Erbin表达缺失诱导MDA-453人乳腺癌细胞对曲妥珠单抗耐药

目的：探索Erbin表达缺失导致Her2阳性的人乳腺癌细胞MDA-453对曲妥珠单抗敏感性的影响。方法设计、构建含人Erbin基因特异性的短发夹RNA（ shRNA）及对照shRNA的干扰载体,转染MDA-453人乳腺癌细胞。经G418加压筛选,获得稳定敲低Erbin的MDA-453细胞（ MDA-453-Erbin sh）和稳定表达对照shRNA的MDA-453细胞（ MDA-453-NC）,以后者作为对照细胞。应用Western印迹法检测MDA-453-NC和MDA-453-Erbin sh细胞中Erbin表达水平。分别通过细胞增殖活性实验及细胞集落形成实验,观察敲低Erbin的MDA-453细胞对曲妥珠单抗敏感性的变化。通过免疫组化染色法,分析Erbin在人乳腺癌及正常乳腺组织中的表达。结果建立了稳定敲低Erbin的MDA-453细胞株,发现敲低Erbin表达可诱导MDA-453细胞对曲妥珠单抗产生抗性。与正常乳腺上皮组织相比,人乳腺癌组织标本中Erbin表达水平降低。结论 Erbin表达缺失可能影响乳腺癌对曲妥珠单抗治疗的敏感性。     

肿瘤免疫细胞治疗：前景与挑战

免疫细胞治疗通过修复患者机体免疫系统、激发免疫功能成为肿瘤的一种新的治疗方法,已经被证实具有较好的安全性,在部分肿瘤患者中取得了良好的治疗效果。本文聚焦近年来国内外开展的CAR-T细胞、TCR-T细胞、NK细胞、TIL等免疫细胞治疗方法在肿瘤中的临床安全性和有效性,同时从技术、产业化、政策等三个层面,提出中国免疫细胞治疗领域存在的关键问题、挑战及相应的解决策略,包括原创性基础理论研究的加强,新技术的应用和转化,细胞产品制备及临床研究的规范,先进的自动化、工业化细胞生产工艺体系的完善,细胞治疗产业上游产品保障,创新能力强的高水平科研、临床研究队伍的培养和壮大,以及与细胞治疗技术发展相适应的政策法规、科学监管体系的建立和完善等。这些问题的解决,可确保中国免疫细胞治疗的良性发展。     

重组腺病毒载体介导的人野生型p53基因增强肝癌细胞对化疗药物的敏感

目的：观察表达人野生型和p53,GM－CSF和B7－1基因的重组腺病毒载体（BB－102）提高肝癌细胞对化疗药物的敏感。方法：BEL－7402,HLE和HuH-73株肝癌细胞被50MOI的BB－102转染后,Western blot检测p53基因的表达,MTT方法检测肝癌细胞对化疗药物的敏感性。结果：当MOI为50pfu／细胞时,腺病毒载体对3株肝癌细胞的转染的效率均达到80％以上。转染BB－102后,LHE和HuH-7细胞对顺铂的敏感性分别提高11倍和28倍,对丝裂霉素－3的敏感性分别提高3．75倍和20倍,而BB－102的转染对BEL－7402细胞的化疗敏感性没有影响。结论：BB－102腺病毒载体转染后能显著提高p53基因突变的HEL和HuH-7细胞对顺铂和丝裂霉素－C的敏感性,因而增强顺铂和丝裂霉素－C对HLE和HuH-7细胞的杀伤作用。     

重组腺病毒载体介导的人野生型p53基因增强肝癌细胞对化疗药物的敏感性

目的： 观察表达人野生型p53,GM-CSF和B7-1基因的重组腺病毒载体（BB-102）提高肝癌细胞对化疗药物的敏感性。方法： BEL-7402,HLE和HuH-7 3株肝癌细胞被50 MOI的BB-102转染后,Western blot检测p53基因的表达,MTT方法检测肝癌细胞对化疗药物的敏感性。结果： 当MOI为50 pfu/细胞时,腺病毒载体对3株肝癌细胞的转染效率均达到80％以上。转染BB-102后,HLE和HuH-7细胞对顺铂的敏感性分别提高11倍和28倍,对丝裂霉素-C的敏感性分别提高3.75倍和20倍。而BB-102的转染对BEL-7402细胞的化疗敏感性没有影响。结论： BB-102腺病毒载体转染后能显著提高p53基因突变的HLE和HuH-7细胞对顺铂和丝裂霉素-C的敏感性,因而增强顺铂和丝裂霉素-C对HLE和HuH-7细胞的杀伤作用。     

利用噬菌体随机15肽库确定SLE相关多肽的研究

目的 利用噬菌体随机15肽库确定SLE相关多肽。方法 从系统性红斑狼疮（SLE）病人血清中纯化抗dsDNA多克隆抗体,以此为筛选配基,对噬菌体随15肽库进行亲和筛选。结果 经3轮筛选,每轮的投入／产出比逐轮升高,提示筛选具有良好的富集效果。第3轮筛选后选其中18个克隆重进行结合试验,结果显示有6个公与SLE病人血清反应而不与正常人血反应,经DNA序列测定,发现其中5个克隆相同,通过该序列推出插入的外源短肽序列,合成并纯化该肽段。用此肽段分别与20例SLE病人及20例正常人血清反应,结果差异有显著性。结论 该肽段可能是与SLE相关的抗原多肽。     

饮食和食物中的硒

硒推荐的日摄食量（RDA）业已提出，而估量人硒摄入量并非易事。常用方法是直接测定餐饮食品硒含量、膳食调查和血液等生物样品分析三种方法。土壤硒浓度及其地质类型是食物硒含量的主要决定因素，烹调加工可影响饮食硒含量。经20余年研究全球一些国家和地区人群硒摄入量水平业已查明。在估量人硒摄入量时，食物和饮食的种类可能是最主要的变量。鱼类产品（特别是虾）、肉类产品、谷物及面包是主要富硒食品。农田中施用硒酸盐有助于纠正硒营养缺乏。     

经股动脉注射途径建立前列腺癌和乳腺癌骨转移模型

目的 探索建立高效、可靠的肿瘤骨转移动物模型的方法.方法 将C57BL/6J雄鼠随机分为4组,每组15只;BALB/c雌鼠15只,设一组.将小鼠前列腺癌细胞RM-1和乳腺癌细胞4T1-luc消化、洗涤、计数后用生理盐水重悬至1×105/mL,取100μL,经股动脉将4T1 luc细胞注射到BALB/c雌鼠,并通过活体成像检验此方法转移成瘤的特异性.将100μL相同浓度的RM-1细胞悬液分别经股动脉、髂外动脉注射C57雄鼠各15只,比较两种不同注射方式所需时间、小鼠存活率,注射21天后将下肢骨HE切片,显微镜下观察并比较两种方法建立骨转移模型的成瘤率.结果 经股动脉途径注射肿瘤细胞悬液所需的止血时间为2.53±1.75 min,经髂外动脉注射方法所需的止血时间为4.70±1.63 min(P<0.05);经股动脉注射方法的手术时间为14.67±2.16 min,经髂外动脉注射方法的手术时间为22.47±3.50 min(P<0.05);术后21 d经股动脉和髂外动脉注射组小鼠的生存率分别为93.3%和66.7%(P<0.05);采用两种方法的肿瘤转移率均为100%;分别经股动脉和髂外动脉注射生理盐水组和肿瘤细胞悬浮液组在上述3项指标无显著差异.活体成像结果显示,肿瘤特异性地转移到了股骨和胫骨中.结论 经股动脉注射方法建立肿瘤骨转移模型的手术及止血时间短、小鼠的存活率及肿瘤转移的成功率、特异性高,可作为肿瘤骨转移的新型动物模型.