Selection and their antitumor activity of antisense oligonucleotides targeting messenger RNA of vascular endothelial growth factor receptor 2

Objective： To select the antisense oligonucleotides （asONs） which hybridize with the mRNA of vascular endothelial growth factor receptor2 （VEGFR2, also named as kinase insert domain-containing receptor：KDR） in an effective and specific way, and to investigate their antitumor activity in MCF-7 cells. Methods： The effective antisense oligonucleotides were chosen by computer prediction combined with oligonucleotide microarrays. The inhibition effect on MCF-7 cells proliferation was measured by MTT; and VEGFR2 expression was surveyed by Western-blotting and RT- PCR. Results： Using predicting secondary structure of VEGFR2 mRNA with RNA folding program, computer prediction designed 30 antisense oligonucleotide probes that were directed to local loose regions of RNA structure. In 30 probes, 4（4/30, 13.33%） antisense oligonucleotides showed strong hybridization intensities in oligonucleotide microarrays test and were selected. All these antisense oligonucleotides targeting 4 different sites of VEGFR2 mRNA lowered the level of VEGFR2 mRNA and protein present in MCF-7 cells. Proliferation of MCF-7 cells was reduced by 4 antisense oligonucleotides, respectively, in which asON1 was the most effective, with the inhibitory rates being 53.06% at 0.8 I.tmol/L. Conclusion： Combination of computer prediction with oligonucleotide microarrays is an effective way in selecting optimal antisense oligonucleotides. The antisense oligonucleotides showed good correlation between their antitumor activity and the hybridization intensities. The antisense oligonucleotides targeting VEGFR2 mRNA demonstrated prominent antitumor role in vitro.     

唑来膦酸注射液联合新癀片治疗骨转移癌疼痛的临床疗效观察

目的:观察唑来膦酸注射液联合新癀片治疗骨转移癌疼痛的临床疗效。方法:恶性肿瘤骨转移患者10例,予唑来膦酸注射液4mg加入生理盐水100ml缓慢滴注,滴注时间15min,4周1次。同时口服新癀片,每日3次,每次2片,服药2d。用药后观察2周。结果:10例中显效(CR)6例,有效(PR)4例,总有效率(CR PR)为100%。结论:联合使用唑来膦酸注射液和新癀片能有效改善恶性肿瘤骨转移患者的疼痛评分及生活质量。     

93株前列腺液病原菌分布及药敏结果分析

对我院１９９６－１９９８年间从前列腺液中分离的病原菌及药敏结果进行回顾分析。９３株菌中,葡萄球菌６５株,占６９．９％,链球菌１１株,占１１．８％,Ｇ－杆菌１７株,占１８．３％。药敏结果显示Ｇ＋球菌对青霉素、四环素、红霉素耐药率较高,对替考拉宁、呋喃坦啶敏感,未见对万古霉素耐药的菌株。Ｇ－杆菌对妥布、氟哌酸、环丙氟哌酸耐药率较高,对氧哌嗪青霉素＋他唑巴坦、亚胺培南、丁胺卡那敏感。本文结果对细菌性前列腺炎的细菌分布及经验选药治疗,具有参考价值。     

手术室术前心理护理的临床应用

心理护理作为现代护理模式的重要组成部分，已遍及护理实践的各个角落，它是一门实践性很强的应用学科。手术室护士怎样做好手术病人的心理护理，掌握、提高交流技巧，有待我们不断探索和研究。我院于2004年12月开始至今为病人实施开展术前访视，取得了许多可喜的成果。通过术前访视，在广泛了解术前病人心理问题的基础上，归纳总结了患者共同的心理问题共9条，     

文拉法新对慢性应激引起海马CA3区细胞萎缩与凋亡的干预效应

目的:研究文拉法新对慢性应激引起的海马CA3区萎缩和凋亡的预防与治疗作用。方法:实验于2004-06/2004-10在中南大学湘雅医学院病理学实验室完成,将SD大鼠随机分成对照组和3个实验组,用强迫性游泳4周的方法对大鼠进行慢性应激处理,断头处死后用石蜡切片苏木精-伊红染色法对海马CA3区组织进行切片染色,在电镜下观察CA3区神经元情况。同时观察各组实验期间的行为。结果:生理盐水对照组大鼠行为均表现正常;应激+生理盐水组大鼠均出现紧张度增加,探究行为受抑制,兴趣丧失或怪异行为;应激+阿米替林组多数出现探究行为抑制、兴趣减少等情况,未见怪异行为;应激+文拉法新组少数出现行为抑制,多数大鼠探究行为正常,未见震颤或怪异行为。生理盐水对照组未出现凋亡,其他各组发生凋亡的情况分别为:应激+生理盐水组:10/16(62%),应激+阿米替林组:6/16(38%),应激+文拉法新组:3/16(19%);经统计学检验表明,应激+阿米替林组出现凋亡的大鼠数和应激+生理盐水组差异没有显著性意义(P>0.05),和应激+文拉法新组差异也没有显著性意义(P>0.05),应激+文拉法新组和应激+生理盐水组差异存在显著性意义(χ2=6.652,P<0.05)。结论:文拉法新对于慢性应激所致的CA3区细胞萎缩与凋亡具有预防和治疗作用,且对探究行为无明显影响。     

大重量牵引快速复位法治疗颈椎脱位并关节突交锁的护理配合

总结29例大重量牵引快速复位法治疗颈椎脱位并关节突交锁的护理配合，其中27例复位成功，2例(均为不全瘫)改为手术切开复位棘突缠绕固定。认为：做好术前准备及心理支持，术中密切配合、仔细观察患对牵引的反应，术后加强并发症的护理是大重量快速牵引复位成功的保证。     

流式细胞术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的方法研究

目的探讨cydin／DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的可行性、科学性和优越性，为肿瘤的细胞周期分析提供科学有效的技术支持。方法运用cydin／DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白的表达。并与传统的免疫组织化学切片法进行比较。结果流式细胞术可以准确地对细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达进行定性、定量、定位的分析，较为系统地反映了细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达特性和肿瘤的生物学特性。结论Cyclin／DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质分析技术和共聚焦显微镜技术是一种科学有效的检测临床实体瘤细胞周期破坏特性的技术和方法。     

文拉法新对慢性应激引起海马CA3区细胞萎缩与凋亡的干预效应

目的：研究文拉法新对慢性应激引起的海马CA3区萎缩和凋亡的预防与治疗作用方法：实验于2004-06／2004-10在中南大学湘雅医学院病理学实验室完成，将SD大鼠随机分成对照组和3个实验组，用强迫性游泳4周的方法对大鼠进行慢性应激处理，断头处死后用石蜡切片苏木精一伊红染色法对海马CA3区组织进行切片染色，在电镜下观察CA3区神经元情况。同时观察各组实验期间的行为。结果：生理盐水对照组大鼠行为均表现正常；应激+生理盐水组大鼠均出现紧张度增加，探究行为受抑制，兴趣丧失或怿异行为；应激+阿米替林组多数出现探究行为抑制、兴趣减少等情况．未见怪异行为；应激+文拉法新组少数出现行为抑制，多数大鼠探究行为正常，未见震颤或怪异行为。生理盐水对照组未出现凋亡，其他各组发生凋亡的情况分别为：应激+生理盐水组：10／16(62％)，啦激+阿米替林组：6／16(38％)，应激+文拉法新组：3／16（19％)；经统计学检验表明．应激+阿米替林组出现凋亡的大鼠数和应激+生理盐水组差异没有显著性意义(P&;gt;0．05)，和应激+文拉法新组差异也没有显著性意义(P&;gt;0．05)。应激+文拉法新组和应激+生理盐水组差异存在显著性意义(x^2=6．652，P&;lt;0．05)。结论:文拉法新对于慢性应激所致的DA3区细胞萎缩与凋亡具有预防和治疗作用，且对探究行为无明显影响。     

乙型肝炎病毒感染母亲的新生儿免疫预防后远期保护效果

目的:探讨母亲感染乙型肝炎病毒(HBV)后,新生儿免疫预防措施及远期保护效果。方法:选择2013年1月至2014年12月定期产检并顺利分娩的240例HBV感染孕产妇及其新生儿(240例)作为研究对象。将接受免疫预防措施的120例孕产妇及其新生儿作为观察组,将未接受免疫预防措施的120例孕产妇及其新生儿作为对照组。比较2组新生儿HBV感染率,出生时、出生1年后乙型肝炎表面抗体(HBsAb)阳性率。随访5年,根据新生儿免疫预防效果,将母亲分为免疫成功组和失败组,分析影响免疫预防效果的因素。结果:观察组新生儿HBV感染率为0,低于对照组的16.67%(P0.05);出生时、出生1年后,观察组新生儿HBsAb阳性率分别为22.50%、96.67%,高于对照组(5.00%、78.33%,P0.001);观察组5年内加强接种乙肝疫苗率为26.67%,低于对照组(55.00%,P0.001)。免疫成功组与失败组母亲血清乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)滴度、HBV-DNA浓度、是否使用抗病毒药物、病毒变异情况差异均有统计学意义(P0.05)。结论:同时给予HBV感染孕产妇及其新生儿乙型肝炎免疫球蛋白(HBIg)、乙肝疫苗预防HBV母婴传播,可有效降低新生儿感染HBV风险,提高HBsAb阳性率,获得远期保护效果。     

固化DNA纳米胶体金探针杂交目视化比色检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因的实验研究

目的 建立以纳米金颗粒为载体的DNA探针杂交方法,快速、特异地检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)特异性mecA基因.方法 采用直径为60nm的胶体金纳米颗粒与巯基修饰的2条mecA基因寡核苷酸探针共价结合,制备成固化的DNA 金纳米探针.将金纳米探针与其互补的mecA基因靶序列在液相中杂交,通过调节2条探针的比例和不同的检测方法对杂交反应条件和产物检测进行优化.结果 金纳米探针呈稳定的酒红色,与互补的靶序列DNA进行液相杂交后颜色呈现明显的蓝色变化.当2条探针不对称加入时颜色变化更明显.采用反向色谱反应盘检测反应产物也可获得满意的效果.产物离心后检测灵敏度可达2.36 fmol/L.结论 固化纳米胶体金探针杂交技术具有快速简便的特点,有望为MRSA的快速检测提供一种新的方法.