结转移组和无淋巴结转移组间有差异；ColⅣ在两组间无差异。结论：乳腺癌间质微血管密度增加及LN－R表达增强可作为预测肿瘤转移及判断预后的指标。     

体外灌流慢性重型肝炎患者血浆对C3A细胞的细胞色素P4503A活性和表达的影响

目的：通过比较未经灌流处理的重肝血浆及处理过的重肝血浆对CYP3A的影响，阐明C3A细胞安定代谢变化的原因，为未来C3A细胞的改造与功能优化奠定基础。方法：制备血浆和培养C3A细胞；实验分为4组：正常胎牛血浆（NFBP）组，正常人血浆（NHP）组，体外灌流慢性重型肝炎患者血浆（HPP）组，体外未灌流慢性重型肝炎患者血浆（CSHP）组。用分光光度法测定红霉素N-脱甲基酶（ERD）活性即CYP4503A的活性，Western blot法测定CYP4503A4的表达。结果：CSHP组ERD活性低于NFBP组（P〈0．05）及NHP组（P〈0．05），HPP组ERD活性也低于NFBP组（P〈0．05）及NHP组（P〈0．05），HPP组ERD活性高于CSHP组（P〈0．05）；CSHP组CYP4503A4的表达低于NFBP组（P〈0．05）及NHP组（P〈0．05），HPP组CYP4503A4的表达也低于NFBP组（P〈0．05）及NHP组（P〈0．05），HPP组CYP4503A4的表达高于CSHP组（P〈0．05）。结论：经慢性重型肝炎患者血浆培养的C3A细胞，CYP4503A活性及蛋白表达降低。与之相比，经过体外灌流的慢性重型肝炎患者血浆其C3A细胞CYP4503A活性及蛋白表达有所增加，CYP4503A活性增加可能是导致安定代谢变化的原因。     

肠腔静脉人工血管C型分流术的远期疗效观察

目的 探讨肠腔静脉C型分流术治疗食管胃底静脉曲张破裂出血的远期疗效。方法 对成阳市中心医院肝胆外科1992年以来施行的36例肠腔静脉C型分流术的临床资料进行总结分析。结果 36例患者术后门静脉压平均下降1．51kPa，胃镜检查食管静脉曲张均有明显减轻或消失。术后再出血率5．6％，肝性脑病发生率8_3％，术后1年、3年、5年及10年的生存率分别为97．2％、93．3％、89．3％及66．7％。结论肠腔静脉C型分流术手术适应证广，操作简单，近、远期疗效满意，适于推广。     

血流切应力变化导致颈总动脉重建及其对血管平滑肌细胞凋亡和分化的影响

目的　探讨动脉血流切应力变化对动脉壁形态结构、零应力状态以及血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMC)凋亡和去分化的影响。方法　结扎大鼠左侧颈总动脉的部分分支，使血液全部经由枕动脉流出，造成左颈总动脉(LCA)低血流和低切应力以及对侧右颈总动脉(RCA)高血流和高切应力状态，以假手术不结扎动脉的动物为正常对照。取LCA和RCA，光镜和透射电镜观察血管壁组织形态学变化；测量血管零应力状态下的张开角；TUNNEL法进行原位细胞凋亡检测；免疫印迹法检测VSMC表型分化标志分子hl-calponin的表达。结果　术后7d，低切应力LCA的内径减小了13%左右，壁厚内径比显著增加，张开角显著减小；内皮下层明显增厚，VSMC凋亡数量显著增加，VSMC表型分化标志分子hl-calponin的表达量显著降低。结论　血流切应力显著降低会在短期内引起血管重建，提示VSMC凋亡和去分化可能是低血流和低切应力导致血管重建的早期事件之一。     

不同时间犬缺血心肌对^99Tc^m-MIBI摄取比值的观察

目的：观察犬冠状动脉左旋支狭窄后心肌细胞对^99碍^m-甲氧基异丁基异腈（^99Tc^m-MIBI）摄取与时间变化之间的关系。方法：建立犬冠状动脉左旋支狭窄模型（12只），分别注射^99Tc^m-MIBI，剂量为185MBq（5mCi）。注射1h和4h后，各处死6只犬，取出心脏，于左室侧壁（缺血区）和前壁（正常区）分别取心肌组织约100rag，用1计数器测定其放射性计数，换算成每克组织放射性计数值，求出侧壁与前壁放射性比值。结果：注射后1h犬左心室缺血区与正常区组织放射性计数比值为0．726±O．054，4h为0．673±0．080，两者之间比较差鼻无昂薯件（t=1．3452．P〉0．05）．结论．砸长时问不能摇高按血心肌对辨^99Tc^m-MIBI梧取比．     

支气管肺炎患儿治疗前后血清IGF-Ⅱ和CRP测定的临床意义

目的：探讨了支气管肺炎患儿血清中胰岛素样生长因子-Ⅱ（IGF-Ⅱ）和C反应蛋白（CRP）水平的变化及意义。方法：分别应用放免法和免疫法测定了33例支气管肺炎患儿血清中IGF-Ⅱ和CRP，并与35名正常儿作比较。结果：在治疗前血清IGF-Ⅱ和CRP水平非常显著地高于正常儿组（P〈0．01-0．001），经治疗后一周则与正常儿组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论：测定支气管肺炎患儿血清中IGF-Ⅱ和CRP水平对疾病的治疗和预后有十分重要的临床价值。     

血清甘油三酯含量与HDL亚类组成的关系

目的：探讨血TG含量对HDL亚类组成及含量的影响。 方法： 采用双向电泳－免疫印迹检测法按血清TG含量分层，分析了106例TC正常及147例高TC受试者血清HDL亚类组成及含量。 结果： 无论TC正常或高TC人群，血清小颗粒的per-β1-HDL含量在TG边缘性高（TC正常人群除外）、高TG以及TG极高亚组显著高于相应TG正常组 (P＜0.05及P＜0.01），而且颗粒较小的HDL3b及HDL3a含量也有相似的变化，其中高TG人群HDL3b在TG极高组，HDL3a在TG升高的各亚组均显著高于TG正常亚组(P＜0.05及P＜0.01）；与此相反，大颗粒的HDL2b在高TG组和TG极高组显著少于相应的TG正常亚组（p＜0.05），HDL2a也在高TC人群的TG极高组显著少于TG正常亚组（P＜0.05）。此外，与TC正常的相应亚组比较，高TC人群的per-β1-HDL（TG边缘性高亚组）及HDL3b（TG极高亚组）显著高于TC正常人群的相应亚组（P＜0.05及P＜0.01）。 结论： 随着TG、TC水平的升高，血清HDL颗粒呈变小趋势；TG、TC含量变化是影响HDL亚类组成的重要因素。