肝再生发生及其相关机制的研究进展

肝脏再生是指因手术、创伤、中毒、感染、坏死等致部分肝细胞功能丧失后,肝细胞重新修复的过程.对于肝再生的发生及其内在机制的认识和研究,大致可分为三个阶段:(1)最初认为可能存在一种特定的激素类物质决定肝再生的过程.     

猪内源性逆转录病毒透过生物人工肝的影响因素

目的 病毒安全性是猪源性生物人工肝(BAL)不可忽略的安全问题.本研究旨在探讨影响BAL中猪内源性逆转录病毒(PERV)透过的因素.方法 构建双循环的新型猪源性BAL.两循环间采用膜孔径为10 nm、20 nm、30 nm和35 nm的血浆成分分离柱以及500 nm膜孔径的血浆过滤柱分隔两循环.反应器内填充共培养的猪肝细胞-骨髓间充质肝细胞或原代猪肝细胞并连续循环72 h.每12 h抽取内、外循环内培养液检测PERV RNA、逆转录酶(RT)活性以及其体外感染性.结果 血浆过滤柱组中,内外循环内PERV检测结果完全相同,提示500 nm血浆滤过柱对PERV并无阻隔作用.在血浆成分交换柱各组中,各时间点内循环中均能检出RNA和RT活性,但是外循环中并未检出RT活性,而且随着膜孔径减小,RNA的检出时间逐渐延迟,且内循环RNA水平逐渐增加.各培养液均未发现能够体外感染HEK293细胞.结论 膜孔径、循环时间以及内循环病毒浓度是影响BAL中PERV透过的主要原因.     

骨髓间充质干细胞修饰治疗急性肝功能衰竭的研究进展

急性肝功能衰竭（acute liver failure,ALF）是一种临床综合征,其特征是由多种因素导致的急剧 肝细胞损伤。肝移植是治疗ALF的最有效手段,但受到器官来源短缺的限制。骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）由于其组织修复性和低免疫源性,近年来已成为治疗ALF的研究热点。但MSCs 移植只有少量细胞募集到受损组织,并且细胞移植后低细胞存活率显著制约其治疗效果。因此,对MSCs 进行修饰,对MSCs的培养条件进行优化将有助于提高MSCs移植的效能。本文就MSCs修饰治疗ALF的研 究进展及现状进行综述。     

壳聚糖纳米纤维电纺膜体外对肝细胞作用的研究

生物人工肝作为肝功能衰竭的一种有效支持手段,近年来得到很大的进展,但如何长期维持其中肝细胞的活性及功能一直是困扰人们的难题。纳米生物材料的应用为这一问题的解决提供了可能的方案。用静电纺丝的方法将壳聚糖制备成纳米纤维电纺膜,同时采用经典的两步原位胶原酶灌注法分离大鼠肝细胞,观察肝细胞在纳米纤维电纺膜表面的形态,同时检测其活性和功能。肝细胞在壳聚糖纳米纤维电纺膜表面展示了良好的活性,并能与支架材料紧密结合。其尿素合成、蛋白分泌及细胞色素P450的活性均为对照组的1.5~2倍,糖原合成也较对照组有明显增强。壳聚糖纳米纤维电纺膜能促进肝细胞黏附,同时具有良好的生物相容性,从而促进肝细胞的功能,是生物反应器中肝细胞黏附介质的理想材料。     

枯否细胞在肝移植脂肪供肝的缺血再灌注损伤中的作用研究进展

缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,IRI）是肝移植的常见危险因素,与早期移植肝的无功能和功能障碍密切相关。当发生IRI时,会产生大量的氧自由基和炎症因子,引起肝脏损伤,枯否细胞（Kupffer cells,KCs）的激活与其密切相关。同时,由于肝移植供肝的需求不断增多,脂肪供肝在肝移植中的使用越来越普遍。然而,脂肪供肝发生脂肪变性,导致脂质过氧化、ATP合成酶活性下降和微循环损伤等病理生理变化。这一方面使KCs加剧脂肪供肝的IRI,另一方面也影响其对肝脏的保护作用,使KCs的总体作用向损害肝脏的方向偏移。因此,探索KCs在肝移植脂肪供肝的IRI中的作用机制已成为亟待解决的问题。本文综述了KCs的形态、功能及其在肝移植脂肪供肝的IRI中发挥的作用。     

肝脏疾病类器官模型的研究进展

肝脏是人体内最大的代谢器官,在维持机体功能上发挥着重要的作用。肝衰竭、肝癌等肝脏疾病严重影响患者的生活质量与生命安全。肝脏模型的构建,以及基于此对肝脏病理生理机制的研究仍是目前研究的热点与难点。类器官是通过体外三维培养技术获得的小型组织,能够自我更新,并在体外培养或移植入体内后发挥特定组织器官功能,在肝脏疾病的研究及治疗上有着较好的适用性。本文综述了类器官的构成以及类器官在多种肝脏疾病模型构建中的应用。     

肝再生增强因子调控线粒体功能稳态在非酒精性脂肪肝炎中的作用研究

目的：研究非酒精性脂肪性肝炎 (non-alcoholic steatohepatitis, NASH) 中线粒体内肝再生增强因子（Augmenter of liver regeneration, ALR）与线粒体功能障碍之间的关系.方法：以不含脂肪酸的BSA处理作为对照组（BSA组）,利用0.2mM棕榈酸（Palmitic acid, PA）体外刺激正常人肝细胞系L-O2 24h诱导NASH模型（PA组）,通过油红染色、检测细胞活力、乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase,LDH）释放等指标验证细胞模型。通过质粒转染的方式构建肝再生增强因子过表达的细胞(ALR-OE组)以及空白对照组细胞(Vector组),两组细胞分别接受BSA处理和PA处理。CCK8法检测细胞活力、乳酸脱氢酶检测试剂盒检测脂毒性、JC-1染色分析线粒体膜电位、流式凋亡检测分析细胞凋亡比例以及Western Bolt检测ALR、Bax、Bcl-2、Cytochrome C等蛋白表达水平。结果：与BSA组相比, PA处理24h后细胞内脂滴堆积明显增多、细胞活力下降约50%、乳酸脱氢酶释放也增加了13倍,与此同时线粒体内ALR的表达则显著降低。此外,在BSA处理条件下Vector组和ALR-OE组脂毒性、线粒体功能以及凋亡等方面均无明显差异。而在PA刺激条件下,ALR-OE组相较于Vector组表现出对PA更强的耐受性:细胞活力增加了约16%,LDH释放则减少了约40%,另外受损的线粒体膜电位也明显恢复、细胞色素C的释放减少,同时细胞凋亡比例由19%下降至11.4%。 结论：ALR参与了PA诱导的NASH的发生的过程,靶向调控线粒体内ALR的表达可以阻止NASH的发生,其作用的机制可能是通过恢复线粒体功能稳态进而抑制线粒体依赖性的凋亡而实现的。     

巴马小型猪85%肝切除术后急性肝功能衰竭模型的建立

目的 探索不同比例肝切除体积对巴马小型猪急性肝功能衰竭的影响,为建立合适的小型猪大部分肝切除后急性肝功能衰竭模型提供合适的方法。方法 分别行75%、85%及95%肝切除,CT检查残留肝并记录存活情况,术前、术后 1、3、5 d和术后 1、2、3 周定期抽血检测肝功能,获取肝组织HE 染色,检查肝病理情况。结果 75%、85%及 95%肝切除小型猪平均存活时间为（19.0±5.6）d,（17.3±5.5）d,（1.3±1.5）d,不同肝切除比例的巴马小型猪病理学评分分别为（5.67±0.52）、（8.17±0.82）、（8.50±0.71）。随着肝切除比例增加,肝功能衰竭发病率升高。85%肝切除可引起谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、总胆汁酸水平显著增高。结论 85%体积肝切除可造成典型的小型猪急性肝功能衰竭模型。     

肠内营养联合生长抑素对胰腺手术患者康复的影响

目的:研究肠内营养联合生长抑素对胰腺手术患者康复的影响。方法:152例胰腺手术患者分为两组,每组76例,给予肠外营养支持为对照组,给予肠内营养支持为观察组,两组均联合生长抑素进行治疗。比较治疗前后两组血糖、血红蛋白、血清白蛋白水平,以及治疗后的氮平衡、肌酐(Cr)、皮质醇(Cor)和血浆胰岛素水平,观察两组恢复情况及并发症发生情况。结果:治疗后,两组血糖、血红蛋白和血清白蛋白水平均较治疗前明显升高(P<0.05),观察组升高程度明显高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患者的氮平衡、Cr升高指数及Cor水平均明显高于对照组,血浆胰岛素水平明显低于对照组(P<0.05)。观察组术后恢复情况及并发症发生情况均优于对照组(P<0.05)。结论:肠内营养联合生长抑素可加速胰腺手术患者的术后康复,值得临床采用。     

肝癌肝脏移植的价值与争议

我国是肝癌高发国家,肝癌的治疗是提高国民健康水平的重要一环。肝移植治疗肝癌的效果目前已得到全世界肯定,是公认的肝癌根治性治疗方式。但肝癌肝移植仍有许多待解决的问题和争议。作者就多年的临床经验和文献学习,对肝癌肝移植的价值和争议进行简单论述。