用于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法***

背景：甲醛固定石蜡包埋的标本易于保存,免疫荧光法定位定量能精确支持多种标记物。 目的：建立适合于甲醛固定石蜡包埋组织的改良免疫荧光法。 方法：将取自类风湿性关节炎和无骨性关节炎患者的滑膜血管翕和髋臼增生组织的石蜡切片进行常规脱蜡复水,观察不同的柠檬酸缓冲液热修复时间、血清封闭时间、一抗浓度和荧光标记物在免疫荧光法中显色的差异。 结果与结论：柠檬酸高温修复15 min后滴加抗原修复液比单纯高温修复10~20 min,组织结构保存更为完整,且背景染色无显著区别;选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40 min作为最佳的抗原封闭条件,既可以保证良好的封闭效果,同时又不影响一抗和抗原位点结合;较高一抗浓度(10 mg/L)能保证明显的荧光信号、低背景和可接受的成本。进行石蜡切片免疫荧光实验,并用普通荧光显微镜观察,应避免采用FITC等蓝色激发光、呈现绿色荧光信号的标记染料基团。提示柠檬酸高温修复15 min后滴加抗原修复液,选择体积分数10%二抗来源正常血清室温封闭40 min,较高一抗浓度,普通荧光显微镜观察可提高免疫荧光法的检测质量。     

河源市原发性高血压辨证分型特点初探

目的:调查河源市原发性高血压患者辨证分型特点。方法:选择2014年1月至2017年5月河源市中医院内科住院300例原发性高血压病患者,按《中药新药临床指导原则》的标准进行中医高血压病辨证分型,对不同证型进行分析。结果:河源市原发性高血压患者辨证分型特点:阴虚阳亢痰湿雍盛肝火亢盛阴阳两虚。肝火亢盛在合并脑病变方面概率高于其他型,而在合并心、肾病变方面概率低于其他型。结论:河源市高血压患者辨证分型以阴虚阳亢为主。     

胎儿宫内输血治疗的临床应用分析

目的 探讨胎儿宫内输血治疗的临床应用情况,分析宫内输血治疗与短期妊娠结局的相关性.方法 回顾性分析2017年1月～2021年5月于广东省妇幼保健院收治并进行宫内输血治疗的病例,分为胎儿存活组和非存活组,比较两组宫内输血的原因、输血量、输血次数、首次宫内输血孕周及宫内输血前后胎儿血红蛋白浓度(Hb)、红细胞比容(HCT)...     

小梁切除术或Ahmed阀植入术治疗新生血管性青光眼的疗效分析

目的：比较平坦部玻璃体切割术（PPV）、全视网膜激光光凝术（PRP）联合二期丝裂霉素C（MMC）小梁切除术或联合Ahmed阀植入术治疗新生血管性青光眼（NVG）的远期疗效。方法：回顾性病例对照研究。2009年6月至2013年1月就诊于常熟市第二人民医院眼科的NVG患者28例（29眼）,Ⅰ组13例（14眼）行PPV、PRP联合MMC小梁切除术;Ⅱ组15例（15眼）行PPV、PRP联合Ahmed阀植入术。术后随访4~6 年,观察2 组患者手术前后房角关闭状态、新生血管消退情况、滤过泡瘢痕化、眼压、手术成功率以及视力改变。采用配对或成组t 检验、Fisher精确检验以及 Mantel-Cox生存分析对数据进行统计分析。结果：2组患者房角粘连性关闭程度、术后新生血管消退速度比较差异无统计学意义。2 组术后视力均有所提高,但差异无统计学意义,且随访期间视力稳定。术后48 个月,Ⅰ组滤过泡均瘢痕化而Ⅱ组有6 眼存在盘周滤过泡。2 组间手术前后眼压差异无统计学意义,术后眼压均低于术前（均P ＜0.001）。在术后18 个月时2 组间手术成功率差异无统计学意义,但在术后48 个月时差异有统计学意义（χ2=5.093,P =0.024）。结论：PPV、PRP联合二期MMC小梁切除术或Ahmed阀植入术均能有效治疗NVG,而PPV、PRP联合Ahmed阀植入术的远期成功率较高。     

波形蛋白在不同病理亚型肾癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测波形蛋白(vimentin)在不同病理类型肾细胞癌(RCC)组织中的表达并探讨其临床意义.方法:采用免疫组化PV-6000法检测152例手术切除的RCC组织和12例癌旁肾组织中波形蛋白(vimentin)的表达,分析vimentin表达与RCC临床病理特征的相关性.结果:vimentin在正常肾组织的阳性表达率为8.3%,在RCC组织的阳性表达率为76.3%,组间差异有统计学意义(P<0.05).vimentin在透明性肾细胞癌(ccRCC)、乳头状肾细胞癌(PRCC)和嫌色性肾细胞癌(CRCC)组织中阳性表达率分别为88.6%(101/114)、72.2%(13/18)和11.8%(2/17),其在ccRCC和PRCC的阳性表达均高于CRCC,组间差异均具有统计学意义(P<0.05).vimentin阳性表达与ccRCC的组织学分级和临床分期无明显相关性(P>0.05).结论:波形蛋白的表达与肾癌病理类型关系密切,提示vimentin可辅助RCC的病理分型鉴别诊断.波形蛋白在透明性肾细胞癌普遍高表达,提示其在ccRCC的诊断上有一定意义,但尚不足以评估ccRCC的恶性程度.     

五种出血热病毒重组酶聚合酶等温扩增方法的建立

目的 建立五种出血热相关病毒,即扎伊尔型埃博拉病毒、苏丹型埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙病毒和黄热病毒的一步法重组酶聚合酶等温扩增(RPA)技术,为病原体的确定提供现场快速检测方法.方法 通过基因组序列分析,选择每种病毒的特异核酸片段作为检测靶基因,针对靶基因序列设计RPA检测的引物和探针;取系列稀释的模板基因进行RPA检测,确定其灵敏性;取出血热相关病毒核酸为模板进行RPA检测,确定其特异性;验证不同温度反应条件(37~42℃)对检测结果的影响.结果 五种出血热病毒的RPA反应体系均可有效扩增靶基因,灵敏性为1.5×102~1.5×103copies/反应,与其他出血热相关病毒的核酸无交叉反应;RPA实验在37~42℃均可实现靶基因的有效扩增.结论 建立了五种出血热病毒的RPA等温扩增体系,该体系反应快速,温度范围宽,适用于现场快速检测.     

灵芝乙醇提取物对A549肺癌细胞的作用及其机制

目的 探讨灵芝乙醇提取物(GLEE)抗肺癌的作用及其机制.方法 采用CCK-8法测定GLEE对肺癌A549细胞生长的抑制率;用荧光显微镜观察GLEE对细胞形态的影响;用流式细胞术观察其对细胞周期的影响;用AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞的凋亡情况.结果 当GLEE浓度为5～320 μg·mL-1时,A549...     

增强CT对进展期胃癌术前的评估价值

目的探讨增强CT在术前评估进展期胃癌TNM分期、切除范围及手术方式中的价值。 方法回顾性分析2014年3月至2015年5月收治的150例进展期胃癌患者的资料,均经手术病理证实。所有患者术前均行上腹部增强CT检查,据此评估肿瘤的TNM分期,决策手术方式及切除范围,以手术及病理结果为标准判断增强CT分期的准确度。 结果在CT评估TNM分期方面,T分期准确度分别为：T2期84.0%（126/150）,T3期76.7%（115/150）,T4期92.7%（139/150）;N分期脾门、脾血管及腹主动脉旁区淋巴结判断的准确度较高（96.3%、97.0%、94.8%）,胃小弯侧淋巴结有较高的敏感度（87.0%）和特异度（96.6%）;M分期总体准确度和敏感度分别为87.3%（131/150）、93.3%（126/135）。在CT评估切除范围方面,对近端、远端次全切及全胃切除术预测的准确度分别为87.9%（29/33）、88.6%（62/70）,72.7%（32/44）。在评估手术方式方面,腹腔镜辅助与开腹的准确度分别为87.7%（100/114）、85.7%（30/35）。 结论增强CT在判断淋巴结转移及远处脏器转移方面有较高的准确度,在决策术式及切除范围方面有重要的参考价值,应作为进展期胃癌术前的一项常规检查。     

葡多酚对肝癌细胞增殖活性与Ca2+浓度的影响

背景与目的:研究葡多酚(Grapeprocyanidins,GPC)对肝癌细胞增殖活性与细胞内Ca2 浓度的影响。材料与方法:将人肝癌细胞与10、50和100mg/L3组不同浓度的GPC共同培养,用MTT(Methylthiazolyltetrazolium,MTT)法测定肝癌细胞的增殖活性,用Fura_2荧光法测定细胞内Ca2 浓度。结果:肝癌对照组细胞增殖活性和胞内Ca2 浓度分别为(0.445±0.024)nmol/L和(130.53±17.48)nmol/L,3个GPC剂量组的细胞增殖活性随GPC剂量升高显著性降低,而Ca2 浓度则显著性升高(t>2.78,P<0.05),其中50和100mg/L组均达Ca2 超载状态。结论:GPC可降低人肝癌细胞的增殖活性,引发胞内Ca2 浓度异常升高。     

单孔胸腔镜肺结节手术后使用猪尾巴导管作为胸腔引流的效果评价

探讨猪尾巴导管用于单孔胸腔镜肺结节手术后胸腔引流的安全性和可行性。分析单孔胸腔镜肺结节手术患者,其中术后猪尾巴导管引流62例作为观察组,28Fr胸腔引流管引流66例作为对照组。研究发现单孔胸腔镜肺结节手术后使用猪尾巴导管进行胸腔引流能够有效减轻患者术后疼痛、减少引流量、缩短术后住院时间,且切口美观、不增加肺部并发症的发...