雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体表达的研究

目的：研究雌性大鼠一生中成骨细胞内雌激素受体(ER)表达水平的变化规律。方法：采用二次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养大鼠成骨细胞并进行鉴定,应用半定量Western blot对不同月龄雌性Wistar大鼠成骨细胞内雌激素受体进行检测。结果：ER表达在1、2月龄组呈低度表达,3月组ER开始呈现上升趋势,至8、9、10月组ER达到高峰,10月组以后表达呈现下降趋势。结论：ER表达在不同月龄大鼠呈规律性分布,雌激素受体的表达应与雌激素水平是相一致的。     

SPOC教学模式在骨外科临床医学教学中的应用研究

我国住院医师规范化培训及临床教学存在培训学员及临床实习学员缺乏近距离观摩、亲手实践的机会以及临床带教教师数量不足的问题,而依靠填鸭式教学模式根本达不到基础理论与实践相结合的教学目的;同时,由于受手术无菌要求、临床治疗效果及现今医患关系紧张的影响,住院医师规范化培训学员及临床实习学员缺少现场观摩和实际动手操作机会,这些都成为阻碍临床医生成长的壁垒,而SPOC教学模式可以很好地解决这些问题。     

雌激素、促性腺激素与大鼠成骨细胞雌激素受体β的表达

目的：观察不同剂量雌激素，卵泡雌激素及黄体生成素对大鼠成骨细胞雌激素受体β表达的影响。方法：实验于2004-02／08在哈尔滨医科大学第二临床医学院科研中心完成。①取三四个月龄雌性Wistar大鼠28只用于大鼠成骨细胞体外培养。采用二次酶消化、反复贴壁法分离纯化培养大鼠成骨细胞。观察其形态、改良钙钴法碱性磷酸酶染色，培养上清碱性磷酸酶、骨钙素测定来鉴定成骨细胞。②取2代培养的成骨细胞用无血清培养基培养24h，分为10组：对照组，1&;#215;10^10，1&;#215;10^-8，1&;#215;10^-6mol/L 17β-雌二醇组，10，100，1000U／L黄体生成素组，1&;#215;10^-7,1&;#215;10^-6，1&;#215;10^-5g／L卵泡刺激素组。每组3个孔。对照组加入基础培养基，其他各组分别加入相应终浓度药物，培养24-48h。大鼠成骨细胞雌激素受体表达阳性细胞数检测应用免疫组织化学法测定，以细胞浆有棕黄色颗粒沉积为阳性。成骨细胞雌激素受体β表达检测应用半定量免疫印渍酶促底物染色法以及化学发光法，以A值越高，说明雌激素受体β表达越多。结果：①成骨细胞形态及特征性鉴定：成骨细胞随培养时间的延长，细胞呈指数增长，分泌碱性磷酸酶和骨钙素，碱性磷酸酶染色阳性率为90％，表现出旺盛的分泌功能。②成骨细胞雌激素受体表达阳性细胞数检测结果：不同剂量卵泡刺激素组和黄体生成素组对雌激素受体表达无明显影响；雌激素1&;#215;10^-8mol／L组和1&;#215;10^-6mol/L组显著高于对照组[(90．95&;#177;5．89)，(95．12&;#177;6．17)，(81．44&;#177;5.37)个数／100个细胞，τ=2．95，P&;lt;0．05；τ=3．50,P&;lt;0．01]。③成骨细胞雌激素受体β表达结果：不同剂量卵泡刺激素及黄体生成素对雌激素受体β的表达无明显影响；随雌激素浓度的增加成骨细胞雌激素受体β表达呈上升趋势。结论：雌激素能促进成骨细胞雌激素受体β的表达，且表现出剂量依赖性。而黄体生成素、卵泡刺激素对雌激素受体β表达无直接影响。     

骨陛关节炎滑膜组织中16种元素的分析

目的骨性关节炎（osteoarthritis,OA）是一种退行性骨关节病,该病病因和发病机制尚不明确。微量元素能通过参与人体内的新陈代谢、各种生物和化学反应等,维持机体正常生理活动,如果体内各种微量元素含量失调,就有可能引发多种疾病。本研究通过测定骨性关节炎滑膜组织中B、Mg、A1、K、Ca、n、Cr、Mn、Fe、Ni、Cu、Zn、Se、Sr、Ba、Pb等16种元素含量,探讨OA患者滑膜组织中这些元素的水平和疾病发生、发展的关系,为OA的机制研究和诊治提供相关的理论依据。方法选择骨性关节炎患者为实验组,单纯外伤引起的半月板损伤患者为对照组。术中采集患者滑膜组织样本,经微波消解处理,用电感耦合等离子体质谱（ICP—MS）测定组织中16种元素含量,数据经SAS9．0软件统计分析。结果实验组滑膜组织中硒（se）、铁（Fe）、锌（Zn）、铜（Cu）、硼（B）、钙（Ca）和钾（K）7种元素含量与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）,其中实验组滑膜组织中Fe、B、Se元素含量低于对照组,而Ca、K、Cu、Zn元素的含量高于对照组;锰（Mn）、铬（Cr）、锶（Sr）、镍（Ni）、钡（Ba）、铝（A1）、铅（Pb）、锑（Sb）、镁（Mg）元素含量没有明显变化。结论骨性关节炎患者滑膜中硒、铁、锌、铜、硼、钙和钾7种元素含量变化明显,这些元素都是机体的必需元素,它们可能通过影响蛋白质、酶的代谢导致骨性关节病的发生。     

维生素K2与骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症是一种骨量降低,骨组织微结构破坏,以骨脆性增加,骨强度下降,骨折风险增加为特征的全身骨骼系统疾病。近年来,随着老龄化人数的增加,骨质疏松症已经严重威胁了中老年人身体健康,成为人类社会共同关注的重要健康问题。据一项全国性流行病学调查显示,50岁以上男性骨质疏松症患病率为14．4％,女性升高到20．7％,60岁以上人群的患病率进一步升高。     

应对骨质疏松 维护骨骼健康

2010年我国第六次人口普查的结果显示：60岁以上人口数为1亿7千7百万,占总人口的13．26％,比2000年上升2．93个百分点;65岁以上人口数为1亿1千8百万,占总人口的8．87％,比2000年上升1．91个百分点。这个结果表明：我国已快速进入老龄社会。预计未来40年,到本世纪中叶,老龄、高龄人口数量会更加快速增长,人口形势严峻。     

应用鲑鱼降钙素及物理疗法联合治疗原发性骨质疏松症

目的观察鲑鱼降钙素（Calcitonin，CT）和低频脉冲电磁场（low frequency transduction pulsedelectromagnetic fields）治疗联合作用在治疗原发性骨质疏松症（primary osteoporosis）中的效果，比较联合作用与单纯应用药物所产生的效果的异同。方法将存在骨质疏松性骨痛同时经DEXA骨密度仪（BMD machines）检测T值低于标准值2．0以下的老龄原发性骨质疏松症患者76人随机分为两组：①单纯应用鲑鱼降钙素组（36人）；②联合应用药物及低频电磁场组（36人），两组同时每日给予钙而奇D600片1粒，CT按每日肌肉注射50IU，10d后改为隔日肌注50IU连续应用2个月，低频电磁场治疗采用天津金希统公司生产的XT2000B型OP治疗仪，频率为20～40Hz，每天治疗20min，共治疗30d，6个月后复查骨密度。结果两组均取得较好的镇痛效果（分别为84％和97％），同时骨密度均有所增加。结论联合治疗能够更进一步增加腰椎骨密度，在镇痛方面也能取得更好的效果。     

N-脱硫酸肝素对ICR雌性小鼠骨形态计量学的影响

目的探讨肝素诱发骨质疏松症的发病机理。方法ICR雌性小鼠共30只分成3个实验组，普通肝素组和N-脱硫酸肝素组各10只，分别按1IU／g．day给予药物；生理盐水组10只，给予同体积的生理盐水。自12w月龄开始每日皮下注射，28d后心脏采血，检测PT及APTY；取双侧胫骨，制成组织切片，AIJP和TRAP染色计数成骨细胞和破骨细胞；使用图形处理软件测量兴趣区域（AOI）的骨小梁长度和面积等，结果进行t检验。结果普通肝素组与N-脱硫酸肝素组在骨小梁面积、成骨细胞计数、破骨细胞计数方面两组之间比较无显著性差异，而与生理盐水组之间存在显著性差异（P〈0．05）；N-脱硫酸肝素组与普通肝素组在PT、APTT方面均存在显著性差异（P〈0．05）。结论N-硫酸基团在普通肝素的体内抗凝血作用中起重要作用，但是该基团与诱导骨质疏松的形成之间缺乏明显的相关性。     

PDGF-BB对成年雌性大鼠成骨细胞雌激素受体α蛋白质表达影响的实验研究

目的通过研究PDGF—BB与ERα的关系，探讨PDGF—BB在骨代谢中的作用机理，并对其在骨质疏松症中的应用前景进行展望。方法①利用酶消化法分离培养成年雌性大鼠的成骨细胞；②对培养的成骨细胞及其雌激素受体α进行鉴定；③分别加入浓度为0ng／ml、0．1ng／ml、1ng／ml、10ng／ml的PDGF—BB，共同培养7d，并设阳性对照组和阴性对照组；④Western blotting化学发光法检测ER蛋白质，GIS-2010凝胶图象处理系统分析结果。结果①培养的细胞为成骨细胞，免疫组化显示ERα位于胞核；②SDS-PAGE电泳显示在66kD处有清晰的蛋白条带；③Western blot显示10ng／ml组、1ng／ml组、0．1ng／ml组ER。蛋白条带较0ng／ml组清晰，且10ng／ml组最明显。结论PDGF—BB具有促进成骨细胞雌激素受体α蛋白表达的作用，雌激素受体α蛋白含量随着PDGF—BB浓度的增加而呈增加的趋势。     

鄂温克族骨性关节炎患者血浆中21种微量元素分析

目的探讨鄂温克族骨性关节炎患者血浆中21种微量元素的含量水平。方法采用0.3 ml HNO_3+0.3 ml H_2O_2混合消解液消化血浆样品,用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定血浆中Li、Mg、Al、Ca、Ti、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、As、Se、Sr、Mo、Cd、Ba、Tl、Pb等21种微量元素,用t检验方法统计分析。结果病例组和对照组血浆中6种元素(Ti、V、Ni、As、Mo、Tl)低于方法的定量检出限;其他15种元素均检出,其中,病例组血浆中4种元素Al,Ca,Cr,Cd的含量低于对照组;11种元素Li,Mg,Mn,Fe,Co,Cu,Zn,Se,Sr,Ba,Pb的含量高于对照组,且Co和Pb含量在两组间比较具有统计学意义(P0.05)。结论鄂温克族骨性关节炎患者血浆中微量元素普遍高于正常对照水平,且Co与Pb元素水平与骨性关节炎患者发病存在潜在的相关性。