重组人白细胞介素-1受体拮抗剂在猕猴体内的药物代谢动力学研究

目的研究重组人白细胞介素-1受体拮抗剂（rhIL-1ra）在猕猴体内的药物代谢动力学特点,为后续的临床实验提供参考。方法猕猴肌肉注射3个剂量组（0.5、1.5、4.5 mg·kg-1）,中剂量组同时连续给药,高剂量组交叉静脉注射给药计算绝对生物利用度,用ELISA法测定给药后的血药浓度。结果 3个剂量组（0.5、1.5、4.5 mg·kg-1）单次肌肉注射给药后,主要药代参数如下所示：平均消除半衰期（t1/2）分别为（1.37±0.11）、（1.62±0.33）和（1.78±0.12）h,平均药时曲线下面积AUC（0~24h）依次为（2468±397）、（6446±2578）和（17 733±3702）ng·h·ml-1,清除率（CL/F）按剂量顺序依次为（0.21±0.03）、（0.28±0.16）和（0.26±0.06）L·kg-1·h-1。rhIL-1ra绝对生物利用度为（56.9±21.9）%。结论本实验报道了猕猴单次肌肉注射rhIL-1ra后呈线性药代动力学特征消除,连续给药7 d在猕猴体内基本无蓄积。     

化学发光免疫法测定大鼠血清中金环蛇抗菌肽的含量

目的：采用化学发光免疫法测定大鼠血清金环蛇抗菌肽（BF-30）的含量,为药代动力学研究提供简单快速的检测手段,初步探讨BF-30体内药代动力学特征。方法建立化学发光免疫分析方法并对方法的基质效应、精密度、准确度、稳定性和稀释效应进行确证,应用该法检测Wistar大鼠血清中BF-30的浓度。结果在大鼠血清中,BF-30在0.5～40 ng/ml浓度范围内Logistic曲线拟合良好,最低定量限为0.5 ng/ml;该法不存在基质效应;日内精密度为8.76%～14.15％、日间精密度为4.91%～11.11％,准确度为-1.27%～-7.71%;样品在-20℃放置13 d、反复冻融2次稳定性良好;储备液在-20℃放置30 d稳定性良好;样品在稀释40倍后无稀释效应。结论该分析方法简便、准确、可靠,能满足大鼠血清中BF-30含量的测定及其临床前药代动力学研究。     

放射性核素污染伤口去污膜的研制与表征

目的 研发一款适用于放射性核素污染的去污膜,对其物理性质、核素清除效果和安全性进行考察。方法 以海藻酸钠和壳聚糖为基质膜,负载复方洗消剂配方制备去污膜。通过将去污膜置于生理盐水中,测试其溶胀性能;通过拉力机测试去污膜的断裂应力与应变。以生理盐水、基质膜、1%二乙烯三胺五乙酸五钠(DTPA-5Na) 基质膜组作为对照组,在豚鼠完整皮肤与伤口模型上检测去污膜对铀、铯、钴、铈和锶的清除效果。采用噻唑蓝比色法 (MTT)测试去污膜的浸提液对小鼠上皮样成纤维细胞 (L929) 的毒性;将去污膜的浸提液注射到 Kunming (KM) 小鼠体内,测试其全身急性毒性。将去污膜覆盖于新西兰兔背部测试皮肤刺激性。结果 去污膜成膜时间为 1.5 min,溶胀率为 (134.96 ± 3.49)%,断裂应力为 (393.88 ± 53.53)kN/m², 断裂应变为 (163.00 ± 35.29)%。在完整皮肤上,去污膜对铀的清除率为 (95.38 ± 0.23)%,对铯为 (96.57 ± 0.49)%。在伤口模型上,去污膜对铀、铯、锶、钴和铈的清除率分别为(92.16 ± 0.52)%、(90.44 ± 1.16)%、(92.03 ± 0.87)%、(92.79 ± 0.51)% 和(92.85 ± 0.82)%,均优于生理盐水、基质膜与1% DTPA-5Na基质膜组 (t = 3.81 ~ 4 498.55,P<0.001)。安全性评价试验表明,去污膜符合国家医疗器械生物学评价标准。结论 去污膜能够快速成膜且对多种核素均有良好的清除效果,安全性良好,适用放射性核素污染人员的完整皮肤或伤口去污,有望为核污染区域的工作人员提供安全保障。     

重组活化凝血因子Ⅶ药物的临床应用和研发现状

凝血因子Ⅶ(FⅦ)是一种维生素K依赖性丝氨酸蛋白酶,作为外源性凝血途径的启动子,主要用于体内产生FⅧ或FⅨ抑制剂的血友病A或B患者的治疗.重组活化凝血因子Ⅶ(rFⅦa)是FⅦ制品最主要的产品,在临床得到广泛的应用.为进一步提高患者疗效和用药顺应性,长效rFⅦa成为当前国际上的研究热点.该文综述了rFⅦa的药理特性、临床...     

羧肽酶G2在大鼠体内的组织分布及排泄

目的 探究[125I]标记的羧肽酶G2([125I]CPG2)尾静脉推注给予Wistar大鼠后的组织分布和排泄随时间的变化.方法 采用同位素示踪的方法,大鼠尾静脉推注[125I]CPG2700μg·kg-1后,于0,0.08,0.5,1,2,4,14和24 h经眼眶静脉采血,用酸沉放射性计算血药浓度,分析药物浓度-时间...     

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中LH14的含量

目的建立SD大鼠血浆中LH14的测定方法。方法以CS55为内标,采用HPLC-MS/MS法测定,以Ulti-mate C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,3μm)为分析柱,甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 ml/min,柱温为25℃,进样量5μl。结果在2～500 ng/ml浓度范围内具有良好的线性关系,线性方程为:Y=0.0333+0.0043X,R2=0.9928(n=8)。精密度与准确度均符合生物样品的测定要求,最低定量浓度为2 ng/ml。结论该检测方法简便、准确、专属性强,能够满足LH14在SD大鼠体内药代动力学研究的需要。     

分离大鼠原代肝细胞的改进方法

目的：建立一种简便、经济、高效分离原代大鼠肝细胞的方法，适用于体外药物代谢研究。方法：改进方法采用低浓度胶原酶“软消化”方式，并增加预孵育过程。比较传统分离方法和改进方法在细胞产量、活率以及胶原酶用量上的差异，并将改进方法所得细胞分别与CYP2C、CYP2E、CYP3A典型底物及新药17-AAG共孵育，检测CYP450酶活性及其实际应用价值。结果：改进方法分离的肝细胞在细胞产量尤其是活率上明显高于传统方法，胶原酶用量大大降低，典型底物甲苯磺丁脲、氯唑沙宗和睾酮经细胞代谢检测到典型羟基化代谢产物，17-AAG经孵育后与体内样品检测结果一致。结论：改进方法可明显提高细胞产量和活率，所得肝细胞具备良好的CYP450酶活性，适用于体外代谢研究，预测药物体内过程。     

HPLC-MS/MS测定比格犬血浆中非诺贝酸浓度及其药代动力学研究

目的建立快速有效的HPLC-MS/MS方法测定比格犬血浆中非诺贝特的代谢物非诺贝酸,并探讨其在比格犬体内的药代动力学。方法 4只健康雄性比格犬随机分为两组,在禁食状态下口服给药〔非诺贝特片（纳米）和对照药Tri-cor〕,HPLC-MS/MS测定非诺贝酸浓度。流动相为甲醇-水（0.1%甲酸）,在200μl.min-1流速下梯度洗脱,地西泮为内标,色谱柱为Thermo Syncronic-C8,柱温：20℃。质谱测定利用多离子监测扫描模式,电离方式为ESI正离子模式,检测离子反应非诺贝酸为m/z 319.10→232.86,地西泮为m/z 285.04→193.04。血药浓度数据经Origin Pro 7.5与WinNonlin Phoenix软件处理,计算主要药动学参数。结果本方法中非诺贝酸在5～1000 ng.ml-1范围内线性良好（r2〉0.98）,定量下限为5 ng.ml-1。方法的精密度准确度,专属性,绝对回收率,稳定性和基质效应均符合要求。非诺贝特纳米片和Tricor在比格犬体内的主要药动学参数：tmax为（1.50±1.16）和（1.94±2.48）h、t1/2为（8.58±3.41）和（8.02±2.08）h、Cmax为（5857.20±3563.44）和（6697.56±3912.92）ng.ml-1、AUC为（25 328.13±16 009.09）和（26 379.89±17 392.47）ng.h.ml-1。结论建立了准确、灵敏的HPLC-MS/MS检测方法用于比格犬血浆中非诺贝特代谢产物非诺贝酸的含量测定;研究了非诺贝酸在比格犬体内的药代动力学,结果显示非诺贝酸在比格犬体内的代谢动力学过程呈单室模型,该结果为不同来源非诺贝特片的生物等效性研究奠定了基础,为非诺贝特临床安全合理用药提供参考依据。     

γ计数仪测定99mTc-3PRGD2在肺癌肿瘤模型小鼠中的组织分布

目的 建立一种由γ计数仪测定放射性肿瘤显像剂锝[99mTc]标记的联肼尼克酰胺-3聚乙二醇-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸环肽二聚体(99mTc-3PRGD2)的方法,并研究肺癌肿瘤模型小鼠注射该显像剂后体内组织分布特点.方法 设置4个正常分布组和1个冷肽封闭组(对照组),均经由尾静脉注射该显像剂(8μg/kg)于肺癌肿瘤模型小鼠,正常分布组分别于0.5、1、2和4 h取其组织,对照组在注射放射性药物前0.5 h,腹腔注射0.2 ml 3PRGD2生理盐水溶液(浓度2.5 mg/ml),并于2 h取其组织,肿瘤及其他组织使用γ计数仪检测其放射强度.结果 模型小鼠的肿瘤中放射性药物含量很高,脑组织药物透过量极少;肾和膀胱放射性都很高,提示该药物可能主要经肾排泄;对照组小鼠除肾和膀胱外,其他组织的放射性均很低.结论 该显像剂具有肿瘤靶向性;冷肽可竞争性地抑制99mTc-3PRGD2与整合素αvβ3受体结合.     

Effect of γ-ray on metabolic enzyme CYP3A1 in rat liver on multiple levels北大核心CSCD

Aim To explore the effect of γ-ray on the mRNA,protein expression levels and metabolic activity level of the key drug metabolic enzyme CYP3A1 in rat liver. Methods Wistar rats were randomly divided into control group, 24 h post-radiation group and 72 h post-radiation group. The experimental group was exposed to total body irradiation of single 6 Gy γ-ray. Blood was collected from the orbital venous plexus for blood routine examination and biochemical analysis 24 h and 72 h after irradiation, and liver tissue was prepared for quantifying expression of CYP3A1 mRNA and liver-specific microRNA (miR-122-5p) through RT-PCR. The expression level of CYP3A1 protein was analyzed by Western blot, and the metabolic activity level of CYP3A1 detected by the specific substrate midazolam combined with LC-MS method. Results Com¬pared with the control group, the weights of the rats in the radiation group significantly decreased, and the number of white blood cells was markedly reduced. Simultaneously, the activities of alanine aminotrans-ferase and alkaline phosphatase continuously descended, as well as the levels of total bilirubin and bile acid significantly increased, which indicated that the liver may be damaged after radiation. The relative expression of CYP3A1 mRNA continued to increase significantly 24 h and 72 h after irradiation. CYP3A1 protein expression and metabolic activity levels showed an obvious increasing trend 24 h after irradiation, and rose significantly 72 h after irradiation compared with the control group. At the same time, the expression of miR-122-5p in liver of rats in the 24 h and 72 h post-radiation group continued to decrease rapidly compared with the control group. Conclusions γ-ray radiation may arouse damage effect on liver, which leads to the continuous up-regulation of the mRNA and protein expression levels of the capital metabolic enzyme CYP3A1 in liver tissue, as well as the elevation of the metabolic activity level. The regulatory mechanism might be related to miR-122-5p. © 2023 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.