急性脊髓损伤动物模型的建立

随着工农业、建筑业及交通的发展,脊髓损伤（SCI）的发病率有逐渐升高的趋势。脊髓是许多神经功能的中介通路,脊髓损伤及其继发性病理生理反应可直接导致神经功能损伤,从而引起组织、器官功能障碍。由于脊髓损伤治疗困难,因而致残率与死亡率非常高。不仅患者本人要受功能废损带来的不便和痛苦,也给社会和家庭带来了沉重的负担。目前对脊髓损伤的研究相对缓慢,其治疗效果难以预料,主要是脊髓损伤的病理生理机制非常复杂,     

加味桃红四物汤对骨髓基质干细胞体外诱导的实验研究

目的研究加味桃红四物汤对骨髓基质干细胞早期促缺氧诱导因子（HIF-1）与血管内皮生长因子（VEGF）分泌的影响。方法骨髓基质干细胞取材,设置中药组及生理盐水组,观察HIF-1、VEGF表达。结果中药组对骨髓干细胞培养第2d HIF-1α表达量开始出现,第5、7天后中药组HIF-1α mRNA的表达量显著低于生理盐水组。而第3、5、7、14天VEGF表达中药组表达较生理盐水组强,在第5、7天VEGF表达达到峰值。结论加味桃红四物汤可以诱导骨髓基质干细胞向血管祖细胞分化,并促相关生长因子表达。     

选择性COX-2抑制剂对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响相关性实验研究

目的:在建立大鼠脊髓损伤模型基础上,不同时间点观察选择性COX-2抑制剂对脊髓胶质细胞,神经元凋亡的影响,以期为临床急性脊髓损伤的治疗提供理论依据。方法:健康成年大鼠72只,随机分为两组,其中单纯损伤组(单纯打击损伤)36只,COX-2组(手术加COX-2)36只。脊髓损伤动物模型的制备:用自制A1len打击器2 5gcm致伤力撞击脊髓,制成脊髓损伤动物模型。COX-2组每天肌注帕瑞昔布(5 mg/Kg)直至处死,单纯损伤组仍每天肌注生理盐水0.5 ml直至处死。常规制成脊髓切片,给于Bcl-2检测,TUNEL原位末端标记,检测大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的情况。结果:Bcl-2蛋白检测:在脊髓损伤后的第1天,脊髓组织即开始较高表达Bcl-2蛋白。单纯损伤组Bcl-2高峰发生在损伤后3天,而COX-2组伤后l天达到高峰,此时Bcl-2蛋白不仅表达在神经细胞中,更多的在胶质细胞中大量表达,且此状态一直维持到伤后14天才开始下降,伤后2l天仅少量表达;(P<0.05)。TUNEL原位标记检测:单纯损伤组24小时已山现不少阳性细胞,以胶质细胞为主,3～8天达到高峰,此后逐渐回落,但2l天时仍有阳性细胞,应用帕瑞昔布治疗后,凋亡细胞明显减少(P<0.05)。结论:本研究证明,选择性COX-2抑制剂在脊髓损伤中通过改善微循环,促进Bcl-2蛋白的表达,清除氧自由基,抗氧化作用能够抑制脊髓损伤早期神经细胞和胶质细胞的凋亡,从而减轻脊髓继发性损伤,促进脊髓神经功能的恢复。所以SCI后早期应用选择性COX-2抑制剂配合其它药物阻止神经细胞和胶质细胞的凋亡可能有助于减轻SCI的损害程度,促进脊髓神经功能的恢复,为SCI的治疗提供一个新的途径。     

RF系统治疗胸腰段不稳定骨折

RF(Reduction Fixation)系统是治疗胸腰段不稳定骨折的一种新方法,为国人设计的椎弓根螺钉系统。其角度螺钉有0°、5°、10°、15°四种。报告了15例RF系统在胸腰段不稳定骨折病人中的应用。认为其性能优于万向关节的AO(Dick)系统,Steffee系统。其优点:创伤小,固定坚强有力,有效安全地整复骨折椎体,恢复正常的脊柱力线,有利促进骨融合,术后护理方便,可提前下床,减少并发症发生。     

转导野生型p53的K562细胞出现生长抑制和凋亡

把重组有编码野生型p53的逆转录病毒载体转导到p53蛋白缺失的K562细胞,以观察野生型p53蛋白在K562细胞表达后对K562细胞增殖和凋亡的影响。应用RT-PCR和Western印迹杂交方法检测K562细胞p53表达,应用流式细胞仪计数检测细胞的增殖,采用梯形DNA和细胞形态学方法检测细胞凋亡变化。研究结果表明:感染pLXSN-p53病毒24小时后,K562细胞p53表达阳性,K562-p53细胞的生长受到抑制,少数细胞进入凋亡状态。结论提示,野生型p53可促进p53表达阴性的K562细胞生长抑制与凋亡。     

人类CC3配体样蛋白1在果蝇Schneider-2细胞的表达和活性分析

目的对HIV-1辅助受体趋化因子受体5（CCR5）配体人类CC3配体样蛋白1（CCL3L1）进行果蝇Schneider-2细胞融合蛋白表达，纯化后活性分析。方法克隆人类CCL3L1cDNA，构建CCL3L1表达载体pMT／BiP／His，获得Schneider-2果蝇细胞表达的His-CCL3L1融合蛋白，同时克隆pCDNA3．1-flag—CCR5表达载体，培养稳定表达flag—CCR5的细胞株，检测表达人趋化因子CCL3L1活性。结果成功构建人趋化因子CCL3L1融合蛋白真核表达载体pMT／BiP／His，表达并纯化出融合蛋白His—CCL3L1。免疫沉淀法和Western印迹法分析发现，纯化的His—CCL3L1蛋白能特异性结合CCR5受体，His—CCL3L1蛋白在浓度1～50nmol／L存在剂量依赖性，50～100nmol／L无剂量依赖性。结论果蝇Schneider-2细胞表达的His—CCL3L1蛋白具有与天然CCL3L1相同的生物学活性，为进一步探讨CCL3L1影响HIV-1感染的机制奠定了基础。     

K18及K18磷酸化改变与慢性HBV感染后肝脏疾病的关系

细胞角蛋白属于中间丝蛋白，是细胞骨架的构成部分。细胞角蛋白包括30多种分子，细胞角蛋白18（K18）是其中的一种类型，研究发现K18以及K18不同位点的磷酸化与肝脏疾病相关。K18高度磷酸化与肝脏疾病进展相关。     

循证护理对预防脑卒中昏迷患者胃肠道及呼吸系统感染效果研究

目的 观察循证护理对预防脑卒中昏迷患者并发胃肠道及呼吸道感染的疗效,以指导临床脑卒中昏迷病人的护理实践.方法 选取2009年4月～2013年5月来我院就诊的脑卒中昏迷患者82例,依据护理方法的不同将患者分为循证组和常规组各44例,循证组在常规治疗基础上对患者进行循证护理,常规组给予常规护理.结果 治疗前两组患者的检测指标无明显差异（P＞0.05）;治疗4周后,循证组的WBC、ESR、痰定量培养分离致病菌数、胸部CT示肺部阴影例数、血细菌培养阳性例数及鼻饲管引流液细菌培养阳性例数均明显低于常规组（P＜0.05）;循证组患者的脂类吸收率明显高于常规组（P＜0.05）.结论 应用循证护理方法对脑卒中昏迷患者进行护理可明显预防患者并发肺部及胃肠道感染的发生,为患者的康复奠定良好基础.     

急性肝损伤小鼠肝组织中的自噬现象

目的探讨在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)诱导的小鼠急性肝损伤模型中,肝脏组织的自噬情况。方法将60只雄性Balb/C小鼠随机分为5组(每组均包括实验亚组和对照亚组,各6只)。实验组小鼠腹腔注射LPS(100μg/kg)和D-GalN(350mg/kg)溶液,对照组小鼠只注射无菌等量生理盐水,分别于注射后2、4、8、12、24h处死小鼠,取其血液及肝脏。另取3只小鼠饥饿处理24h作为自噬阳性对照组。所有小鼠于处死前24h经高压尾静脉注射法注射溶于2ml生理盐水的GFP-LC3质粒100μg。生化法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;透射电镜、荧光显微镜下观察小鼠肝脏的自噬情况。结果各实验组血清ALT、AST水平均明显高于相应对照组(P<0.01)。透射电镜显示,实验组和自噬阳性对照组肝组织中可见大量肝细胞发生自噬。荧光显微镜下可见GFP-LC3绿色荧光蛋白。8、12、24h实验组及自噬阳性对照组每高倍镜视野下平均GFP-LC3荧光点数目明显高于对照组(P<0.01)。结论 LPS和D-GalN可诱导小鼠发生急性肝损伤,而自噬是这一过程中的重要形态学特征。