课堂教学与科研相结合的大学生科研能力培养探索

大学生科研能力的培养与科研活动的开展,对培养大学生的创新精神和实践能力、促进全面发展和丰富课余生活都具有特殊的意义.教学科研化,将科研内容融入课堂教学之中,培养学生科研问题意识.做到以科研促教学、以教学促科研.设立科研导师,实现教师与学生的科研互动,充分发挥高校教师的主导作用.通过不同形式的科研活动来分层次、有步骤地培养大学生的科研能力.     

染料木素的体外抗肿瘤作用研究

目的观察染料木素的体外抗肿瘤作用。方法采用溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)检测法测定染料木素对子宫内膜腺癌细胞系(JEC)、人肝癌SMMC-7721细胞系体外增殖的影响,按台盼蓝排染法计数活细胞,绘制细胞生长曲线。结果MTT法检测显示,染料木素对JEC细胞和SMMC-7721细胞增殖的抑制作用呈现剂量和时间依赖性;随染料木素浓度的升高,JEC和SMMC-7721细胞的生长曲线逐渐下移,10-4mol.L-1的染料木素作用下的JEC细胞生长曲线呈现与5Fu相似的下降趋势。结论染料木素具有一定的抗肿瘤作用。     

染料木素对胃癌细胞系体外生长的抑制作用

目的：观察染料木素的体外抗肿瘤作用。方法：采用溴化3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑[3-（4，5-dimethylthiazol-2-yl）-2，5-diphenyltetrazolium bromide，MTT]检测法测定染料木素对胃癌-7901（SGC-7901）和胃癌MKN45细胞系的细胞毒性作用，按台盼蓝排染法计数活细胞数，绘制细胞生长曲线。结果：MTT法检测显示，染料木素对SGC-7901细胞和MKN45细胞增殖的抑制作用随着药物剂量的增加（10^-4～10^-8mol／L）和作用时间的延长（12～96h），其抑制作用逐渐增强。细胞生长曲线显示：随染料木素浓度的升高曲线逐渐下移，100μg／ml的染料木素对SGC-7901细胞的曲线呈逐渐下降趋势。结论：染料木素对胃癌-7901和MKN45细胞的体外生长具有一定的抑制作用。     

钙调神经磷酸酶信号通路参与PGF2α诱导的心肌细胞肥大

目的： 研究前列腺素F₂α（PGF₂α）诱导心肌细胞肥大的作用及其细胞内信号转导通路。方法：利用乳鼠心肌细胞培养，以细胞直径、蛋白质含量和心房利钠因子（ANF）mRNA表达为心肌肥大反应指标，观察PGF₂α致心肌肥大效应。采用Fura-2/AM为荧光指示剂测定心肌细胞内钙浓度（［Ca²⁺］_i）；RT-PCR法半定量测定mRNA表达；Western blotting方法检测蛋白表达。结果：随着PGF₂α 浓度升高（10^-10-10^-5 mol/L），心肌细胞直径、蛋白含量和［Ca²⁺］_i均明显高于溶剂对照组（P﹤0.01）；PGF₂α 10^-7 mol/L使ANF mRNA表达明显高于对照组（P﹤0.01）；钙调神经磷酸酶（CaN）mRNA及CaN信号通路（含CaN及其下游因子NFAT₃和GATA₄）蛋白的表达亦明显高于对照组（P﹤0.05）。加入CsA（CaN阻断剂）后，PGF₂α诱导的心肌细胞肥大和［Ca²⁺］_i升高的作用明显降低（P﹤0.01），CaN mRNA和CaN信号通路蛋白的表达亦明显减少（P﹤0.05）。结论： PGF₂α诱导的心肌细胞肥大至少部分与其升高［Ca²⁺］_i从而激活CaN信号转导通路有关。     

刺梨提取物与氟尿嘧啶协同抗人肝癌SMMC-7721细胞的作用研究

目的:观察刺梨提取物(extract from Rosa roxburghii Tratt, CL)联合5-氟尿嘧啶(5-florouracil,5-FU)抗人肝癌细胞SMMC-7721的作用.方法:采用MTT法检测和生长曲线绘制分析CL联合5-FU对SMMC-7721细胞生长的影响;通过检测硝基四氮唑蓝(nitroblue tetrazolium,NBT)阳性细胞百分率和细胞培养上清液中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP )含量,分析CL联合5-FU对SMMC-7721细胞分化的影响;采用丫啶橙(acridine orange,AO)/溴化乙锭(ethidium bromide,EB)荧光染色法和FCM法检测CL联合5-FU对肿瘤细胞周期和细胞凋亡的影响.结果:联合作用组的细胞生长曲线较5-FU和对应浓度CL单独作用组下移,且联合作用组的联合作用系数q值为0.85～1.15,表明CL联合5-FU具有抗肿瘤相加作用;与对照组相比较,5-FU、CL和2药联合均能提高NBT阳性细胞比率(P<0.05),且联合用药组的NBT阳性细胞比率比CL单独作用组高(P<0.05);CL组和CL联合5-FU组均能降低细胞AFP含量,且随着CL浓度的增加而下降,但2组间差异无统计学意义(P>0.05);CL单独作用组和联合作用组间的细胞凋亡率无明显差异(P>0.05);与阴性对照组比较,5-FU组能增加异倍体细胞比率(P<0.05),CL组和CL联合5-FU组均能增加G0/G1期细胞比率(P<0.05)、减少S期细胞比率(P<0.05),联合用药组还能降低G2/M期细胞比率(P<0.05).结论:CL与5-FU具有协同抗SMMC-7721细胞的作用,其机制可能与2者协同诱导细胞分化和抑制细胞增殖有关.     

土荆芥果实挥发油GC-MS分析及其生物活性研究

目的:研究土荆芥果实挥发油的化学成分、抗菌活性和对HepG2细胞增殖的抑制作用.方法:采用水蒸气蒸馏法(SD)提取挥发油,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析土荆芥果实挥发油的化学成分,同时采用连续二倍梯度液体稀释法和转染法测定其抗菌活性,MTT法观察土荆芥果实挥发油对肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用.结果:从土荆芥果实挥发油中共鉴定出21种成分,主要为3-异丙基-6-甲基-7-氧杂双环[4.1.0]庚-2-酮(66.93％),1-甲基-4-(1-甲基已烯基)环已烯(15.67％)及邻甲基异丙苯(12.96％);土荆芥果实挥发油对白色链株菌、表皮葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌和变形杆菌有良好的抗菌活性;对人肝癌HepG2细胞增殖有很强的抑制作用(P＜0.01),孵育48,72 h后的IC50分别为0.0341,0.069mg·L-1.结论:荆芥果实挥发油主要成分为单萜类,具有良好的抗菌作用及抑制HepG2细胞增殖作用.     

广西北部湾红树林土壤放线菌的筛选和抗菌活性研究

目的 采用平板稀释法对红树林土壤放线菌进行筛选、分离和鉴定,并对其抑菌活性进行初步研究.方法 采用纸碟法、管碟法试验、稻瘟霉(P.oryzae)模型筛选具有抗菌活性菌株,并通过提取其基因组DNA,PCR16S rRNA保守序列,对其进行初步分类鉴定.结果 分离得到368株放线菌,其中3株都具有较好的抗菌、抗稻瘟霉活性,初步鉴定BLHK033、BLHK043为链霉菌属细菌、BLHK098为小单孢菌属细菌.结论 放线菌BLHK033、BLHK043、BLHK098具有较好的抗菌活性,具有开发抗菌、抗肿瘤新药的潜力.     

刺梨提取物联合5-氟尿嘧啶抗人子宫内膜腺癌作用

目的 探讨刺梨提取物（CL）联合5-氟尿嘧啶(5-florouracil,5-FU)的抗子宫内膜腺癌细胞株(JEC)作用。     

仓鼠胰腺癌细胞株移植性肝癌模型的建立及其生物学特性

目的:建立仓鼠胰腺癌细胞株(pGHAM-1)移植性肝癌模型, 并研究其生物学特性.方法:将pGHAM-1培养后配成4×1010/L, 取0.5 mL接种于仓鼠皮下, 成瘤后, 接种于仓鼠肝脏. 分别于第20、30、40天用B超仪检测肝脏肿瘤大小. 于接种后第40天处死动物, 观察肿瘤的生长、转移及腹水量. 解剖取出肝脏,用游标卡尺测量肿瘤大小, 切开肝脏直接观察肿瘤, 再进行HE染色的组织病理学检查, 免疫组织化学检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)及肿瘤转移相关蛋白(nm23-H1)的表达.结果:pGHAM-1种植性肝癌模型成功率达100%. B超仪检测仓鼠肝脏, 第20、30、40天肿瘤体积分别为84.1±21.9 mm3, 413.7±208.4 mm3, 2187.3±1882.8 mm3, 与10 d前者相比, 有非常显著性差异(P <0.01); 接种后第40天处死动物, 解剖观察肿瘤, 直接测量肿瘤体积为2948.0±2188 mm3, 其大小与第40天B超仪测量结果无显著性差异(P >0.05). 部分仓鼠可见血性腹水; 肝内未见肿瘤卫星结节; HE染色组织病理学检查为低分化胰腺癌; 免疫组织化学检测结果显示VEGF及nm23-H1蛋白低表达.结论:pGHAM-1种植性肝癌模型建立方法简便, 易复制, 是理想的肝癌研究模型.     

雄黄诱导人胃癌MGC -803细胞凋亡

目的 观察雄黄体外抗人胃癌MGC - 803细胞作用及其可能作用机制.方法 采用MTS法和细胞克隆实验法观察雄黄对MGC - 803细胞增殖的影响,应用PI/Hoechest33258双染法和流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光分光光度计检测细胞内钙和线粒体膜电位,荧光定量PCR测Bad mRNA的表达.结果 雄黄能剂量依赖性地抑制MGC - 803细胞的生长和克隆形成.雄黄作用后,MGC-803细胞出现凋亡形态学改变如染色质浓缩等;流式细胞仪检测显示,雄黄能剂量依赖性地诱导细胞凋亡,其中,225 μg/ml雄黄引起MGC-803细胞凋亡的百分率为(43.6±5.4)％.雄黄能剂量依赖性的引起MGC-803细胞的细胞内钙升高和线粒体膜电位降低,并上调Bad mRNA的表达.结论 雄黄具有一定的抗肿瘤作用,并能诱导细胞凋亡,可能与钙依赖的凋亡通路有关.