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目的:探讨人细小病毒B19-XA株VP1蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的表达及其反应原性分析.方法:以PCR法扩增VP1全长基因,并将其克隆到pFastBac1载体中,通过转化E.coli DH10Bac筛选阳性克隆,抽提重组VP1-Bacmid.以VP1-Bacmid经Cellfectin介导转染昆虫细胞Sf9,获取重组杆状病毒,扩增后感染Sf9细胞表达VP1蛋白,并以SDS-PAGE进行鉴定.以表达的重组VP1蛋白作为抗原,采用间接ELISA法检测B19病毒感染的患儿血清抗体,并与德国ELISA试剂盒检测的结果比较,分析表达产物的反应原性.结果:(1)获得含VP1全长基因的重组杆状病毒,转染Sf9细胞后能表达相对分子质量(Mr)约87 000的VP1重组蛋白.(2)以表达的重组VP1蛋白作抗原,与B19病毒感染的患儿血清的反应,平均A值为0.46,P/N值>2.1,与德国ELISA试剂盒检测的结果(平均A值为0.68)相似.结论:人细小病毒B19-XA株VP1蛋白在Bac-to-Bac表达系统中可成功表达,且表达产物能有效地与抗B19病毒的阳性血清反应,具有良好的反应原性. 相似文献
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快速检测鼻咽分泌物中Adv和RSV抗原 总被引:1,自引:0,他引:1
快速检测鼻咽分泌物中Adv和RSV抗原第四军医大学西京医院儿科(710032)许东亮,张国成,樊世斌,钱新宏第四军医大学西京解放军323医院武力强呼吸道合胞病毒(RSV)和腺病毒(Adv)是引起小儿急性呼吸道感染的2种最常见的病原体,所致肺炎病情危重... 相似文献
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目的 寻求一种对磨牙残冠较理想的修复方法。方法 在尽可能保留牙本质套圈的情况下,对患牙进行洞形及根管制备,以直接法在口内制作带桩的、嵌体的蜡型,经铸造工艺加工成合金带桩嵌体,嵌体粘结后再进行牙体预备,最后以全冠修复患牙。结果 156颗患牙修复后经过3年随访功能良好,无修复体松动、脱落,无继发龋等情况。结论 带桩嵌体加全冠修复根管治疗后的磨牙残冠效果满意。 相似文献
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大鼠骨髓基质细胞体外增殖分化的实验方法研究 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:研究大鼠骨髓基质细胞(MSC)在体外增殖分化为神经元样细胞的条件,为MSC的移植提供实验参考。方法:用DMEM冲洗SD大鼠四肢骨的骨髓腔,通过密度梯度离心获得有核细胞后接种于DMEM/10%胎牛血清培养液中,观察在培养液中加入神经生长因子后对MSC的增殖、分化及存活的影响,并以β-巯基乙醇(β-ME)作对照观察MSC分化及分化后的存活情况。结果:在DMEM/10%胎牛血清培养液中加入神经生长因子后MSC增殖速度加快,培养7~9 d后有神经元样细胞形成,表达神经元特异性烯醇化酶(NSE)为(52±9.2)%,神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)为(15±7)%,细胞分化后继续培养仍可存活7 d以上。而用β-ME诱导MSC,6 h后表达NSE为(71.0±8.8)%,GFAP阴性,分化细胞24 h后逐渐死亡。结论:MSC在DMEM/10%胎牛血清培养液中加入神经生长因子后增殖速度加快,可以分化为神经元样细胞,分化细胞存活时间延长。 相似文献