马兜铃酸Ⅰ致人上尿路上皮细胞MMP9、VEGF、E-cadherin、ERK的活性变化

目的 探讨马兜铃酸Ⅰ （aristolochic acid Ⅰ,AA Ⅰ）诱导的可能癌变机制.分析AA Ⅰ能否诱导人尿路上皮细胞（SV-HUC-1）MMP9、VEGF、E-cadherin的表达.方法 SV-HUC-1细胞暴露于低浓度的AAⅠ （2.5、5.0、10μg/ml）48h,用蛋白免疫印迹（Western blot）法和荧光定量PCR分析MMP9、VEGF、E-cadherin的表达.此外用Western blot法比较马兜铃酸相关上尿路肿瘤（upper urothelial carcinomas associated with aristolochic acid nephropathy,AA-UUC）和非马兜铃酸相关上尿路肿瘤（non-AA-UUC）MMP9、VEGF、E-cadherin、PERK1/2蛋白表达变化.结果 随着AA Ⅰ浓度的增加,MMP9、VEGF逐渐表达增加,而E-cadherin表达下降.然而,当SV-HUC-1细胞预先用ERK1/2信号通路抑制剂（U0126）作用1h,MMP9、VEGF蛋白的表达被抑制,而E-cadherin蛋白的表达恢复.和non-AA-UUC相比,AA-UUC的MMP9、VEGF、PERK1/2呈高表达,而E-cadherin呈低表达.结论 低密度的AA Ⅰ可能通过激活SV-HUC-1细胞的ERK1/2信号通路使MMP9、VEGF、E-cadherin表达失调.马兜铃酸（AA）可能是上尿路肿瘤发生的原因之一.     

UroplakinⅢ在侵袭性膀胱癌中的表达及其临床意义

目的研究UroplakinⅢ（UPⅢ）在侵袭性膀胱癌（aggressive bladder cancer）中的表达情况及意义。方法选取74例侵袭性膀胱癌根治性膀胱切除术后的标本和10例正常膀胱组织,用免疫组织化学的方法检测UPⅢ的表达情况及膀胱癌组织中微血管密度（microvascular density,MVD）,并分析其与侵袭性膀胱癌的临床病理学指标关系。结果UPⅢ在侵袭性膀胱癌中的表达与在正常膀胱组织中表达相比差异有统计学意义（P〈0.0001）,74例侵袭性膀胱癌标本中,49例UPⅢ的表达阴性,25例表达阳性,其表达缺失与膀胱癌高分级、肌层浸润、淋巴管浸润呈正相关（P〈0.05）,侵袭性膀胱癌组织中UPⅢ阴性表达组的MVD明显高于UPⅢ阳性表达组（P〈0.01）。结论UPⅢ表达缺失与侵袭性膀胱癌的病理分级、分期及淋巴管浸润有相关性;UPⅢ可促进肿瘤血管形成从而进一步促进肿瘤细胞的生长。     

附睾肿瘤21例临床分析

目的提高对附睾肿瘤的认识,总结诊断和治疗经验。方法回顾性总结、分析已行手术治疗的21例附睾肿瘤患者的临床资料。结果良性肿瘤20例,恶性肿瘤1例;行肿瘤切除术ll例,附睾切除术5例,睾丸附睾切除术4例,根治性睾丸切除术1例。结论超声检查对附睾肿瘤诊断具有重要意义,良性病变者可行肿瘤或附睾切除,如为恶性则需行根治性手术。     

沉默 Notch-1 基因影响人膀胱癌 RT4 细胞生物学行为的体外实验研究

目的：研究沉默 Notch-1 基因对人膀胱癌 RT4 细胞增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化等生物学行为的影响。方法： 设计并构建 Notch-1 shRNA,选取 RT4 细胞作为研究对象分别进行转染。实验细胞分为 Notch-1 阴性对照组（shRNA NC）, Notch-1 干扰组（Notch-1 shRNA）。细胞转染 48 h 后,MTT 法检测细胞增殖水平变化;Transwell 检测细胞侵袭力的改变;流式细胞术检测细胞凋亡水平情况;RT-PCR 和 Western blot 检测凋亡相关蛋白（Bax、Bid、Bcl-2）及上皮间充质转化（EMT） 因子（E-cadherin、N-cadherin、Vimentin）在 mRNA 和蛋白水平上的改变。结果：与 shRNA NC 组相比,Notch-1 shRNA 组细胞增殖率明显下降（t =4.629,P =0.010）,侵袭力减弱（t = 8.193,P=0.001）,细胞凋亡率明显升高（t= –18.441,P<0.001）,Bad（t = –12.521,P<0.001 ;t = –6.983,P =0.002）、Bid（t = –9.231,P<0.001 ;t= –8.871,P=0.001）、E-cadherin（t= –13.457,P<0.001 ;t= –5.610,P=0.005）mRNA 和蛋白表达量增多,Bcl2（t=10.651,P<0.001 ;t=6.973,P=0.002）、N-cadherin（t=6.505,P<0.001 ;t=10.132,P=0.001）、Vimentin（t=9.135,P<0.001 ;t =5.630,P =0.005）mRNA 和蛋白表达量显著降低。结论：沉默 Notch-1 的表达能够抑制人膀胱癌 RT4 细胞的增殖和侵袭迁移,促进其细胞凋亡,其机制可能与诱导 Bad、Bid、E-cadherin,抑制 Bcl2、N-cadherin、Vimentin 的表达有关。     

电切冲洗液的制备及临床应用

 目的:制备等渗甘露醇的灭菌水溶液，用于膀胱肿瘤、前列腺肥大患者的电切除术中冲洗。方法:配制5%的甘露醇灭菌水溶液，建立质量控制标准，并作临床观察。结果:制备工艺可行，质控方法可靠，临床使用安全无刺激。结论:本制剂质量稳定，使用方便，手术结果满意。     

聚维酮在阿霉素膀胱灌注化疗中的临床疗效和作用机制

目的：探讨聚维酮联合阿霉素膀胱灌注预防浅表膀胱癌术后复发的临床疗效和抗肿瘤机制.方法：对231例浅表膀胱癌患者术后随机膀胱灌注聚维酮加阿霉素（实验组）或生理盐水加阿霉素（对照组）,观测预防复发效果.对50例患者术前膀胱灌注聚维酮联合阿霉素（实验组）或生理盐水加阿霉素（对照组）,免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达.紫外荧光法检测聚维酮对尿中阿霉素浓度和 24 h 尿药回收率的影响.结果：194例患者获随访,实验组与对照组相比复发率明显降低,复发时间明显延长（P＜0.01）.实验组与对照组相比Bax的表达明显上调（P＜0.01）,Bcl-2/Bax比率下调（P＜0.05）.聚维酮与生理盐水作溶剂相比膀胱内阿霉素的排泄时间延长2～4倍,但不影响尿中阿霉素回收率.结论：聚维酮联合阿霉素膀胱灌注对预防浅表性膀胱癌术后复发具有良好的疗效,且副作用少.其机制可能与聚维酮联合阿霉素诱导膀胱癌细胞凋亡和延长药物在膀胱内驻留时间有关.     

间歇性雄激素阻断治疗晚期前列腺癌

目的:观察间歇性雄激素阻断治疗晚期前列腺癌患者的周期特点、疗效及副反应.方法:45例晚期前列腺癌行间歇性联合雄激素阻断治疗(LHRH类似物 非甾体类抗雄激素药物),持续用药至少4个月,至血前列腺特异抗原(PSA)降至最低值则停药进入间歇期,当PSA上升至初诊时的50%或大于10 ng/ml,则重新开始治疗.当发展为雄激素抵抗性前列腺癌或临床进展则停止治疗.结果:71.1%(32/45)患者完成第一个治疗周期,最多的已达4周期,间歇期占治疗周期的54%.随着重复治疗次数的增加每个周期发生疾病进展的比例也随之增加(P=0.006)且间歇期缩短(P＞0.05).患者三年进展率为53.1%,中位疾病进展时间为28.5个月,无骨转移患者和有骨转移患者三年进展率分别为23.61%和60.4%.间歇期副反应比治疗期明显减少.结论:间歇性雄激素阻断治疗晚期前列腺癌,间歇期长,疗效较好,副反应少,具有可行性,是一种较好的治疗方法.     

后腹腔镜手术治疗肾上腺疾病（附45例报告）

目的应用后腹腔镜手术治疗肾上腺疾病并评价其临床价值。方法应用后腹腔镜手术治疗肾上腺疾病45例,包括肾上腺皮质腺瘤28例(原发性醛固酮增多症17例,皮质醇症1例,无功能腺瘤10例),肾上腺嗜铬细胞瘤8例,肾上髓样脂肪瘤2例,肾上腺囊肿7例。病变位于右侧27例,左侧18例。全部病例均采用腹膜后径路。结果45例手术中41例取得成功,转开放手术4例,其中2例因寻找肾上腺不熟练,1例术中出血视野不清,1例出现气胸,均发生在开展手术初期。后腹腔镜手术成功病例手术时间40～190min,平均110min。术中失血20～200ml,平均出血量136ml,均未输血。术后1～2d恢复进食,1～3d可下床活动。术后住院时间2～10d,平均4.1d。结论与开放手术相比,后腹腔镜手术具有创伤小、出血少、并发症少、术后病人恢复快、住院时间短等优点,可成为肾上腺良性疾病的首选手术方法。     

非那雄胺在晚期前列腺癌间歇性雄激素阻断治疗间隙期的应用

目的 研究非那雄胺在晚期前列腺癌间歇性雄激素阻断(IAB)治疗间隙期的应用是否能延缓晚期前列腺癌的疾病进展. 方法 87例晚期前列腺癌患者分2组,A组49例行单纯IAB治疗,B组38例在IAB治疗的基础上间歇期采用非那雄胺治疗.比较2组患者的疾病治疗周期和疾病进展时间. 结果 A组患者共完成89个治疗周期,平均治疗周期为(12.8±5.4)个月,其中治疗期为(6.6±3.5)个月,间歇期为(7.1±4.8)个月;B组患者共完成85个治疗周期,平均治疗周期为(15.3±5.9)个月,其中治疗期为(6.9±3.2)个月,间歇期为(9.2±3.9)个月;B组治疗周期和间歇期长度大于A组(P=0.0428,P=0.03).B组3年疾病进展率(28.4±2.7)%,低于A组的(34.8±3.5)%(P=0.0350). 结论 非那雄胺在晚期前列腺癌间歇性IAB间隙期的应用能延缓晚期前列腺癌的疾病进展.     

前列腺癌患者外周血中前列腺癌抗原3基因和前列腺特异性抗原基因联合检测的意义

目的 评价外周血前列腺痛抗原3基因(prostate cancer antigen 3,PCA3 mRNA)和前列腺特异性抗原基因(prostate specific antigen,PSA mRNA)联合检测对前列腺癌(PCa)及对其微转移诊断的价值.方法 用双重荧光实时定量逆转录(dFQ-RT)-PCR对49例PCa和71例前列腺增生(BPH)患者外周血PCA3 mRNA和PSA mRNA进行定量检测,通过受试者工作特征(ROC)曲线评价其在PCa诊断和微转移监测中的价值.结果 PCa组外周血PCA3 mRNA含量明显高于BPH组[2 362(<3-7 421)拷贝/ml比<30拷贝/ml,Z=-6.66,P<0.01],而PSA mRNA含量也明显高于BPH组[3 425(908～36 639)拷贝/ml比<200拷贝/ml,Z=-6.40,P<0.01];PCa组外周血PCA3mRNA和PSA mRNA的阳性率随临床分期增高而增加[B期:均为30.0%(3/10),C期:60.0%(9/15)和86.7%(13/15),D期:91.7%(22/24)和91.7%(22/24);χ2分别为13.534和16.451,P均<0.01],同时也随Gleason评分增高而增加[2～4分:20.0%(1/5)和40.0%(2/5);5～7分:66.7%(12/18)和72.2%(13/18);8～10分:84.6%(22/26)和92.3%(24/26);χ2分别为8.895和8.015,P均<0.05];ROC曲线显示,当PCA3 mRNA和PSA mRNA临界值分别为846拷贝/ml和280拷贝/ml时,诊断PCa敏感度分别为69.4%(34/49)和81.7%(40/49),特异度分别为90.1%(64/71)和77.5%(55/71);而联合检测时其敏感度可增至85.7%(42/49),但特异度下降为76.1%(54/71).PCA3 mRNA诊断PCa微转移的敏感度和特异度分别为90.9%(20/22)和84.7%(11/13).结论 外周血PCA3 mRNA和PSA mRNA检测是PCa诊断的良好指标,而联合检测可弥补PCA3 mRNA敏感度低和PSA mRNA特异度低的不足,而更有利于PCa诊断;PCA3 mRNA可能为PCa微转移诊断的良好指标.